| 英文缩写词 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 材料与方法 | 第14-24页 |
| 1.实验材料 | 第14-15页 |
| (1) 细胞、质粒和菌株 | 第14页 |
| (2) 工具酶 | 第14页 |
| (3) 试剂 | 第14页 |
| (4) 实验动物 | 第14-15页 |
| 2.主要仪器 | 第15-16页 |
| 3.实验方法 | 第16-24页 |
| (1) 目的基因的获取 | 第16-17页 |
| (2) 原核表达质粒的构建、筛选、鉴定和保存 | 第17-20页 |
| (3) 重组质粒的转化 | 第20页 |
| (4) 蛋白的原核表达 | 第20-21页 |
| (5) p21ras蛋白的纯化 | 第21页 |
| (6) Western blot分析 | 第21页 |
| (7) 蛋白质复性 | 第21-22页 |
| (8) 多克隆抗体的制备 | 第22页 |
| (9) ELISA检测 | 第22-24页 |
| 结果 | 第24-33页 |
| 1.总RNA提取 | 第24页 |
| 2.逆转录及PCR扩增产物的鉴定 | 第24-25页 |
| 3.原核表达质粒的构建与鉴定 | 第25-27页 |
| (1) H-ras原核表达质粒的构建与鉴定 | 第25-26页 |
| (2) K-ras和N-ras原核表达质粒的构建与鉴定 | 第26-27页 |
| 4.蛋白诱导表达与纯化 | 第27-29页 |
| 5.Western blot分析 | 第29页 |
| 6.多克隆抗体的制备与检测 | 第29-33页 |
| 讨论 | 第33-43页 |
| 1.重组P21ras蛋白的表达及其意义 | 第33-34页 |
| 2.原核表达质粒的正确构建 | 第34-35页 |
| 3.原核表达条件的优化 | 第35页 |
| 4.蛋白纯化与复性方法的讨论 | 第35-38页 |
| 5.蛋白复性 | 第38页 |
| 6.蛋白免疫原性的讨论 | 第38-39页 |
| 7.本实验的意义与创新 | 第39-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 附图 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51-77页 |
| 论文综述 | 第77-88页 |
| 致谢 | 第88页 |