中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 玉米抗除草剂基因工程的进展 | 第13-16页 |
·玉米 | 第13页 |
·玉米抗除草剂基因工程的提出 | 第13页 |
·国内外抗除草剂转基因玉米的研究情况 | 第13-15页 |
·抗除草剂转基因玉米的种植情况 | 第15-16页 |
2 玉米遗传转化方法 | 第16-20页 |
·农杆菌介导法 | 第17页 |
·基因枪法 | 第17-18页 |
·聚乙二醇法 | 第18页 |
·脂质体法 | 第18-19页 |
·电穿孔法 | 第19页 |
·花粉管通道法 | 第19页 |
·其它方法 | 第19-20页 |
3 抗除草剂基因的研究进展 | 第20-24页 |
·六大类抗除草剂基因 | 第20-21页 |
·抗草甘膦基因 | 第21-24页 |
4 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-33页 |
1 材料 | 第26-27页 |
·供试材料 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·试剂及培养基 | 第27页 |
2 方法 | 第27-33页 |
·根瘤农杆菌的培养 | 第27页 |
·转化步骤 | 第27-29页 |
·玉米遗传转化体系的优化 | 第29页 |
·PCR检测 | 第29-30页 |
·RT-PCR检测 | 第30-32页 |
·草甘膦筛选浓度的确定 | 第32页 |
·T_0代和T_1代转基因植株的草甘膦抗性分析 | 第32页 |
·转基因植株草甘膦耐受度的确定 | 第32-33页 |
第三章 结果与分析 | 第33-42页 |
1 玉米遗传转化体系的优化 | 第33-36页 |
·幼胚长度对愈伤诱导及抗性筛选的影响 | 第33页 |
·头孢噻肟钠(Cef.)添加浓度的确定 | 第33-34页 |
·硝酸银(AgNO_3)对愈伤组织诱导和胚性愈伤形成的影响 | 第34-35页 |
·嘧啶醇(Ancymidol)在分化培养基中浓度的确定 | 第35-36页 |
2 玉米幼胚组织培养及植株再生 | 第36-38页 |
3 转基因植株分子水平的检测 | 第38-39页 |
·PCR检测 | 第38页 |
·RT-PCR分析 | 第38-39页 |
4.T_0及T_1植株草甘膦筛选情况 | 第39-42页 |
·草甘膦筛选浓度的确定 | 第39-40页 |
·T_0代再生植株的草甘膦抗性分析 | 第40页 |
·T_0代结实情况 | 第40页 |
·T_1代转基因植株的抗草甘膦筛选分析 | 第40-41页 |
·转基因植株草甘膦耐受度的确定 | 第41-42页 |
第四章 讨论 | 第42-45页 |
1 受体材料对玉米遗传转化效率的影响 | 第42页 |
2 培养基中添加剂对组织培养的影响 | 第42-43页 |
·AgNO_3 | 第42页 |
·抑菌剂 | 第42-43页 |
·其它添加剂 | 第43页 |
3 再生苗移栽 | 第43页 |
4 RT-PCR | 第43-44页 |
5 草甘膦筛选浓度的确定 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |