| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| ·苹果芽变育种的意义及现状 | 第10-11页 |
| ·苹果芽变育种的意义 | 第10页 |
| ·苹果芽变育种的现状 | 第10-11页 |
| ·芽变鉴定技术的发展 | 第11-12页 |
| ·形态学鉴定在芽变鉴定中的应用 | 第11页 |
| ·染色体染色体数量与结构变异检测 | 第11页 |
| ·同工酶分析的应用 | 第11页 |
| ·孢粉学在品种鉴定中的应用 | 第11页 |
| ·分子标记在芽变鉴定中的应用 | 第11-12页 |
| ·芽变机理的探讨 | 第12-13页 |
| ·植物逆转座子研究进展 | 第13-16页 |
| ·逆转座子类型和逆转座子分布 | 第13页 |
| ·逆转座子在基因组中的作用 | 第13-14页 |
| ·建立起来的基于逆转座子的分子标记 | 第14页 |
| ·Ty1-copia 类逆转座子RNaseH-LTR 序列的分离 | 第14页 |
| ·逆转座子的应用 | 第14-16页 |
| ·特异片段转化SCAR 标记的研究 | 第16页 |
| ·反向PCR 技术扩增已知片段旁侧序列的研究 | 第16-17页 |
| ·展望 | 第17-18页 |
| 2 引言 | 第18-20页 |
| ·研究目的与意义 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-20页 |
| ·苹果IRAP 技术体系的建立 | 第18页 |
| ·苹果芽变无性系的IRAP 分析 | 第18页 |
| ·元帅短枝品种特异片段的SCAR 标记转化 | 第18-19页 |
| ·反向PCR 技术扩增特异片段的旁侧序列 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·试验方法 | 第21-25页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第21页 |
| ·DNA 的检测与定量 | 第21页 |
| ·目的产物的回收与纯化 | 第21-22页 |
| ·回收产物与pMD18-T 载体的连接 | 第22页 |
| ·大肠杆菌DH5a 感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第22页 |
| ·IRAP-PCR 反应条件的优化 | 第22-23页 |
| ·芽变品种的聚类分析 | 第23-24页 |
| ·短枝芽变变异位点的SCAR 标记的建立 | 第24页 |
| ·IPCR 技术扩增特异片段的旁侧序列 | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-33页 |
| ·苹果基因组DNA 检测 | 第25页 |
| ·IRAP—PCR 扩增程序的建立 | 第25-27页 |
| ·不同组分浓度对IRAP-PCR 体系的影响 | 第25-26页 |
| ·不同退火温度对IRAP 体系的影响 | 第26-27页 |
| ·苹果无性系芽变的IRAP 扩增结果分析 | 第27-30页 |
| ·苹果无性系芽变的IRAP 多态性分析 | 第27页 |
| ·具有IRAP 特征谱带的苹果无性系芽变分析 | 第27-28页 |
| ·聚类分析 | 第28-30页 |
| ·短枝芽变位点的SCAR 标记的建立 | 第30-31页 |
| ·‘ 玫瑰红’短枝芽变IRAP 特异位点标记 | 第30页 |
| ·Mgha115-750 的克隆和测序结果 | 第30页 |
| ·SCAR 标记引物的设计与扩增体系的建立 | 第30-31页 |
| ·反向PCR 克隆‘玫瑰红’特异片段旁侧序列 | 第31-33页 |
| ·酶切与自身环化连接体系 | 第31页 |
| ·IPCR 反应体系 | 第31页 |
| ·特异片段旁侧序列的克隆与测序 | 第31-33页 |
| 5 讨论 | 第33-36页 |
| ·IRAP 标记体系的影响因素 | 第33页 |
| ·IPAR 标记在芽变鉴定和遗传性研究方面的潜力 | 第33-34页 |
| ·特异片段SCAR 标记的建立 | 第34页 |
| ·反向PCR 克隆旁侧序列存在问题 | 第34-36页 |
| 6 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 附录 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |