| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 主要符号对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-33页 |
| ·Wnt 信号转导通路 | 第10-17页 |
| ·Wnt 配体及其分泌、运输过程 | 第11-13页 |
| ·经典 Wnt 信号通路在细胞膜附近的传递 | 第13-14页 |
| ·经典 Wnt 信号通路在细胞质中的传递 | 第14-15页 |
| ·经典 Wnt 信号通路在细胞核中的传递 | 第15-16页 |
| ·Wnt 靶基因 | 第16页 |
| ·Wnt 信号与疾病 | 第16-17页 |
| ·LRP6 蛋白相关研究 | 第17-26页 |
| ·LRP6 传递经典 Wnt 信号的功能及机制 | 第18-19页 |
| ·LRP6 的磷酸化及调控 | 第19-21页 |
| ·LRP6 的多聚化及内吞 | 第21-22页 |
| ·LRP6 蛋白的翻译后修饰 | 第22页 |
| ·LRP6 的互作蛋白 | 第22-25页 |
| ·LRP6 突变体功能的研究 | 第25-26页 |
| ·LRP6 相关的疾病 | 第26页 |
| ·爪蛙早期胚胎发育及神经诱导 | 第26-32页 |
| ·爪蛙早期胚胎发育的基本过程及早期图式形成 | 第26-30页 |
| ·爪蛙胚胎中的神经诱导及分化 | 第30-31页 |
| ·Wnt/LRP6 在爪蛙胚胎发育中的功能研究 | 第31-32页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第32-33页 |
| 第2章 材料与方法 | 第33-55页 |
| ·实验设备及材料 | 第33-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·主要实验材料 | 第33-34页 |
| ·主要溶液配方 | 第34-36页 |
| ·分子生物学基本实验方法 | 第36-42页 |
| ·克隆及表达载体 | 第36-37页 |
| ·构建克隆的基本步骤 | 第37-38页 |
| ·点突变克隆的构建 | 第38-41页 |
| ·细菌中蛋白试表达检测及提取 | 第41-42页 |
| ·细胞培养及相关检测方法 | 第42-49页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·细胞转染 | 第42-43页 |
| ·免疫印迹 | 第43-44页 |
| ·报告基因检测 | 第44页 |
| ·免疫共沉淀及 GST-Pulldown | 第44-45页 |
| ·免疫荧光 | 第45-46页 |
| ·制备 Wnt3a 和对照条件培养基 | 第46页 |
| ·分离细胞膜和细胞质 | 第46-47页 |
| ·体外磷酸化 | 第47页 |
| ·细胞膜表面生物素标记 | 第47页 |
| ·蔗糖密度梯度离心 | 第47-48页 |
| ·总 RNA 提取及 RT-PCR 检测 | 第48-49页 |
| ·爪蛙胚胎操作相关实验方法 | 第49-55页 |
| ·爪蛙胚胎基本操作 | 第49-50页 |
| ·mRNA 合成 | 第50-51页 |
| ·爪蛙胚胎中动物帽实验 | 第51页 |
| ·胚胎中 LacZ 染色 | 第51-52页 |
| ·探针合成及原位杂交 | 第52-55页 |
| 第3章 TMEM198 在 Wnt 信号通路中的作用 | 第55-85页 |
| ·TMEM198 参与经典 Wnt 信号的传递 | 第55-60页 |
| ·TMEM198 能够与 LRP6 结合并促进 LRP6 的磷酸化 | 第60-67页 |
| ·TMEM198 通过 Casein kinase 1 促进 LRP6 的磷酸化 | 第67-74页 |
| ·TMEM198 能够促进 LRP6 的多聚化 | 第74-80页 |
| ·TMEM198 在 Wnt 诱导的 LRP6 磷酸化过程中的作用 | 第80-81页 |
| ·TMEM198 与 Wnt 信号通路中其它成分的作用 | 第81-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 第4章 TMEM198 在早期胚胎发育中功能的初步研究 | 第85-99页 |
| ·TMEM198 在爪蛙胚胎中的表达 | 第85-87页 |
| ·TMEM198 能够在爪蛙胚胎中与 LRP6 协作激活经典 Wnt 信号 | 第87-89页 |
| ·TMEM198 导致爪蛙胚胎原肠运动缺陷并抑制胚胎头部发育 | 第89-91页 |
| ·TMEM198 影响胚胎神经嵴和前端神经组织的发育 | 第91-98页 |
| ·本章小结 | 第98-99页 |
| 第5章 总结与展望 | 第99-103页 |
| ·结论与讨论 | 第99-102页 |
| ·结论 | 第99页 |
| ·讨论 | 第99-102页 |
| ·工作展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 附录 A pCS2+和 pBluescript SK+质粒图谱 | 第119-121页 |
| 附录 B RT-PCR 引物及 siRNA/shRNA/MO 序列 | 第121-123页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第123页 |
