| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-14页 |
| 英文缩略语说明 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一章 高低侵袭力绒毛膜癌细胞株差异表达基因的筛选和鉴定 | 第20-54页 |
| ·前言 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验对象 | 第21页 |
| ·主要仪器及设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂及原料 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-32页 |
| ·细胞增养 | 第23-24页 |
| ·噻唑盐比色实验(即MTT)法 | 第24页 |
| ·Matrigel体外侵袭试验(Matrigel Invasion Assay) | 第24-26页 |
| ·构建基因芯片 | 第26-30页 |
| ·半定量RT-PCR方法验证差异基因 | 第30-32页 |
| ·统计学处理 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-40页 |
| ·绒毛膜癌JEG-3细胞和JAR细胞增殖能力的差异 | 第32-33页 |
| ·绒毛膜癌JEG-3细胞和JAR细胞之间侵袭能力的差异 | 第33-34页 |
| ·绒毛膜癌JEG-3细胞和JAR细胞RNA质量的鉴定 | 第34页 |
| ·基因芯片杂交结果 | 第34-40页 |
| ·讨论 | 第40-48页 |
| ·滋养层细胞的侵袭 | 第41-42页 |
| ·绒毛膜癌细胞侵袭力的鉴定 | 第42页 |
| ·绒毛膜癌细胞侵袭能力相关基因的筛选 | 第42-48页 |
| ·小结 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 第二章 靶向Caveolin-1 shRNA载体的构建和沉默效应观察 | 第54-86页 |
| ·前言 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第55-60页 |
| ·实验对象 | 第55-56页 |
| ·主要仪器及设备 | 第56-57页 |
| ·主要试剂及原料 | 第57-60页 |
| ·实验方法 | 第60-72页 |
| ·细胞培养 | 第60-61页 |
| ·构建针对CAV-1基因的shRNA真核表达载体pshRNA-CAV-1 | 第61-64页 |
| ·细胞传染和筛选稳定表达shRNA细胞 | 第64-65页 |
| ·RT-PCR方法检测CAV-1 mRNA在shRNA组、阴性对照组、空白组JEG-3细胞中的表达差异 | 第65-67页 |
| ·Western Blot方法检测CAV-1蛋白在shRNA组、阴性对照组、空白组JEG-3细胞中的表达差异 | 第67-70页 |
| ·Tanswell法检测CAV-1shRNA对JEG-3细胞的体外侵袭能力的影响 | 第70-71页 |
| ·裸鼠皮下异种移植模型和肺转移模型观察CAV-1shRNA对JEG-3细胞的体内侵袭转移能力的影响 | 第71-72页 |
| ·统计学处理 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-78页 |
| ·成功构建CAV-1基因真核表达载体pshRNA-CAV-1 | 第72-73页 |
| ·CAV-1 shRNA转染至JEG-3细胞成功性的鉴定 | 第73页 |
| ·RT-PCR检测各组别JEG-3细胞中CAV-1 mRNA的表达差异 | 第73-74页 |
| ·Western Blot各组别JEG-3细胞中CAV-1蛋白的表达差异 | 第74-75页 |
| ·Tanswell法检测CAV-1 shRNA对JEG-3细胞体外侵袭能力的影响 | 第75-76页 |
| ·裸鼠皮下异种移植模型和肺转移模型观察CAV-1 shRNA对JEG-3细胞的体内侵袭能力的影响 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-82页 |
| ·CAV-1基因与恶性肿瘤侵袭转移的关系 | 第78-79页 |
| ·RNAi技术的研究进展 | 第79-81页 |
| ·CAV-1基因在人绒毛膜癌侵袭、转移过程中的作用 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 第三章 靶向VEGF-B shRNA载体的构建和沉默效应观察 | 第86-121页 |
| ·前言 | 第86-87页 |
| ·实验材料 | 第87-92页 |
| ·实验对象 | 第87页 |
| ·主要仪器及设备 | 第87-88页 |
| ·主要试剂及原料 | 第88-92页 |
| ·实验方法 | 第92-106页 |
| ·细胞培养 | 第92-93页 |
| ·构建针对VEGF-B基因的shRNA真核表达载体pshRNA-VEGF-B | 第93-96页 |
| ·细胞转染和筛选稳定表达shRNA细胞 | 第96-97页 |
| ·RT-PCR方法检测VEGF-B mRNA在shRNA组、阴性对照组、空白组JEG-3细胞中的表达差异 | 第97-99页 |
| ·Western Blot方法检测VEGF-B蛋白在shRNA组、阴性对照组、空白组JEG-3细胞中的表达差异 | 第99-102页 |
| ·Tanswell法检测VEGF-B shRNA对JEG-3细胞的体外侵袭能力的影响 | 第102-103页 |
| ·裸鼠皮下异种移植模型和肺转移模型观察VEGF-B shRNA对JEG-3细胞的体内侵袭转移能力的影响 | 第103-106页 |
| ·统计学处理 | 第106-107页 |
| ·结果 | 第107-114页 |
| ·成功构建VEGF-B基因真核表达载体pshRNA-VEGF-B | 第107页 |
| ·VEGF-B shRNA转染至JEG-3细胞成功性的鉴定 | 第107页 |
| ·RT-PCR检测各组别JEG-3细胞中VEGF-B mRNA的表达差异 | 第107-109页 |
| ·Western Blot各组别JEG-3细胞中VEGF-B蛋白的表达差异 | 第109-110页 |
| ·Tanswell法检测VEGF-B shRNA对JEG-3细胞体外侵袭能力的影响 | 第110-111页 |
| ·裸鼠皮下异种移植模型和肺转移模型观察VEGF-B shRNA对JEG-3细胞的体内侵袭能力的影响 | 第111-112页 |
| ·免疫组化结果判定 | 第112-114页 |
| ·裸鼠皮下移植瘤中VEGF-B蛋白的表达水平与肿瘤MVD之间的相关性分析 | 第114页 |
| ·讨论 | 第114-117页 |
| ·VEGF-B与肿瘤相关性研究 | 第114-116页 |
| ·人绒毛膜癌侵袭、转移过程中VEGF-B基因的促血管生成作用 | 第116-117页 |
| ·小结 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-121页 |
| 综述一 Caveolin-1在相关疾病中的研究进展 | 第121-135页 |
| 1.Caveolae和Caveolin-1概述 | 第121-122页 |
| ·Caveolae | 第121-122页 |
| ·Caveolin-1的结构特点及生理功能 | 第122页 |
| 2.Caveolin-1与疾病 | 第122-131页 |
| ·Caveolin-1与病原体感染 | 第123-124页 |
| ·Caveolin-1与糖尿病 | 第124-125页 |
| ·Caveolin-1与心血管疾病 | 第125-127页 |
| ·Caveolin-1与肿瘤 | 第127-131页 |
| 3.结论与展望 | 第131页 |
| 参考文献 | 第131-135页 |
| 综述二 VEGF-B—促血管新生和肿瘤转移 | 第135-144页 |
| 1.VEGF-B的基因位置与分子结构 | 第135-136页 |
| 2.VEGF-B的分泌及表达 | 第136页 |
| 3.VEGF-B的临床研究 | 第136-139页 |
| ·VEGF-B与肿瘤相关性研究 | 第136-138页 |
| ·VEGF-B与其受体在心血管方面的相关性研究 | 第138-139页 |
| ·VEGF-B在妇科疾病中的研究进展 | 第139页 |
| 4.VEGF-B的研究意义及应用前景 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第145-146页 |
