| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 植物响应非生物胁迫反应 | 第13-14页 |
| ·非生物胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| ·植物响应各种非生物胁迫反应的分子机理 | 第14页 |
| 2 植物PCD 参与环境胁迫反应 | 第14-20页 |
| ·植物PCD 的主要类型及特征 | 第15-16页 |
| ·类凋亡PCD（apoptosis-like PCD, AL-PCD） | 第15页 |
| ·自体吞噬PCD（autophagic PCD） | 第15-16页 |
| ·植物PCD 响应环境胁迫的信号通路 | 第16-18页 |
| ·植物PCD 响应环境胁迫反应的研究进展 | 第18-20页 |
| 3 植物抗逆相关转录因子研究进展 | 第20-22页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 水稻OsPDCD5 参与非生物胁迫反应的研究 | 第23-39页 |
| 1 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·实验所用的菌株、载体 | 第23页 |
| ·水稻内源OsPDCD5 基因表达分析材料处理 | 第23-24页 |
| ·水稻总RNA 提取 | 第24页 |
| ·半定量RT-PCR 和Real-time PCR | 第24-25页 |
| ·利用Gateway 技术构建OsPDCD5 的RNAi 表达载体 | 第25-26页 |
| ·RNAi 干扰区段的选择 | 第25页 |
| ·OsPDCD5 干扰区段的获取 | 第25页 |
| ·干扰区段OsPDCD5i 导入pDONR201 | 第25-26页 |
| ·OsPDCD5 基因RNAi 表达载体的获得 | 第26页 |
| ·对水稻进行遗传转化 | 第26-28页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备 | 第26-27页 |
| ·表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| ·胚性愈伤的诱导 | 第27页 |
| ·用于侵染的农杆菌菌液准备 | 第27页 |
| ·农杆菌侵染、潮霉素筛选获得抗性愈伤 | 第27-28页 |
| ·转化体植株再生 | 第28页 |
| ·转基因植株阳性检测 | 第28-29页 |
| ·水稻基因组DNA 提取（CTAB 法） | 第28-29页 |
| ·标记基因PCR 阳性鉴定 | 第29页 |
| ·转基因植株OsPDCD5 表达水平分析 | 第29页 |
| ·水稻OsPDCD5-RNAi 转化体细胞水平抗逆性鉴定 | 第29页 |
| ·耐盐性实验 | 第29页 |
| ·抗旱性鉴定 | 第29页 |
| ·水稻OsPDCD5-RNAi 转化植株抗旱性鉴定 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·水稻OsPDCD5 响应逆境胁迫的时空表达谱分析 | 第30页 |
| ·OsPDCD5 基因RNAi 载体构建 | 第30-31页 |
| ·转基因植株的获得与分子鉴定 | 第31-33页 |
| ·水稻IR64-OsPDCD5-RNAi 转基因株系抗逆性分析 | 第33-35页 |
| 3 讨论与展望 | 第35-39页 |
| ·PDCD5 的生物学功能及进化特征分析 | 第35-36页 |
| ·OsPDCD5 响应盐胁迫、低温胁迫反应 | 第36页 |
| ·敲除OsPDCD5 可以提高水稻对干旱的耐受性 | 第36-37页 |
| ·调控植物PCD 改良抗逆新品种 | 第37-39页 |
| 第三章 水稻转录因子OsbHLH59 的功能分析 | 第39-51页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·实验所用的菌株和载体 | 第39页 |
| ·水稻内源OsbHLH59 基因表达分析材料处理 | 第39-40页 |
| ·水稻总RNA 的抽提 | 第40页 |
| ·半定量RT-PCR 和Real-time PCR | 第40页 |
| ·利用Gateway 技术构建表达载体 | 第40页 |
| ·OsbHLH59 基因全长cds 的PCR 扩增 | 第40页 |
| ·attB-OsbHLH59 导入pDONR201 | 第40页 |
| ·植物表达载体的获得 | 第40页 |
| ·洋葱表皮细胞GFP-OsbHLH59 瞬时表达分析 | 第40-41页 |
| ·遗传转化拟南芥Col-0 | 第41-42页 |
| ·拟南芥种子的处理及播种 | 第41页 |
| ·拟南芥幼苗的移栽与培养 | 第41页 |
| ·农杆菌浸沾法转化拟南芥 | 第41-42页 |
| ·转OsbHLH59 基因拟南芥的获得 | 第42页 |
| ·水稻日本晴遗传转化 | 第42页 |
| ·转外源基因拟南芥阳性鉴定 | 第42页 |
| ·转基因日本晴的阳性鉴定 | 第42页 |
| ·转基因拟南芥中外源基因OsbHLH59 的表达分析 | 第42页 |
| ·转基因日本晴中OsbHLH59 过表达分析 | 第42页 |
| ·转基因拟南芥表型与抗逆性分析 | 第42-43页 |
| ·耐盐性鉴定 | 第43页 |
| ·低温胁迫分析 | 第43页 |
| ·PEG 模拟干旱处理分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·OsbHLH59 基因响应环境胁迫表达谱分析 | 第43-44页 |
| ·目标基因的分离与表达载体的构建 | 第44页 |
| ·OsbHLH59 亚细胞定位 | 第44-45页 |
| ·转基因OsbHLH59 拟南芥的获得 | 第45-46页 |
| ·获得日本晴OsbHLH59 超表达株系 | 第46-47页 |
| ·T_0 代转基因日本晴OsbHLH59 超表达分析 | 第47页 |
| ·转基因OsbHLH59 拟南芥表型和抗逆性分析 | 第47-48页 |
| ·转OsbHLH59 基因拟南芥耐盐性分析 | 第47页 |
| ·低温胁迫分析 | 第47-48页 |
| ·抗旱性分析 | 第48页 |
| 3 讨论与展望 | 第48-51页 |
| ·OsbHLH59 具有转录因子的典型特征 | 第48-49页 |
| ·OsbHLH59 参与植物耐盐反应 | 第49页 |
| ·OsbHLH59 可能参与的耐盐机制 | 第49-50页 |
| ·水稻和拟南芥中耐盐机制的异同 | 第50-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
