| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩写词表 | 第10-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-47页 |
| ·高等植物细胞壁的研究进展 | 第17-26页 |
| ·高等植物细胞壁成分和结构模型 | 第17-23页 |
| ·纤维素 | 第18-19页 |
| ·半纤维素 | 第19-20页 |
| ·果胶 | 第20-22页 |
| ·木质素 | 第22页 |
| ·细胞壁蛋白 | 第22-23页 |
| ·细胞壁结构模型 | 第23-25页 |
| ·细胞壁的功能 | 第25-26页 |
| ·高等植物细胞壁中的结构蛋白质 | 第26-44页 |
| ·伸展蛋白 | 第26-30页 |
| ·伸展蛋白的结构 | 第27页 |
| ·伸展蛋白的结构功能 | 第27-28页 |
| ·伸展蛋白基因的表达及其调节 | 第28-29页 |
| ·伸展蛋白的功能 | 第29-30页 |
| ·富含甘氨酸蛋白 | 第30-34页 |
| ·细胞壁GRP的结构 | 第30-31页 |
| ·GRP基因的表达及其调控 | 第31-32页 |
| ·GRP功能 | 第32-34页 |
| ·富含脯氨酸蛋白 | 第34-36页 |
| ·PRP的分类和结构 | 第34-35页 |
| ·PRP基因的表达及其调控 | 第35-36页 |
| ·PRP的功能 | 第36页 |
| ·阿拉伯半乳聚糖蛋白 | 第36-44页 |
| ·AGP的结构 | 第37-38页 |
| ·AGP的表达及其调控 | 第38-39页 |
| ·AGP的功能 | 第39-44页 |
| ·立题依据和研究意义 | 第44-47页 |
| 第二章 棉花纤维特异表达PRP基因的分离、鉴定和表达分析 | 第47-82页 |
| ·前言 | 第47-48页 |
| ·实验材料 | 第48-51页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·菌种和质粒 | 第48页 |
| ·化学试剂和溶液 | 第48-51页 |
| ·常用储存液 | 第48-49页 |
| ·常用缓冲液 | 第49页 |
| ·常用培养基 | 第49-50页 |
| ·棉花总RNA的提取试剂 | 第50页 |
| ·PCR扩增分析试剂 | 第50页 |
| ·转膜和点杂交所用试剂 | 第50页 |
| ·Northern杂交用试剂 | 第50-51页 |
| ·实验器材 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-63页 |
| ·点杂交 | 第51-53页 |
| ·目的cDNA序列的获得 | 第51页 |
| ·目的克隆转化E.coli | 第51-52页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第52页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第52-53页 |
| ·细胞壁结构蛋白的cDNA芯片杂交 | 第53-55页 |
| ·改良热酚法提取棉花纤维和种皮RNA | 第53-54页 |
| ·DNase消化除去RNA中的DNA | 第54页 |
| ·RNA的纯化 | 第54页 |
| ·纯化RNA的逆转录和探针的标记 | 第54-55页 |
| ·芯片杂交 | 第55页 |
| ·基因序列分析 | 第55页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第55-58页 |
| ·逆转录 | 第55-56页 |
| ·PCR检测反应 | 第56页 |
| ·引物设计 | 第56-58页 |
| ·Real-time PCR反应 | 第58页 |
| ·Northern杂交 | 第58-60页 |
| ·改良热酚法提取总RNA见方案2.3.2.1 | 第58页 |
| ·转膜 | 第58-59页 |
| ·杂交 | 第59-60页 |
| ·GhPRP3过量表达载体和RNAi载体的植物遗传转化 | 第60-63页 |
| ·引物设计和载体构建 | 第60-61页 |
| ·农杆菌介导的烟草叶盘和棉花下胚轴遗传转化 | 第61-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-77页 |
| ·芯片杂交分离细胞壁结构蛋白基因 | 第63-65页 |
| ·GhGRPs序列分析、基因鉴定和表达分析 | 第65-68页 |
| ·棉花GhGRP基因及其编码的蛋白质序列特征 | 第65-66页 |
| ·棉花GhGRP1、GhGRP2和GhGRP3蛋白二级结构特点 | 第66-68页 |
| ·棉花GhGRP1、GhGRP2和GhGRP3基因的组织差异表达 | 第68页 |
| ·GhPRPs序列分析、基因鉴定和表达分析 | 第68-76页 |
| ·棉花GhPRP基因及其编码的蛋白质序列特征 | 第68-69页 |
| ·GhPRP 3-8和GhPRPL结构分析 | 第69-70页 |
| ·典型PRPs的结构特点 | 第70-71页 |
| ·PRPL的结构特点 | 第71-73页 |
| ·GhPRP基因在不同棉花组织中的差异表达 | 第73-74页 |
| ·GhPRP3、GhPRP5和GhPRP7基因表达受棉纤维发育调节 | 第74-75页 |
| ·Northern杂交分析GhPRP基因的表达 | 第75-76页 |
