| 英文缩写及中英文对照 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 骨桥蛋白在人原发性肝细胞癌的表达及临床意义 | 第14-28页 |
| 一 材料与方法 | 第14-21页 |
| 1 标本采集及处理 | 第14页 |
| 2 实验设备与试剂 | 第14-15页 |
| 3 实验方法 | 第15-20页 |
| 4 结果判定和统计学处理 | 第20-21页 |
| 二 结果 | 第21-25页 |
| 三 讨论 | 第25-27页 |
| 四 结论 | 第27-28页 |
| 第二部分 骨桥蛋白在不同肝癌细胞株的表达及其与生长、侵袭潜能的关系 | 第28-46页 |
| 一、材料及试剂 | 第28-31页 |
| 1 细胞株系 | 第28页 |
| 2 细胞培养材料 | 第28页 |
| 3 分子生物学试剂 | 第28-30页 |
| 4 主要实验仪器 | 第30-31页 |
| 二 方法 | 第31-36页 |
| 1.RT-PCR | 第31页 |
| 2.Western Blot | 第31-34页 |
| 3 生存曲线 | 第34-35页 |
| 4 细胞与FN 粘附实验 | 第35页 |
| 5 侵袭实验：重组基底膜实验分析OPN 浓度对BLE 7402、SMMC‐7721、HEP‐G2 细胞侵袭的影响： | 第35-36页 |
| 6 统计学分析 | 第36页 |
| 三 结果 | 第36-44页 |
| 1 不同侵袭转移潜能肝癌细胞系OPN 半定量PCR 表达情况: | 第36-37页 |
| 2 不同侵袭转移移潜能肝癌细胞系Hep‐G2、BLE 7402、SMMC‐7721 OPN Western‐blot 表达情况（如图12）： | 第37-38页 |
| 3.不同侵袭转移潜能肝癌细胞系中OPN 基因的表达水平与侵袭、转移能力的比较： | 第38页 |
| 4 生存曲线（单位：10~4 个）： | 第38-40页 |
| 5 粘附实验： | 第40-42页 |
| 6 侵袭实验 | 第42-44页 |
| 四 讨论 | 第44-45页 |
| 五 结论 | 第45-46页 |
| 第三部分 应用RNA 干扰抑制肝癌细胞株骨桥蛋白的表达及其与生长、侵袭潜能的关系 | 第46-66页 |
| 一 材料及试剂 | 第46页 |
| 1.材料 | 第46页 |
| 2.试剂 | 第46页 |
| 二 方法 | 第46-49页 |
| 1 OPN 特异性siRNA 序列的确定和合成 | 第46-47页 |
| 2．OPN‐siRNA/ Lipofectamine ~(TM2000) 载体转染细胞 | 第47-48页 |
| 3 荧光定量PCR | 第48页 |
| 4 Western Blot | 第48页 |
| 5 SiRNA 转染后的生存曲线 | 第48-49页 |
| 6 细胞与FN 粘附实验 | 第49页 |
| 7 侵袭实验： | 第49页 |
| 三 结果 | 第49-64页 |
| 1.合成OPN siRNA(OPNi A,OPNi B, OPNi C)的RNAi 的作用效果比较，及最佳沉默作用OPNsiRNA 的选择 | 第49-51页 |
| 2.不同侵袭转移潜能肝癌细胞株OPN siRNA（siRNA A）半定量表达情况（表20） . | 第51-52页 |
| 3.siRNA 转染效率的检测： | 第52-54页 |
| 4.转染OPNi-A 后，HEP-G2、BLE 7402、SMMC-7721 细胞内蛋白表达水平的变化 | 第54-55页 |
| 5.生存曲线： | 第55-59页 |
| 6 粘附实验： | 第59-61页 |
| 7 侵袭实验： | 第61-64页 |
| 四 讨论 | 第64-65页 |
| 五 结论 | 第65-66页 |
| 全文总结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 在读期间以第一作者发表论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
