| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-21页 |
| 1 我国茶园的套种现状 | 第13-14页 |
| 2 茶园土壤微生物群落结构 | 第14-15页 |
| 3 土壤微生物多样性研究方法 | 第15-19页 |
| ·传统研究方法 | 第15-16页 |
| ·稀释平板培养法 | 第15页 |
| ·磷脂脂肪酸（PLFA）图谱分析法 | 第15-16页 |
| ·Biolog分析法 | 第16页 |
| ·分子生物学方法 | 第16-19页 |
| ·随机扩增多态性DNA（RAPD） | 第16-17页 |
| ·限制性片段长度多态性（RFLP） | 第17页 |
| ·扩增片段长度多态性（AFLP） | 第17-18页 |
| ·变性梯度凝胶电泳（DGGE） | 第18页 |
| ·单链构象多态性（SSCP） | 第18页 |
| ·荧光原位杂交（FISH） | 第18-19页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 套种圆叶决明和施肥对茶园土壤微生物数量的影响 | 第21-31页 |
| 1 材料与方法 | 第21-25页 |
| ·试验区概况与试验设计 | 第21-22页 |
| ·试验区概况 | 第21页 |
| ·套种植物 | 第21-22页 |
| ·试验小区设计 | 第22页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·土壤样品 | 第22-23页 |
| ·试验培养基 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·土壤含水量的测定方法 | 第24页 |
| ·平板菌落计数法 | 第24-25页 |
| ·数据的统计分析 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| ·茶园土壤微生物数量的时间动态 | 第25-28页 |
| ·不同处理对茶园土壤微生物数量的影响 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 茶园土壤微生物总 DNA 的提取 | 第31-43页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·土壤样品 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·溶液 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| ·茶园土壤微生物总 DNA 的提取 | 第32-35页 |
| ·SDS 高盐法 | 第32-33页 |
| ·变性剂加SDS 高盐法 | 第33-34页 |
| ·脱腐SDS 高盐法 | 第34页 |
| ·CTAB 法 | 第34-35页 |
| ·Krsek 改进法 | 第35页 |
| ·DNA 的定性检测 | 第35-36页 |
| ·DNA 的定量检测 | 第36页 |
| ·DNA 的PCR 检测 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-41页 |
| ·茶园土壤微生物总DNA的片段大小 | 第37-38页 |
| ·茶园土壤微生物总DNA的纯度和产量 | 第38-40页 |
| ·PCR检测Krsek改进法提取的茶园土壤微生物总DNA | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 套种圆叶决明和施肥对茶园土壤固氮微生物多样性的影响 | 第43-60页 |
| 1 材料与方法 | 第43-49页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·土壤样品 | 第43页 |
| ·质粒与菌株 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·溶液及培养基 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-49页 |
| ·茶园土壤微生物总 DNA 的提取 | 第45页 |
| ·nifH 基因的PCR 扩增 | 第45页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第45-46页 |
| ·PCR纯化产物与PMDTM 18-T Vector连接 | 第46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（CaC12 法） | 第46-47页 |
| ·连接产物的转化 | 第47页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第47-48页 |
| ·菌液PCR产物的纯化 | 第48页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第48页 |
| ·nifH基因RFLP分析 | 第48-49页 |
| ·基因型分析 | 第48页 |
| ·多样性指数分析 | 第48-49页 |
| ·聚类分析和主成分分析 | 第49页 |
| ·DNA序列测序与系统发育分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-58页 |
| ·nifH基因的克隆和RFLP分析 | 第49-54页 |
| ·克隆文库的库容（C）值 | 第54页 |
| ·nifH基因酶切类型的聚类分析和主成分分析 | 第54-55页 |
| ·nifH基因序列测序结果和系统发育分析 | 第55-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 全文总结 | 第60-62页 |
| 1 总结 | 第60-61页 |
| 2 本研究存在的不足 | 第61页 |
| 3 下一步工作设想 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 附录 1 主要仪器 | 第73-74页 |
| 附录 2 常用术语缩写与中英文对照 | 第74-75页 |
| 附录 3 所测序列与 GenBank 数据库中相近序列的相似度 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
