| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| 1 鱼类生长激素研究进展 | 第10-16页 |
| ·GH/PRL/SL家族 | 第10-11页 |
| ·鱼类生长激素的分泌和调节 | 第11-12页 |
| ·鱼类生长激素的结构和生物学功能 | 第12-16页 |
| ·生长激素的分离 | 第12页 |
| ·生长激素的分子结构 | 第12-13页 |
| ·生长激素对鱼类的作用 | 第13-15页 |
| ·生长激素的作用机理 | 第15-16页 |
| 2 鱼类生长激素生物活性和定量免疫测定技术的研究 | 第16-18页 |
| ·鱼类生长激素生物活性检测技术 | 第16-17页 |
| ·鱼类生长激素定量免疫测定技术 | 第17-18页 |
| ·放射免疫测定技术(radio mimuno assay，RIA) | 第17-18页 |
| ·ELISA测定技术 | 第18页 |
| 3 鱼类生长激素的基因工程研究 | 第18-20页 |
| ·转基因鱼的研究 | 第19页 |
| ·重组鱼类GH的研究 | 第19-20页 |
| 4 鱼类GH基因多态性研究进展 | 第20-22页 |
| 第二章 鳜生长激素cDNA的克隆及序列分析 | 第22-44页 |
| 1 材料与方法 | 第22-29页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·实验鱼 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·主要药品和试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂配制 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-29页 |
| ·鳜脑垂体总RNA提取 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第25页 |
| ·鳜GH-cDNA片段的获得 | 第25-27页 |
| ·GH-cDNA片段亚克隆到pUCm-T载体 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-41页 |
| ·鳜GH-cDNA片段的获取 | 第29-30页 |
| ·总RNA提取结果 | 第29页 |
| ·PCR扩增产物电泳结果 | 第29-30页 |
| ·GH-cDNA片段的克隆 | 第30-31页 |
| ·GH-cDNA片段序列分析 | 第31-41页 |
| ·GH-cDNA及其推导的氨基酸序列 | 第31-32页 |
| ·同源性分析 | 第32-38页 |
| ·基于生长激素cDNA序列的分子进化分析 | 第38-39页 |
| ·鳜生长激素基因cDNA序列与DNA序列差异分析 | 第39-40页 |
| ·鳜生长激素基因编码的蛋白质性质预测 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| ·同源性与系统进化分析 | 第41-42页 |
| ·鳜生长激素基因cDNA序列与DNA序列差异分析 | 第42-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 鳜生长激素基因的原核表达 | 第44-57页 |
| 1 材料与方法 | 第44-50页 |
| ·材料 | 第44-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第44页 |
| ·主要药品和试剂 | 第44-45页 |
| ·主要试剂配制 | 第45-46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-50页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第46-47页 |
| ·GH融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第47页 |
| ·原核表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第47-49页 |
| ·表达产物的Western印迹分析 | 第49-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-54页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·GH在大肠杆菌中表达产物的SDS-PAGE分析 | 第51-54页 |
| ·表达产物的Western blot分析 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 4 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 鳜GH基因真核表达载体的构建 | 第57-63页 |
| 1. 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·菌株和质粒 | 第57页 |
| ·主要药品和试剂 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-59页 |
| ·GH-cDNA片段的获得 | 第57-58页 |
| ·GH-cDNA片段和pYES2/CT质粒的预处理 | 第58页 |
| ·GH-cDNA片段与pYES2/CT质粒的连接 | 第58页 |
| ·连接产物的转化 | 第58页 |
| ·重组真核表达质粒的筛选 | 第58-59页 |
| 2. 结果与分析 | 第59-61页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第59页 |
| ·重组表达质粒的筛选 | 第59-60页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第60-61页 |
| 3. 讨论 | 第61-62页 |
| 4. 小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 创新与后续工作 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 中英文缩写词简表 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |