| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-37页 |
| 第一章 镉毒性研究进展 | 第16-19页 |
| 1 镉及其毒性 | 第16页 |
| 2 镉的污染途径及在体内的清除 | 第16-17页 |
| 3 镉的毒性机理 | 第17-19页 |
| 第二章 细胞死亡信号途径概述 | 第19-37页 |
| 1 凋亡概况 | 第19-20页 |
| 2 Caspases是引起细胞凋亡的重要起始者和执行者 | 第20-25页 |
| ·Caspases的主要特征和分类 | 第20-21页 |
| ·Caspase的激活 | 第21-23页 |
| ·Caspase目标物 | 第23-25页 |
| ·Caspases的调节 | 第25页 |
| 3 外源性凋亡途径 | 第25-26页 |
| ·外源性凋亡途径的共同特征 | 第25-26页 |
| ·TNF、FAS和TRAIL途径 | 第26页 |
| 4 内源性凋亡途径 | 第26-30页 |
| 5 内质网应激凋亡途径 | 第30-31页 |
| 6 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径 | 第31-32页 |
| 7 内外凋亡途径的交叉点 | 第32-33页 |
| 8 凋亡信号的调节机制 | 第33-35页 |
| ·Myc途径 | 第33页 |
| ·NF-kB | 第33-34页 |
| ·JNK | 第34-35页 |
| ·AKT途径 | 第35页 |
| 9 凋亡细胞的命运 | 第35-37页 |
| 第二部分 实验研究 | 第37-102页 |
| 第一章 镉对大鼠肝细胞毒性损伤的研究 | 第37-48页 |
| 1 材料和方法 | 第37-39页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第37页 |
| ·大鼠肝细胞的分离与培养 | 第37-38页 |
| ·镉对细胞存活率的影响 | 第38页 |
| ·镉对肝细胞形态学的影响 | 第38页 |
| ·镉对肝细胞超微结构的影响 | 第38页 |
| ·细胞损伤标志酶的测定 | 第38-39页 |
| ·统计学分析 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-45页 |
| ·大鼠肝细胞的分离 | 第39页 |
| ·镉对细胞存活率的影响 | 第39-40页 |
| ·镉对细胞形态学的影响 | 第40-41页 |
| ·肝细胞超微结构变化 | 第41-42页 |
| ·镉对细胞培养上清液中LDH、ALT和AST活性的影响 | 第42-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| ·大鼠肝细胞的分离 | 第45页 |
| ·镉对肝细胞的毒性损伤作用 | 第45-48页 |
| 第二章 镉对大鼠肝细胞凋亡及氧化损伤的研究 | 第48-64页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·主要试剂、溶液的配置和仪器 | 第48-49页 |
| ·大鼠肝细胞的分离与培养 | 第49页 |
| ·细胞处理 | 第49页 |
| ·检测相关氧化应激酶的细胞处理 | 第49页 |
| ·镉对大鼠肝细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| ·镉对活性氧(ROS)影响的检测 | 第50页 |
| ·镉对线粒体膜电位的影响 | 第50页 |
| ·统计学分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-59页 |
| ·镉对细胞内GSH含量、GSH-PX、GST和GR活性的影响 | 第50-53页 |
| ·镉对细胞内SOD和CAT活性、MDA含量的影响 | 第53-55页 |
| ·镉引起肝细胞凋亡 | 第55-57页 |
| ·镉对细胞ROS生成的影响 | 第57-58页 |
| ·镉对线粒体膜电位(△Ψm)的影响 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-64页 |
| ·镉致肝细胞凋亡 | 第59-60页 |
| ·镉引起活性氧(ROS)生成产生氧化应激 | 第60-62页 |
| ·镉损伤细胞线粒体 | 第62-64页 |
| 第三章 N-乙酰半胱氨酸对镉致肝细胞损伤的保护作用 | 第64-73页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·实验动物 | 第64页 |
| ·主要试剂、溶液的配置和仪器 | 第64页 |
