| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-20页 |
| 第一部分 MCPH1 siRNA 有效序列的筛选 | 第20-34页 |
| 1 实验材料 | 第20-23页 |
| ·siRNA 序列及细胞株 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要溶液与试剂的配制 | 第20-23页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-30页 |
| ·siRNA 的设计 | 第23-24页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·合成双链siRNA | 第25页 |
| ·siRNA 的转染 | 第25页 |
| ·RT-PCR 检测CaSki 细胞中MCPH1 的表达 | 第25-28页 |
| ·Western-blot 检测CaSki 细胞中MCPH1 蛋白水平 | 第28-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-32页 |
| ·PCR 检测MCPH1 基因表达结果 | 第30-31页 |
| ·Western blotting 检测MCPH1 基因蛋白水平 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-34页 |
| 第二部分 MCPH1 shRNA 逆转录病毒载体的构建及稳定的宫颈癌CaSki 细胞系的建立 | 第34-47页 |
| 1 实验材料 | 第34-36页 |
| ·shRNA，质粒，菌株及细胞株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要溶液与试剂配制 | 第35页 |
| ·主要仪器与设备 | 第35-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-41页 |
| ·逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-MCPH1 的构建 | 第36-39页 |
| ·逆转录病毒的制备及感染CaSki 细胞 | 第39-40页 |
| ·PCR 检测CaSki 细胞中MCPH1 的表达 | 第40页 |
| ·Real time PCR 检测MCPH1 mRNA 表达水平的变化 | 第40页 |
| ·统计学分析 | 第40页 |
| ·Western blot 检测CaSki 细胞中MCPH1 的蛋白表达水平变化 | 第40-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-44页 |
| ·重组逆转录病毒质粒的测序鉴定 | 第41页 |
| ·逆转录病毒感染CaSki 细胞 | 第41页 |
| ·PCR 检测逆转录病毒作用后细胞中MCPH1 基因的表达变化 | 第41-42页 |
| ·RNAi 逆转录病毒作用后 CaSki 细胞中 MCPH1 mRNA 表达变化 | 第42-43页 |
| ·RNAi 逆转录病毒作用后CaSki 细胞中MCPH1 蛋白表达变化 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 全文总结 | 第47-48页 |
| 文献综述 | 第48-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第59页 |
