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两种单功能铂配合物的细胞水平机理研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 绪论第11-28页
   ·铂类抗肿瘤药物的发展第11-16页
     ·顺铂第11-12页
     ·顺铂类似物第12-14页
     ·反式铂类配合物第14-15页
     ·单功能铂(Ⅱ)配合物第15页
     ·多核铂(Ⅱ)配合物第15-16页
   ·铂类药物细胞水平作用机理第16-18页
     ·铂类药物的跨膜运输第16页
     ·Pt-DNA加合物第16-18页
   ·细胞死亡方式第18-22页
     ·细胞凋亡和细胞坏死第19-20页
     ·自噬性细胞死亡第20-22页
     ·类凋亡第22页
   ·单功能铂配合物的前期研究第22-24页
 参考文献第24-28页
第二章 新型单功能铂配合物诱导细胞发生非凋亡第28-45页
   ·本章概述第28页
   ·实验方法与步骤第28-35页
     ·试剂和仪器第28-29页
     ·细胞培养第29页
     ·细胞毒活性测试第29页
     ·TUNEL荧光检测细胞凋亡第29-31页
     ·Caspase 3活性检测第31-32页
     ·Western blot第32-34页
     ·免疫荧光检测自噬小泡第34页
     ·单丹酰戊二铵(MDC)染色法检测自噬第34页
     ·透射电子显微镜(TEM)观察细胞形态第34-35页
   ·实验结果与讨论第35-42页
     ·体外细胞毒活性第35-36页
     ·TUNEL荧光检测试剂盒检测细胞凋亡第36-38页
     ·Caspase 3凋亡蛋白的检测第38-39页
     ·免疫荧光检测单功能铂作用后自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ的表达情况第39-40页
     ·单丹酰戊二铵(MDC)染色检测自噬性小泡第40-41页
     ·透射电子显微镜观察单功能铂作用后线粒体肿胀和空泡的双层膜结构第41-42页
   ·结论第42-43页
 参考文献第43-45页
第三章 新型单功能铂配合物诱导细胞死亡的机制探索第45-61页
   ·本章概述第45页
   ·实验方法和步骤第45-49页
     ·试剂和仪器第45-46页
     ·细胞培养第46页
     ·自噬抑制剂3-MA和Wortmannin对单功能铂作用后细胞生存活力的影响第46页
     ·倒置荧光显微镜观察自噬抑制剂3-MA对单功能铂作用后细胞空泡的影响第46-47页
     ·放线菌酮对Caov-3细胞生存活力的影响第47页
     ·Western blot第47-49页
   ·实验结果与讨论第49-56页
     ·自噬抑制剂3-MA对单功能铂配合物作用后细胞内空泡的影响第49页
     ·加入3-MA后自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ的表达情况第49-50页
     ·自噬抑制剂3-MA和Wortmannin对单功能铂配合物作用后细胞生存活力的影响第50-52页
     ·蛋白合成抑制剂放线菌酮(Cycloheximide,CHX)对单功能铂配合物作用后细胞内空泡的影响第52页
     ·放线菌酮对细胞生存活力的影响第52-53页
     ·单功能铂配合物诱导MAPK通路的调节第53-54页
     ·MAPK三条通路的抑制剂对细胞内空泡的影响第54-55页
     ·p-p53和p-Akt参与了单功能铂配合物引起的自噬第55-56页
   ·结论第56-57页
 参考文献第57-61页
第四章 以4-硝基-2,1,3-苯并噁二唑为荧光团的三氮螯合铂配合物的细胞水平机理研究第61-72页
   ·本章概述第61-62页
   ·实验方法与步骤第62-65页
     ·试剂和仪器第62-63页
     ·细胞培养第63页
     ·细胞毒活性测试第63页
     ·JC-1染色检测线粒体膜电位第63页
     ·细胞周期检测第63-64页
     ·Western Blot第64-65页
   ·实验结果与讨论第65-70页
     ·体外细胞毒活性第65-66页
     ·线粒体跨膜电位第66-68页
     ·细胞周期检测实验第68-69页
     ·Western blot法检测凋亡蛋白Caspase 3和自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ的表达第69-70页
   ·结论第70-71页
 参考文献第71-72页
攻读硕士期间待发表的文章第72-73页
致谢第73-75页

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