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大肠杆菌表达的牛亚洲Ⅰ型FMDV多表位重组蛋白的纯化

提要第1-10页
第1章 前言第10-20页
   ·rA7 简介第10-12页
     ·口蹄疫第10-11页
     ·rA7第11-12页
   ·包涵体复性第12-20页
     ·包涵体的特性第12页
     ·包涵体形成第12-13页
     ·包涵体分离溶解第13页
     ·包涵体蛋白的复性第13-17页
       ·稀释复性第14页
       ·透析复性第14页
       ·超滤复性第14页
       ·层析复性第14-17页
     ·影响复性效率的因素第17-20页
       ·蛋白质的复性浓度第17-18页
       ·变性剂的浓度和移除速率第18页
       ·pH值第18页
       ·温度第18页
       ·添加剂第18-20页
第2章 材料和方法第20-27页
   ·实验材料第20-22页
     ·实验仪器和试剂第20-21页
     ·主要溶液第21-22页
     ·实验动物及其他第22页
   ·实验方法第22-27页
     ·层析柱处理第22页
     ·菌体裂解第22-23页
     ·蛋白复性条件的确定第23-24页
       ·稀释用蛋白溶液的制备第23-24页
       ·复性条件的确定第24页
     ·重组蛋白的纯化第24页
     ·重组蛋白的纯度分析及浓度测定第24-25页
       ·重组蛋白的SDS-PAGE电泳及蛋白纯度分析第24-25页
       ·重组蛋白的浓度测定第25页
     ·重组蛋白活性检测第25-27页
       ·牛体免疫流程第25-26页
       ·细胞中和实验检测蛋白活性第26页
       ·阻断Elisa方法检测蛋白活性第26页
       ·牛体攻毒实验检测蛋白活性第26-27页
第3章 实验结果第27-42页
 第一部分 前期工作(rA7 的表达、纯化和活性鉴定)第27-31页
     ·rA7 的表达和纯化第27-29页
     ·疫苗rA7 的生物学功能第29-31页
       ·疫苗rA7 的FMDV中和抗体诱生作用第29-30页
       ·疫苗rA7 的FMDV特异性抗体诱生作用第30页
       ·疫苗rA7 保护接受免疫牛的作用第30-31页
 第二部分 rA7 的复性条件摸索及其纯化和活性鉴定第31-42页
     ·rA7 的复性条件摸索第31-37页
       ·尿素浓度对rA7 复性的影响第31-32页
       ·离子成分对rA7 复性的影响第32-33页
       ·KCl浓度对rA7 复性的影响第33-34页
       ·pH值对rA7 复性的影响第34-35页
       ·阴离子电荷量对于rA7 复性的影响第35-37页
     ·rA7 的纯化第37-38页
     ·疫苗rA7 的生物学功能第38-42页
       ·疫苗rA7 的FMDV中和抗体诱生作用第38-39页
       ·疫苗rA7 的FMDV特异性抗体诱生作用第39-40页
       ·疫苗rA7 保护接受免疫牛的作用第40-42页
第4章 讨论第42-47页
 1 钾离子、电荷、pH值、变性剂终浓度和变性剂去除速率对于rA7复性的影响第42-44页
   ·钾离子对rA7 复性的影响第42-43页
   ·阴离子电荷对rA7 复性的影响第43页
   ·pH值对于rA7 复性的影响第43-44页
   ·变性剂终浓度对rA7 复性的影响第44页
   ·变性剂的去除速率对rA7 复性的影响第44页
 2 稀释法确定蛋白最佳复性条件的应用第44-45页
 3 rA7 纯化工艺的放大第45-47页
第5章 结论第47-48页
参考文献第48-51页
硕士期间的成果第51-52页
致谢第52-53页
中文摘要第53-56页
Abstract第56-59页

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