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白念珠菌CYP51免疫原性肽多克隆抗血清的制备与鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
第一章 前言第10-15页
   ·羊毛甾醇14α-去甲基化酶(P45014DM)与白念珠菌耐药机理第10页
   ·基于免疫原性肽的多克隆抗体第10-11页
   ·表达载体的选择第11-12页
   ·白念珠菌CYP51 免疫原性肽多克隆抗血清的制备与鉴定流程第12-13页
   ·讨论与小结第13-15页
第二章 CYP51 免疫原性肽的设计第15-17页
   ·免疫原性肽设计简介第15页
   ·生物信息学在蛋白质分析中的运用第15-16页
   ·CYP51 蛋白的生物信息学分析第16页
     ·CYP51 蛋白疏水性的分析第16页
     ·CYP51 蛋白免疫原性的分析第16页
   ·CYP51 免疫原性肽的设计第16-17页
第三章 CYP51 蛋白抗原决定簇(免疫原性肽)基因重组表达质粒的构建与表达第17-28页
   ·材料第17-18页
     ·主要试剂第17页
     ·菌株和质粒第17页
     ·引物合成第17页
     ·基因组来源第17页
     ·溶液配制第17-18页
     ·培养基第18页
     ·主要仪器第18页
   ·方法第18-24页
     ·白念珠菌SC5314 基因组的提取第18页
     ·引物设计第18-19页
     ·目的基因的获得第19页
     ·目的基因的克隆和阳性重组子的筛选第19-22页
     ·表达质粒的构建与鉴定第22-24页
     ·目的基因的诱导表达第24页
     ·表达产物的SDS 蛋白电泳分析第24页
   ·结果第24-27页
     ·CYP51A1 cDNA片段的扩增第24-25页
     ·克隆载体的构建与鉴定第25页
     ·表达载体的构建与鉴定第25页
     ·基因的表达及表达蛋白的初步鉴定第25-27页
   ·讨论与小结第27-28页
第四章 目的蛋白表达条件的优化、纯化及初步鉴定第28-38页
   ·材料第28-29页
     ·试剂第28页
     ·溶液配制第28-29页
     ·主要仪器第29页
   ·方法第29-32页
     ·目的蛋白表达条件的优化第29-30页
     ·包涵体的纯化第30-31页
     ·纯化产物的Western blot鉴定第31-32页
   ·结果第32-36页
     ·表达条件的优化第32-33页
     ·包涵体的纯化第33-34页
     ·纯化产物的Western blot鉴定第34-36页
   ·讨论与小结第36-38页
第五章 兔抗CYP51 多克隆抗体的制备第38-42页
   ·材料第38页
     ·试剂第38页
     ·溶液配制第38页
     ·主要仪器第38页
   ·方法第38-39页
     ·抗原的乳化第38页
     ·家兔免疫第38页
     ·抗体效价测定(ELISA 法.)第38-39页
     ·抗体特异性检测(Western Blot 免疫印迹.)第39页
   ·结果第39-41页
   ·讨论与小结第41-42页
参考文献第42-43页
(综述 )对RNA干扰机制探索的回顾及其在酵母研究中的进展第43-51页
 参考文献第49-51页
致谢第51页

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