| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-26页 |
| ·农用抗生素的发展与现状 | 第14页 |
| ·海洋微生物农用生物活性次生代谢产物研究 | 第14-19页 |
| ·海洋微生物抑菌活性物质 | 第14-17页 |
| ·来源于海洋放线菌的抑菌物质 | 第15-16页 |
| ·来源于海洋细菌的抑菌物质 | 第16-17页 |
| ·来源于海洋真菌的抑菌物质 | 第17页 |
| ·海洋微生物抗植物病毒活性物质研究 | 第17-18页 |
| ·海洋微生物代谢产物杀虫活性研究 | 第18-19页 |
| ·海洋微生物代谢产物除草活性研究 | 第19页 |
| ·海洋微生物多样性及分子鉴定手段 | 第19-25页 |
| ·海洋微生物的物种多样性 | 第19-21页 |
| ·海洋微生物遗传多样性 | 第21页 |
| ·海洋微生物分子鉴定 | 第21-25页 |
| ·16S rRNA序列测定 | 第22页 |
| ·DGGE和TGGE | 第22-23页 |
| ·RFLP和ARDRA | 第23-24页 |
| ·LMW RNA | 第24页 |
| ·RAPD | 第24页 |
| ·ERIC-PCR | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-42页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·供试植物病原菌 | 第26页 |
| ·抗TMV供试寄主、供试毒源 | 第26页 |
| ·抗肿瘤活性供试细胞株 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器 | 第27页 |
| ·海洋放线菌的分离与筛选 | 第27-28页 |
| ·样品的采集与处理 | 第27-28页 |
| ·样品来源 | 第27-28页 |
| ·海洋鱼类放线菌的分离 | 第28页 |
| ·分离方法 | 第28页 |
| ·菌株保存 | 第28页 |
| ·菌株的发酵与次生代谢物质粗提物的制备 | 第28-29页 |
| ·菌株发酵液的制备 | 第28页 |
| ·菌株次生代谢产物活性物质的粗提取 | 第28-29页 |
| ·海洋鱼类共附生放线菌活性菌株筛选 | 第29-32页 |
| ·抑植物病原真菌活性测定 | 第29页 |
| ·平板对峙法 | 第29页 |
| ·抑制菌丝生长速率法 | 第29页 |
| ·抗TMV增殖活性测定 | 第29-30页 |
| ·病毒浓度标准曲线的制作 | 第29-30页 |
| ·抗病毒增殖作用的测定 | 第30页 |
| ·抗肿瘤活性测定 | 第30-32页 |
| ·肿瘤细胞的冻存 | 第30页 |
| ·肿瘤细胞的复苏 | 第30-31页 |
| ·肿瘤细胞的传代及培养 | 第31页 |
| ·肿瘤细胞生长曲线测定 | 第31页 |
| ·抗肿瘤活性检测 | 第31-32页 |
| ·活性菌株的分类鉴定 | 第32-39页 |
| ·形态学特征 | 第32页 |
| ·生理生化特征 | 第32-34页 |
| ·明胶液化 | 第32页 |
| ·淀粉水解 | 第32页 |
| ·牛奶凝固 | 第32-33页 |
| ·黑色素产生 | 第33页 |
| ·硝酸盐还原 | 第33页 |
| ·过氧化氢(接触酶)实验 | 第33页 |
| ·纤维素分解 | 第33页 |
| ·碳源利用 | 第33-34页 |
| ·放线菌16S rDNA序列测定及系统发育分析 | 第34-39页 |
| ·基因组DNA提取过程 | 第34-35页 |
| ·16S rDNA目的片段PCR扩增、PCR产物纯化 | 第35页 |
| ·目的片段回收 | 第35-36页 |
| ·连接反应 | 第36-37页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37页 |
| ·重组质粒的小提取 | 第37-38页 |
| ·双酶切反应验证 | 第38页 |
| ·16S rDNA测序结果的系统发育树分析 | 第38-39页 |
| ·菌株030603合成抑菌活性物质的发酵工艺优化 | 第39-42页 |
| ·培养条件 | 第39页 |
| ·活性检测方法 | 第39页 |
