| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 一、前言 | 第9-17页 |
| 1.杆状病毒概述 | 第9-16页 |
| ·杆状病毒的结构 | 第9-11页 |
| ·杆状病毒的感染周期 | 第11-12页 |
| ·杆状病毒的膜融合蛋白 | 第12-16页 |
| ·GP64的结构 | 第13页 |
| ·GP64的膜融合功能 | 第13-14页 |
| ·F蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
| ·BV膜融合蛋白在基因治疗中的应用 | 第15-16页 |
| 2.本项研究工作的目的和意义 | 第16-17页 |
| 二、材料与方法 | 第17-36页 |
| 1.酶、化学试剂和试剂盒 | 第17-18页 |
| ·酶和Marker | 第17页 |
| ·化学试剂 | 第17-18页 |
| ·常用贮存液 | 第17页 |
| ·常用缓冲液 | 第17-18页 |
| ·脂质体转染试剂 | 第18页 |
| ·试剂盒 | 第18页 |
| 2.培养基 | 第18-19页 |
| ·细菌培养基 | 第18页 |
| ·SOC培养基 | 第18页 |
| ·Grace培养基 | 第18-19页 |
| ·TC-199-MK培养基 | 第19页 |
| ·TC-199培养基 | 第19页 |
| ·MK(Hank's基础液)1000ml | 第19页 |
| ·TC-199-MK培养基 | 第19页 |
| 3.实验仪器设备 | 第19-20页 |
| 4.大肠杆菌菌株 | 第20页 |
| 5.计算机辅助分析 | 第20页 |
| 6.引物 | 第20-21页 |
| 7.质粒 | 第21-31页 |
| ·瞬时表达质粒的构建 | 第22-30页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第22页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第22页 |
| ·胶回收试剂盒回收DNA片段 | 第22-23页 |
| ·连接反应 | 第23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23页 |
| ·构建瞬时表达质粒 | 第23-30页 |
| ·重组质粒P-p24egfp-V-cat的构建 | 第30-31页 |
| 8.昆虫细胞系 | 第31-32页 |
| 9.昆虫细胞转染和瞬时表达实验 | 第32页 |
| 10.病毒和Bacmid | 第32-36页 |
| ·普通电转化感受态细胞的制备和电转化 | 第34页 |
| ·普通电转化感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·电转化 | 第34页 |
| ·同源重组片段的制备 | 第34页 |
| ·同源重组电转化感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·AcMNPV Bacmid中gp64基因敲除 | 第35-36页 |
| 三、实验结果 | 第36-49页 |
| 1.Px26与AgseF蛋白序列的比对分析 | 第36-37页 |
| 2.瞬时表达质粒的构建 | 第37-39页 |
| ·瞬时表达质粒pIE-egfp的构建 | 第37-38页 |
| ·瞬时表达质粒pIE-Px26和pIE-Px26-egfp的构建 | 第38-39页 |
| 3.Px26在昆虫细胞中的瞬时表达及其表达产物的分布 | 第39-47页 |
| 4.重组AcMNPV Bacmid的构建 | 第47-49页 |
| ·重组质粒P-p24egfp-V-cat的构建 | 第47-49页 |
| 四、讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 硕士期间撰写的文章 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |