桉树4个种遗传多样性的ISSR分析及STS标记开发初探
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第7-11页 |
| 1 绪论 | 第11-29页 |
| ·桉树概况 | 第11页 |
| ·桉树人工林发展现状 | 第11-14页 |
| ·分子标记概述 | 第14-21页 |
| ·RFLP | 第15页 |
| ·RAPD | 第15-16页 |
| ·SCAR | 第16-17页 |
| ·AFLP | 第17页 |
| ·SSR | 第17-18页 |
| ·ISSR | 第18-19页 |
| ·SNP | 第19页 |
| ·SRAP | 第19-20页 |
| ·TRAP | 第20页 |
| ·STS | 第20-21页 |
| ·分子标记技术在林业中的应用 | 第21-25页 |
| ·绘制品种(品系)的DNA指纹图谱 | 第21页 |
| ·种质资源的鉴定 | 第21-22页 |
| ·种质资源的遗传多样性研究 | 第22-23页 |
| ·品种亲缘关系分析 | 第23页 |
| ·遗传图谱的构建 | 第23-24页 |
| ·林木分子标记辅助选择育种 | 第24-25页 |
| ·分子标记技术在桉树研究中应用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义及技术路线 | 第26-29页 |
| ·目的及意义 | 第26-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 2 桉树遗传多样性的ISSR分析 | 第29-53页 |
| ·实验材料与试剂 | 第29-31页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·实验试剂与药品 | 第29页 |
| ·主要仪器及设备 | 第29页 |
| ·引物序列及合成 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·基因组DNA提取、纯化与定量 | 第31-34页 |
| ·桉树叶片总DNA的提取 | 第31-33页 |
| ·桉树叶片基因组DNA的纯化 | 第33页 |
| ·桉树叶片基因组DNA的质量检测 | 第33-34页 |
| ·桉树叶片基因组DNA的浓度及纯度测定 | 第34页 |
| ·ISSR-PCR扩增 | 第34-36页 |
| ·ISSR反应体系的优化 | 第34-35页 |
| ·ISSR产物鉴定 | 第35-36页 |
| ·引物筛选 | 第36页 |
| ·数据统计与处理 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-53页 |
| ·桉树基因组DNA的提取及质量检测 | 第36-38页 |
| ·ISSR反应体系的建立及优化 | 第38-42页 |
| ·模板浓度 | 第38页 |
| ·Taq酶用量 | 第38-39页 |
| ·Mg~(2+)浓度 | 第39-40页 |
| ·dNTPs浓度 | 第40-41页 |
| ·引物浓度 | 第41页 |
| ·退火温度 | 第41-42页 |
| ·优化的ISSR-PCR体系 | 第42页 |
| ·ISSR-PCR扩增结果 | 第42-43页 |
| ·桉树的遗传距离和遗传一致度分析 | 第43-44页 |
| ·桉树4种源18个样品的亲缘关系聚类分析 | 第44-48页 |
| ·桉树4种源18个品种的遗传分化的主坐标排序分析 | 第48-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 3 基于ISSR的桉树STS标记的开发初探 | 第53-62页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·ISSR-PCR扩增特异性条带回收 | 第53页 |
| ·制备感受态细胞 | 第53-54页 |
| ·T载体连接 | 第54-55页 |
| ·质粒转化感受态细胞 | 第55页 |
| ·重组子的PCR鉴定 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·ISSR-PCR扩增特异条带的T-A克隆及鉴定 | 第56-57页 |
| ·引物设计 | 第57-58页 |
| ·STS标记的引物筛选 | 第58-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 4 结论与讨论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 附录A:12种引物对桉树ISSR扩增的电泳结果 | 第73-76页 |
| 附录B:实验药品 | 第76-78页 |
| 附录C:基于ISSR的STS扩增引物及序列 | 第78-80页 |
| 附表D:ISSR扩增序列的Blast比对结果 | 第80-83页 |
| 攻读学位期间的主要学术成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
