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茉莉酸甲酯处理雷公藤悬浮细胞的基因差异表达分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 文献综述第10-19页
   ·雷公藤研究进展第10-12页
     ·雷公藤活性成份研究第10-11页
     ·雷公藤杀虫活性研究概况第11-12页
     ·雷公藤组织培养研究进展第12页
   ·MeJA 在次级代谢产物信号转导中的作用第12-13页
   ·基因差异表达研究技术第13-17页
     ·mRNA 差异显示(DDRT-PCR)第13-14页
     ·cDNA 代表性差异分析(cDNA-RDA)第14页
     ·抑制性消减杂交(SSH)第14-15页
     ·cDNA-AFLP 技术第15-17页
   ·本研究的立题依据及试验设计思路第17-19页
第二章 材料和方法第19-28页
   ·供试材料第19页
     ·试验材料第19页
     ·菌种和质粒第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要仪器设备第19页
   ·研究方法第19-28页
     ·雷公藤悬浮细胞的培养第19页
     ·茉莉酸甲酯诱导处理第19-20页
     ·雷公藤悬浮细胞鲜重和干重的测定第20页
     ·雷公藤悬浮细胞中总生物碱的提取和测定第20页
     ·雷公藤悬浮细胞总RNA 的提取第20页
     ·cDNA-AFLP 分析第20-24页
     ·差异条带的分离和测序第24-26页
     ·RT-PCR 验证获得的差异基因在雷公藤悬浮细胞中的表达第26-28页
第三章 结果与分析第28-33页
   ·不同浓度茉莉酸甲酯对雷公藤悬浮细胞生长量和总生物碱积累的影响第28-29页
   ·RNA 的提取第29页
   ·选择性扩增第29-30页
   ·差异片段的二次扩增和克隆第30页
   ·7 条差异片段的基因序列分析第30-31页
   ·RT-PCR 检测第31-33页
第四章 问题与讨论第33-38页
   ·MeJA 抑制雷公藤悬浮细胞总生物碱的合成第33-34页
   ·cDNA-AFLP 生物信息学比对结果第34-35页
     ·MYB 转录因子可能参与了雷公藤悬浮细胞总生物碱的合成第34-35页
     ·与雷公藤次生代谢产物信号转导相关的基因片段第35页
   ·cDNA-AFLP 方法有关问题探讨第35-36页
     ·高质量RNA 的提取第35-36页
     ·降低cDNA-AFLP 技术中的假阳性第36页
     ·RT-PCR 结果有待进一步完善第36页
   ·下一步研究计划第36-38页
第五章 结论第38-39页
参考文献第39-44页
附表:测序并比对的碱基序列第44-48页
致谢第48-49页
作者简介第49页

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