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巯基氧化剂诱导的氧化胁迫对骨骼肌型钙释放通道门控和蛋白交联的影响

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
第一章 前言第10-27页
 第一节 研究背景第10-15页
   ·氧化还原调控和氧化胁迫第10-11页
   ·巯基与二硫键第11-13页
   ·两类重要的氧化还原剂第13-15页
 第二节 研究对象第15-24页
   ·肌质网(sarcoplasmic reticulum,SR)第15-18页
   ·钙释放通道/ryanodine receptor(RyR)第18-21页
   ·影响RyR活性的因素第21-24页
 第三节 研究意义与内容第24-27页
   ·研究意义第24-25页
   ·研究内容第25-27页
第二章 材料与方法第27-41页
 第一节 试剂第27页
 第二节 实验仪器及原理介绍第27-31页
   ·差速离心法原理第27-28页
   ·紫外—可见分光光度计第28页
   ·荧光分光光度计第28-29页
   ·液闪计数仪第29页
   ·纳米粒度仪(光子相关光谱法PCS)第29-30页
   ·SDS-PAGE和Western Blotting的原理第30-31页
 第二节 实验方法第31-41页
   ·SR囊泡的制备和蛋白浓度测定第31-32页
   ·通道蛋白RyR1的提纯和蛋白浓度测定第32-33页
   ·蛋白质浓度的测定第33-34页
   ·提纯RyR1的自由巯基量的定性测定第34-35页
   ·[~3H]-ryanodine结合实验的测定第35-36页
   ·光相干粒度仪观测蛋白的平均粒径和粒径分布情况第36页
   ·SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和电洗脱回收电泳实验第36-38页
   ·Western Blotting检测氧化剂处理后发生cross-linking的蛋白第38-39页
   ·DPH荧光探针测定SR膜的流动性第39-40页
   ·统计学处理第40-41页
第三章 实验结果第41-51页
 1 氧化剂对钙释放通道ryanodine结合的影响第41-42页
 2 氧化剂导致蛋白间的cross-linking第42-44页
 3 氧化剂引起的cross-linking的组分考察第44-46页
 4 氧化剂对RyR1的颗粒粒径的影响第46-49页
 5 氧化剂对肌质网膜流动性的影响第49-50页
 6 不同Ca~(2+)浓度对SR膜流动性的影响第50-51页
第四章 总结与讨论第51-57页
 第一节 实验结果总结第51-52页
 第二节 讨论第52-57页
   ·氧化胁迫对RyR与SR相关的作用的影响第53-54页
   ·氧化胁迫对RyR间相互作用的影响第54-55页
   ·氧化胁迫对SR膜与膜蛋白相互作用的影响第55-57页
参考文献第57-63页
附录 硕士期间发表论文第63-64页
后记(致谢)第64页

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