| ·GhPRP3过量表达和RNAi载体的植物遗传转化 | 第76-77页 |
| ·载体构建及农杆菌转化 | 第76-77页 |
| ·过量表达载体转基因烟草植株的获得及其检测 | 第77页 |
| ·讨论 | 第77-82页 |
| ·采用芯片杂交法分离筛选基因 | 第77-78页 |
| ·用不同基因表达方法验证芯片杂交法分离基因的可靠性 | 第78页 |
| ·棉花GhGRP基因的结构特点和初步表达分析 | 第78-79页 |
| ·棉花中几个PRP基因的分离鉴定和表达分析 | 第79-81页 |
| ·GhPRP3过量表达载体烟草遗传转化 | 第81-82页 |
| 第三章 棉花FLA基因的分离、鉴定和表达分析 | 第82-102页 |
| ·前言 | 第82-84页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-88页 |
| ·激素和NaCl处理离体棉花10DPA胚珠和纤维 | 第84页 |
| ·GhFLA基因的分离 | 第84-85页 |
| ·GhFLA的鉴定 | 第85-86页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第86-87页 |
| ·GhFLA1过量表达载体和RNAi载体的植物遗传转化 | 第87-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-98页 |
| ·棉花FLA基因的分离 | 第88-89页 |
| ·棉花FLAs的结构分析 | 第89-93页 |
| ·GhFLA基因在棉花不同组织中的分化表达 | 第93-94页 |
| ·GhFLA基因在棉花纤维中的表达是发育调控的 | 第94-95页 |
| ·GhFLA基因的在纤维中的表达也受植物激素和NaCl的调节 | 第95-96页 |
| ·GhFLA1过量表达载体和RNAi载体的烟草的遗传转化 | 第96-97页 |
| ·GhFLA1过量表达载体和RNAi载体的棉花遗传转化 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-102页 |
| 第四章 棉花细胞壁结构蛋白基因启动子的克隆和表达活性分析 | 第102-118页 |
| ·前言 | 第102-104页 |
| ·材料 | 第104-105页 |
| ·植物材料 | 第104页 |
| ·菌株和载体 | 第104-105页 |
| ·主要试剂 | 第105页 |
| ·培养基 | 第105页 |
| ·方法 | 第105-109页 |
| ·引物设计 | 第105-106页 |
| ·Genome walker PCR方法调取启动子 | 第106-107页 |
| ·利用BD Genome Walker库进行PCR扩增 | 第106-107页 |
| ·启动子片段的测序 | 第107页 |
| ·序列分析 | 第107页 |
| ·启动子表达载体的构建和植物遗传转化 | 第107-109页 |
| ·启动子表达载体的构建 | 第107-108页 |
| ·烟草的培养和遗传转化和GUS染色 | 第108-109页 |
| ·拟南芥的培养、遗传转化和GUS染色 | 第109页 |
| ·结果与分析 | 第109-116页 |
| ·GhPRP3、GhPRP5、GhFLA1和GhFLA4启动子的获得 | 第109-110页 |
| ·pGhPRP3、pGhPRP5、pGhFLA1和pGhFLA4序列分析 | 第110-113页 |
| ·四个启动子序列与GUS融合载体构建 | 第113页 |
| ·启动子载体转化烟草植株及组织化学染色 | 第113-115页 |
| ·启动子载体转化拟南芥及组织化学染色 | 第115-116页 |
| ·讨论 | 第116-118页 |
| ·启动子分离 | 第116页 |
| ·启动子的生物信息学分析 | 第116-117页 |
| ·启动子的特异性表达 | 第117-118页 |
| 第五章 GhFLA1和GhFLA4蛋白的亚田胞定位 | 第118-127页 |
| ·前言 | 第118-119页 |
| ·材料 | 第119-120页 |
| ·植物材料 | 第119页 |
| ·菌株和载体 | 第119页 |
| ·主要试剂 | 第119页 |
| ·主要培养基配方 | 第119-120页 |
| ·方法 | 第120-121页 |
| ·载体构建 | 第120-121页 |
| ·引物设计 | 第120页 |
| ·PCR、重组反应以及重组片段的检测 | 第120-121页 |
| ·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化 | 第121页 |
| ·愈伤组织细胞的荧光观察和照相 | 第121页 |
| ·拟南芥的培养、遗传转化 | 第121页 |
| ·拟南芥根细胞的荧光观察和照相 | 第121页 |
| ·结果与分析 | 第121-125页 |
| ·载体构建及检测 | 第121-122页 |
| ·GhFLA1和GhFLA4在棉花细胞中的定位 | 第122-123页 |
| ·GhFLA4在拟南芥根中的定位 | 第123-125页 |
| ·讨论 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-145页 |
| 附录 | 第145-149页 |
| 博士期间已发表的论文 | 第149-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
