摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第一章 前言 | 第10-27页 |
第一节 研究背景 | 第10-15页 |
·氧化还原调控和氧化胁迫 | 第10-11页 |
·巯基与二硫键 | 第11-13页 |
·两类重要的氧化还原剂 | 第13-15页 |
第二节 研究对象 | 第15-24页 |
·肌质网(sarcoplasmic reticulum,SR) | 第15-18页 |
·钙释放通道/ryanodine receptor(RyR) | 第18-21页 |
·影响RyR活性的因素 | 第21-24页 |
第三节 研究意义与内容 | 第24-27页 |
·研究意义 | 第24-25页 |
·研究内容 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-41页 |
第一节 试剂 | 第27页 |
第二节 实验仪器及原理介绍 | 第27-31页 |
·差速离心法原理 | 第27-28页 |
·紫外—可见分光光度计 | 第28页 |
·荧光分光光度计 | 第28-29页 |
·液闪计数仪 | 第29页 |
·纳米粒度仪(光子相关光谱法PCS) | 第29-30页 |
·SDS-PAGE和Western Blotting的原理 | 第30-31页 |
第二节 实验方法 | 第31-41页 |
·SR囊泡的制备和蛋白浓度测定 | 第31-32页 |
·通道蛋白RyR1的提纯和蛋白浓度测定 | 第32-33页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第33-34页 |
·提纯RyR1的自由巯基量的定性测定 | 第34-35页 |
·[~3H]-ryanodine结合实验的测定 | 第35-36页 |
·光相干粒度仪观测蛋白的平均粒径和粒径分布情况 | 第36页 |
·SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和电洗脱回收电泳实验 | 第36-38页 |
·Western Blotting检测氧化剂处理后发生cross-linking的蛋白 | 第38-39页 |
·DPH荧光探针测定SR膜的流动性 | 第39-40页 |
·统计学处理 | 第40-41页 |
第三章 实验结果 | 第41-51页 |
1 氧化剂对钙释放通道ryanodine结合的影响 | 第41-42页 |
2 氧化剂导致蛋白间的cross-linking | 第42-44页 |
3 氧化剂引起的cross-linking的组分考察 | 第44-46页 |
4 氧化剂对RyR1的颗粒粒径的影响 | 第46-49页 |
5 氧化剂对肌质网膜流动性的影响 | 第49-50页 |
6 不同Ca~(2+)浓度对SR膜流动性的影响 | 第50-51页 |
第四章 总结与讨论 | 第51-57页 |
第一节 实验结果总结 | 第51-52页 |
第二节 讨论 | 第52-57页 |
·氧化胁迫对RyR与SR相关的作用的影响 | 第53-54页 |
·氧化胁迫对RyR间相互作用的影响 | 第54-55页 |
·氧化胁迫对SR膜与膜蛋白相互作用的影响 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 硕士期间发表论文 | 第63-64页 |
后记(致谢) | 第64页 |