鸡FATP4基因cDNA的克隆、生物信息学分析及其组织表达
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| ·选题背景 | 第11-13页 |
| ·家禽选育的研究现状 | 第11页 |
| ·禽类脂质代谢特点 | 第11-12页 |
| ·脂肪的代谢 | 第12-13页 |
| ·FATPs家族的概述 | 第13-16页 |
| ·FATP家族 | 第13-14页 |
| ·FATPs的作用机制 | 第14-15页 |
| ·FATP的多态性研究 | 第15-16页 |
| ·FATP4基因的研究进展 | 第16-17页 |
| ·FATP4的结构和功能 | 第16-17页 |
| ·FATP4基因的克隆和结构 | 第17页 |
| ·荧光定量 PCR技术 | 第17-20页 |
| ·荧光定量 PCR定量原理 | 第17-18页 |
| ·荧光定量 PCR的特点 | 第18页 |
| ·SYBR Green I荧光染料 | 第18-19页 |
| ·荧光定量 PCR的应用 | 第19-20页 |
| ·生物信息学在新基因研究上的应用 | 第20-21页 |
| ·针对基因序列的预测 | 第20-21页 |
| ·针对蛋白质的预测 | 第21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·试验材料 | 第22-25页 |
| ·组织样本的采集 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·试验试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| ·试验方法 | 第25-33页 |
| ·总 RNA的提取 | 第25页 |
| ·总 RNA的纯化(除去RNA中的DNA) | 第25-26页 |
| ·总 RNA的检测 | 第26页 |
| ·cDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·PCR引物设计 | 第27页 |
| ·PCR产物的回收纯化、克隆和测序 | 第27-31页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第31-33页 |
| ·统计分析 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-51页 |
| ·PCR扩增及克隆测序结果 | 第33-39页 |
| ·总 RNA提取结果 | 第33页 |
| ·FATP4基因克隆序列分析 | 第33-35页 |
| ·核酸序列比对 | 第35-39页 |
| ·常规 PCR及测序结果 | 第39页 |
| ·FATP4基因的蛋白质性质分析及结构功能预测 | 第39-45页 |
| ·蛋白质基本性质分析 | 第39-40页 |
| ·FATP4基因蛋白质信号肽分析 | 第40-41页 |
| ·跨膜区分析 | 第41-42页 |
| ·糖基化位点分析 | 第42-43页 |
| ·蛋白质二级结构预测 | 第43-44页 |
| ·蛋白质疏水性预测 | 第44-45页 |
| ·荧光定量PCR扩增结果 | 第45-47页 |
| ·荧光定量常规PCR反应的结果 | 第45页 |
| ·荧光定量常规PCR扩增的标准曲线 | 第45-47页 |
| ·荧光定量常规PCR扩增产物的特异性 | 第47页 |
| ·鸡 FATP4基因的发育性时空表达 | 第47-51页 |
| ·FATP4基因在不同品种鸡中的表达情况 | 第47-48页 |
| ·FATP4基因的组织表达差异 | 第48-49页 |
| ·FATP4基因表达的发育性变化 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| ·关于试验条件的分析 | 第51-53页 |
| ·避免基因组 DNA污染 | 第51-52页 |
| ·内参基因的选择 | 第52页 |
| ·各种实时荧光定量 PCR方法的比较 | 第52-53页 |
| ·克隆cDNA序列分析 | 第53页 |
| ·FATP4基因蛋白功能分析 | 第53页 |
| ·FATP4蛋白确定序列特性分析 | 第53-54页 |
| ·鸡FATP4基因表达发育性变化及其组织表达规律 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