| ·培养成分对菌株030603合成抑菌活性物质的影响 | 第39-40页 |
| ·碳源浓度的影响 | 第39页 |
| ·不同氮源的影响 | 第39页 |
| ·碳源浓度的影响 | 第39页 |
| ·氮源浓度的影响 | 第39-40页 |
| ·碳氮源正交优化实验 | 第40页 |
| ·无机盐对菌株030603产活性物质的影响 | 第40页 |
| ·培养条件对菌株030603产活性物质的影响 | 第40-42页 |
| ·初始PH对菌株030603产活性物质的影响 | 第40页 |
| ·接种量对菌株030603产活性物质的影响 | 第40页 |
| ·装液量对菌株030603产活性物质的影响 | 第40-41页 |
| ·种龄对菌株030603产活性物质的影响 | 第41页 |
| ·发酵时间对菌株030603产活性物质的影响 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-65页 |
| ·海洋鱼类放线菌的分离及其抗植物病原真菌菌株的筛选 | 第42-48页 |
| ·海洋鱼类放线菌的分离 | 第42-43页 |
| ·培养基的选择 | 第43页 |
| ·抑制植物病原真菌的活性菌株筛选 | 第43-45页 |
| ·菌株030603次级代谢产物的广谱抗菌活性 | 第45页 |
| ·抗TMV活性菌株筛选 | 第45-46页 |
| ·抗肿瘤活性菌株筛选 | 第46-47页 |
| ·菌株正丁醇提取物甲醇提取物抗肿瘤活性 | 第47-48页 |
| ·活性菌株的分类鉴定 | 第48-58页 |
| ·菌株010204的分类鉴定 | 第48-50页 |
| ·形态学鉴定 | 第48-49页 |
| ·生理生化特征 | 第49页 |
| ·菌株010204的16S rDNA系统发育分析及鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·菌株020101的分类鉴定 | 第50-52页 |
| ·形态学鉴定 | 第50页 |
| ·生理生化特征 | 第50页 |
| ·菌株020101的16S rDNA系统发育分析及鉴定结果 | 第50-52页 |
| ·菌株030603的分类鉴定 | 第52-54页 |
| ·形态学鉴定 | 第52页 |
| ·生理生化特征 | 第52-54页 |
| ·菌株030603的16S rDNA系统发育分析及鉴定结果 | 第54页 |
| ·菌株042403的分类鉴定 | 第54-58页 |
| ·形态学鉴定 | 第54-56页 |
| ·生理生化特征 | 第56页 |
| ·菌株042403的16S rDNA系统发育分析及鉴定结果 | 第56-57页 |
| ·16S rDNA序列测定 | 第57-58页 |
| ·菌株030603发酵优化 | 第58-65页 |
| ·培养基组成对菌株030603产活性物质的影响 | 第58-61页 |
| ·碳源对菌株030603产活性物质的影响 | 第58-59页 |
| ·不同氮源对菌株030603产活性物质的影响 | 第59-60页 |
| ·碳氮源正交优化实验 | 第60-61页 |
| ·无机盐对菌株030603产活性物质的影响 | 第61页 |
| ·培养条件对菌株030603产活性物质的影响 | 第61-65页 |
| ·培养基初始PH对菌株030603产活性物质的影响 | 第61-62页 |
| ·装液量和接种量对菌株030603产活性物质的影响 | 第62-63页 |
| ·种龄对菌株030603产活性物质的影响 | 第63页 |
| ·发酵时间对菌株030603产活性物质的影响 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| ·海洋鱼类放线菌的分离 | 第65页 |
| ·活性菌株的筛选 | 第65-66页 |
| ·活性菌株的分类鉴定 | 第66-67页 |
| ·菌株030603发酵工艺的优化 | 第67-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录一 菌株16S rDNA序列 | 第74-77页 |
| 附录二 常用溶液 | 第77-83页 |
| 附录三 菌株分类鉴定特征 | 第83-90页 |
| 附录四 030603次代谢产物粗提物抑植物病原真菌图片 | 第90-91页 |