| ·大鼠肝细胞的分离与培养 | 第64页 |
| ·细胞处理 | 第64页 |
| ·NAC对细胞存活率的影响 | 第64页 |
| ·NAC对细胞形态和凋亡的影响 | 第64页 |
| ·NAC对ROS和△Ψm的影响 | 第64-65页 |
| ·统计学分析 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-70页 |
| ·NAC对细胞成存活率的影响 | 第65-66页 |
| ·NAC对细胞形态学和凋亡的影响 | 第66-68页 |
| ·NAC对ROS生成的影响 | 第68-69页 |
| ·NAC对△Ψm的影响 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-73页 |
| ·NAC对细胞存活率的影响 | 第70-71页 |
| ·NAC对细胞形态和凋亡的影响 | 第71页 |
| ·NAC对ROS和△Ψm的影响 | 第71-73页 |
| 第四章 镉致大鼠肝细胞的非caspase凋亡途径 | 第73-80页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| ·实验动物 | 第73页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第73-74页 |
| ·大鼠肝细胞的分离与培养 | 第74页 |
| ·细胞处理 | 第74页 |
| ·caspase-3活性检测 | 第74页 |
| ·caspases广谱抑制剂Z-VAD-fmk对细胞的影响 | 第74页 |
| 2 结果 | 第74-77页 |
| ·镉对caspase-3活性的影响 | 第74-75页 |
| ·Z-VAD-fmk对细胞的影响 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-80页 |
| 第五章 镉致大鼠肝细胞凋亡的钙离子途径 | 第80-89页 |
| 1 材料与方法 | 第80-81页 |
| ·实验动物 | 第80页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第80页 |
| ·大鼠肝细胞的分离与培养 | 第80页 |
| ·细胞处理 | 第80页 |
| ·镉对大鼠肝细胞内钙离子含量的影响 | 第80-81页 |
| ·钙离子抑制剂Bapta-AM对细胞内钙离子浓度、细胞存活率、形态和凋亡的影响 | 第81页 |
| ·钙离子抑制剂Bapta-AM对线粒体ROS生成、△Ψm变化的影响 | 第81页 |
| ·统计分析 | 第81页 |
| 2 结果 | 第81-87页 |
| ·镉及钙离子抑制剂Bapta-AM对细胞内钙离子浓度的影响 | 第81-83页 |
| ·Bapta-AM对细胞存活率、形态和凋亡率的影响 | 第83-85页 |
| ·Bapta-AM对线粒体ROS生成、△Ψm变化的影响 | 第85-87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 第六章 镉致大鼠肝细胞凋亡的MAPK途径 | 第89-102页 |
| 1 材料与方法 | 第89-91页 |
| ·实验动物 | 第89页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第89-90页 |
| ·大鼠肝细胞的分离与培养 | 第90页 |
| ·细胞处理 | 第90页 |
| ·p38抑制剂 SB202190、JNK抑制剂 SP600125和ERK抑制剂 U0126对细胞存活率的影响 | 第90页 |
| ·MAPK抑制剂对细胞形态和凋亡的影响 | 第90页 |
| ·细胞内p38和p-p38(磷酸化p38)蛋白量的检测(免疫组化法) | 第90-91页 |
| ·统计分析 | 第91页 |
| 2 结果 | 第91-99页 |
| ·SB202190、SP600125和U0126对细胞存活率的影响 | 第91-92页 |
| ·SB202190、SP600125和U0126对细胞形态和凋亡的影响 | 第92-95页 |
| ·镉、NAC和SB202190对p38和p-p38蛋白表达的影响 | 第95-99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| ·MAPK特点 | 第99-100页 |
| ·MAPK在镉诱导细胞凋亡中的作用 | 第100页 |
| ·镉致肝细胞凋亡中p38和p-p38含量的变化 | 第100-101页 |
| ·氧化应激在p38凋亡途径中的作用 | 第101-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第120-121页 |
