摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
·雷公藤研究进展 | 第10-12页 |
·雷公藤活性成份研究 | 第10-11页 |
·雷公藤杀虫活性研究概况 | 第11-12页 |
·雷公藤组织培养研究进展 | 第12页 |
·MeJA 在次级代谢产物信号转导中的作用 | 第12-13页 |
·基因差异表达研究技术 | 第13-17页 |
·mRNA 差异显示(DDRT-PCR) | 第13-14页 |
·cDNA 代表性差异分析(cDNA-RDA) | 第14页 |
·抑制性消减杂交(SSH) | 第14-15页 |
·cDNA-AFLP 技术 | 第15-17页 |
·本研究的立题依据及试验设计思路 | 第17-19页 |
第二章 材料和方法 | 第19-28页 |
·供试材料 | 第19页 |
·试验材料 | 第19页 |
·菌种和质粒 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·研究方法 | 第19-28页 |
·雷公藤悬浮细胞的培养 | 第19页 |
·茉莉酸甲酯诱导处理 | 第19-20页 |
·雷公藤悬浮细胞鲜重和干重的测定 | 第20页 |
·雷公藤悬浮细胞中总生物碱的提取和测定 | 第20页 |
·雷公藤悬浮细胞总RNA 的提取 | 第20页 |
·cDNA-AFLP 分析 | 第20-24页 |
·差异条带的分离和测序 | 第24-26页 |
·RT-PCR 验证获得的差异基因在雷公藤悬浮细胞中的表达 | 第26-28页 |
第三章 结果与分析 | 第28-33页 |
·不同浓度茉莉酸甲酯对雷公藤悬浮细胞生长量和总生物碱积累的影响 | 第28-29页 |
·RNA 的提取 | 第29页 |
·选择性扩增 | 第29-30页 |
·差异片段的二次扩增和克隆 | 第30页 |
·7 条差异片段的基因序列分析 | 第30-31页 |
·RT-PCR 检测 | 第31-33页 |
第四章 问题与讨论 | 第33-38页 |
·MeJA 抑制雷公藤悬浮细胞总生物碱的合成 | 第33-34页 |
·cDNA-AFLP 生物信息学比对结果 | 第34-35页 |
·MYB 转录因子可能参与了雷公藤悬浮细胞总生物碱的合成 | 第34-35页 |
·与雷公藤次生代谢产物信号转导相关的基因片段 | 第35页 |
·cDNA-AFLP 方法有关问题探讨 | 第35-36页 |
·高质量RNA 的提取 | 第35-36页 |
·降低cDNA-AFLP 技术中的假阳性 | 第36页 |
·RT-PCR 结果有待进一步完善 | 第36页 |
·下一步研究计划 | 第36-38页 |
第五章 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
附表:测序并比对的碱基序列 | 第44-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简介 | 第49页 |