| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-10页 |
| 第二章 材料与方法 | 第10-21页 |
| ·实验的试剂、耗材及仪器 | 第10-13页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第10-11页 |
| ·仪器设备 | 第11-12页 |
| ·实验中所用部分培养基及试剂的配制 | 第12-13页 |
| ·其他 | 第13页 |
| ·质粒pEGFP-C2-NT3的抽提 | 第13页 |
| ·聚乙烯亚胺表面修饰羟基磷灰石纳米粒及体外基因载体性能的评估 | 第13-15页 |
| ·聚乙烯亚胺(PEI)表面修饰羟基磷灰石(HAT)纳米粒(以下简称PEI-HAT)的制备及悬浮稳定性实验 | 第13-14页 |
| ·PEI-HAT纳米粒与DNA的结合实验 | 第14页 |
| ·PEI-HAT纳米粒混悬液对DNA的保护实验 | 第14页 |
| ·聚乙烯亚胺表面修饰HAT纳米粒混悬液介导的体外pEGFP-C2-NT3基因转染实验 | 第14-15页 |
| ·引物设计与合成 | 第15-16页 |
| ·pEGFPC2-NT3质粒的EGFP基因区域,预计片段长度289bp | 第15页 |
| ·PCR扩增EGFP-C2目的基因体系及条件 | 第15-16页 |
| ·实验设计 | 第16-20页 |
| ·实验动物与分组 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17页 |
| ·手术过程和给药途径 | 第17-19页 |
| ·取材及固定 | 第19-20页 |
| ·外淋巴液中EGFP-C2目的基因PCR扩增 | 第20页 |
| ·统计学方法 | 第20-21页 |
| 第三章 实验结果 | 第21-34页 |
| ·抽提质粒pEGFP-C2-NT3的单酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·聚乙烯亚胺表面修饰HAT(PEI-HAT)纳米粒的制备及悬浮稳定性实验 | 第21页 |
| ·PEI-HAT纳米粒与DNA结合试验的结果分析 | 第21-22页 |
| ·PEI-HAT纳米粒与DNA保护试验的结果分析 | 第22页 |
| ·聚乙烯亚胺表面修饰HAT纳米粒介导的体外pEGFP-C2-NT3基因转染实验 | 第22-23页 |
| ·电生理监测ABR,DPOAE | 第23-25页 |
| ·耳蜗外淋巴液及脑脊液(CSF)PCR扩增结果 | 第25-30页 |
| ·圆窗膜放置明胶海绵法与鼓阶钻孔法 | 第30-31页 |
| ·基底膜剥离法和冰冻切片法观察荧光 | 第31-34页 |
| 第四章 讨论 | 第34-39页 |
| ·圆窗膜的解剖 | 第34页 |
| ·影响圆窗膜通透性的因素及易化剂的种类 | 第34-35页 |
| ·影响圆窗膜通透性的因素 | 第34页 |
| ·易化剂的种类 | 第34-35页 |
| ·对经圆窗膜途径内耳转染方法的研究 | 第35-36页 |
| ·实验结果分析 | 第36-39页 |
| ·经完整圆窗膜转染法与鼓阶钻孔法比较 | 第36-37页 |
| ·耳蜗改良硬铺片法和冰冻切片法 | 第37-39页 |
| 第五章 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 综述 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
