提要 | 第1-10页 |
第1章 前言 | 第10-20页 |
·rA7 简介 | 第10-12页 |
·口蹄疫 | 第10-11页 |
·rA7 | 第11-12页 |
·包涵体复性 | 第12-20页 |
·包涵体的特性 | 第12页 |
·包涵体形成 | 第12-13页 |
·包涵体分离溶解 | 第13页 |
·包涵体蛋白的复性 | 第13-17页 |
·稀释复性 | 第14页 |
·透析复性 | 第14页 |
·超滤复性 | 第14页 |
·层析复性 | 第14-17页 |
·影响复性效率的因素 | 第17-20页 |
·蛋白质的复性浓度 | 第17-18页 |
·变性剂的浓度和移除速率 | 第18页 |
·pH值 | 第18页 |
·温度 | 第18页 |
·添加剂 | 第18-20页 |
第2章 材料和方法 | 第20-27页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·实验仪器和试剂 | 第20-21页 |
·主要溶液 | 第21-22页 |
·实验动物及其他 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-27页 |
·层析柱处理 | 第22页 |
·菌体裂解 | 第22-23页 |
·蛋白复性条件的确定 | 第23-24页 |
·稀释用蛋白溶液的制备 | 第23-24页 |
·复性条件的确定 | 第24页 |
·重组蛋白的纯化 | 第24页 |
·重组蛋白的纯度分析及浓度测定 | 第24-25页 |
·重组蛋白的SDS-PAGE电泳及蛋白纯度分析 | 第24-25页 |
·重组蛋白的浓度测定 | 第25页 |
·重组蛋白活性检测 | 第25-27页 |
·牛体免疫流程 | 第25-26页 |
·细胞中和实验检测蛋白活性 | 第26页 |
·阻断Elisa方法检测蛋白活性 | 第26页 |
·牛体攻毒实验检测蛋白活性 | 第26-27页 |
第3章 实验结果 | 第27-42页 |
第一部分 前期工作(rA7 的表达、纯化和活性鉴定) | 第27-31页 |
·rA7 的表达和纯化 | 第27-29页 |
·疫苗rA7 的生物学功能 | 第29-31页 |
·疫苗rA7 的FMDV中和抗体诱生作用 | 第29-30页 |
·疫苗rA7 的FMDV特异性抗体诱生作用 | 第30页 |
·疫苗rA7 保护接受免疫牛的作用 | 第30-31页 |
第二部分 rA7 的复性条件摸索及其纯化和活性鉴定 | 第31-42页 |
·rA7 的复性条件摸索 | 第31-37页 |
·尿素浓度对rA7 复性的影响 | 第31-32页 |
·离子成分对rA7 复性的影响 | 第32-33页 |
·KCl浓度对rA7 复性的影响 | 第33-34页 |
·pH值对rA7 复性的影响 | 第34-35页 |
·阴离子电荷量对于rA7 复性的影响 | 第35-37页 |
·rA7 的纯化 | 第37-38页 |
·疫苗rA7 的生物学功能 | 第38-42页 |
·疫苗rA7 的FMDV中和抗体诱生作用 | 第38-39页 |
·疫苗rA7 的FMDV特异性抗体诱生作用 | 第39-40页 |
·疫苗rA7 保护接受免疫牛的作用 | 第40-42页 |
第4章 讨论 | 第42-47页 |
1 钾离子、电荷、pH值、变性剂终浓度和变性剂去除速率对于rA7复性的影响 | 第42-44页 |
·钾离子对rA7 复性的影响 | 第42-43页 |
·阴离子电荷对rA7 复性的影响 | 第43页 |
·pH值对于rA7 复性的影响 | 第43-44页 |
·变性剂终浓度对rA7 复性的影响 | 第44页 |
·变性剂的去除速率对rA7 复性的影响 | 第44页 |
2 稀释法确定蛋白最佳复性条件的应用 | 第44-45页 |
3 rA7 纯化工艺的放大 | 第45-47页 |
第5章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
硕士期间的成果 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
中文摘要 | 第53-56页 |
Abstract | 第56-59页 |