| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| ·植物基因启动子及应用 | 第12-13页 |
| ·组织特异启动子的应用 | 第12-13页 |
| ·木质部特异启性动子 | 第13页 |
| ·GFP 和GUS 报告基因 | 第13-15页 |
| ·GFP 报告基因 | 第13-14页 |
| ·GUS 报告基因 | 第14-15页 |
| ·GFP 和GUS 报告基因的比较 | 第15页 |
| ·杨树基因工程研究进展 | 第15-18页 |
| ·国外杨树抗虫基因工程研究现状 | 第16页 |
| ·国内杨树抗虫基因工程研究现状 | 第16-17页 |
| ·杨树转基因存在问题及展望 | 第17-18页 |
| ·研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 木质部特异启动子的序列分析 | 第19-23页 |
| ·材料和方法 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19页 |
| ·结果与分析 | 第19-23页 |
| ·转录调控元件分析 | 第19页 |
| ·木质部特异和伤害诱导原件分析 | 第19-22页 |
| ·其他顺式作用原件 | 第22-23页 |
| 3 植物表达载体的构建 | 第23-32页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·酶及生化试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·常用培养基和试剂的配置 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·质粒pCesAPGFP 的PCR 检测及向农杆菌的转化 | 第24-25页 |
| ·pCesAPGUS 植物表达载体的构建 | 第25-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·质粒pCesAPGFP 的PCR 检测结果及农杆菌转化子鉴定 | 第28-29页 |
| ·pCesAPGUS 的构建及转化子鉴定 | 第29-32页 |
| 4 烟草遗传转化及转化植株的检测 | 第32-41页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·菌种和质粒 | 第32页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·抗生素 | 第32页 |
| ·重要试剂、酶和仪器设备 | 第32-33页 |
| ·试验方法 | 第33-36页 |
| ·无菌苗的培养 | 第33页 |
| ·抑菌抗生素CTX 浓度的确定 | 第33页 |
| ·菌株培养及菌液制备 | 第33页 |
| ·农杆菌介导的基因转化 | 第33-34页 |
| ·转基因烟草的抗性鉴定 | 第34页 |
| ·转基因烟草的DNA 水平检测 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草的报告基因活性鉴定 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·头孢噻肟钠(CTX)对烟草叶片分化的影响 | 第36-37页 |
| ·头孢噻肟钠(CTX)对农杆菌的抑制能力 | 第37页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第37-38页 |
| ·转基因烟草植株的PCR 鉴定 | 第38-39页 |
| ·报告基因活性检测 | 第39-41页 |
| 5 毛白杨雄株-D 遗传转化及转化植株的检测 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌种和质粒 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| ·试验方法 | 第42-43页 |
| ·潮霉素(Hyg)对杨树叶片分化的影响 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的杨树转化 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-45页 |
| ·潮霉素(Hyg)对叶片分化的影响 | 第43页 |
| ·转CesAP 基因毛白杨雄株-D 的筛选及获得 | 第43-44页 |
| ·GFP 基因的活性分析 | 第44-45页 |
| 6 改造启动子的功能检测 | 第45-48页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·pDMDCesAP-GUS 检测 | 第45页 |
| ·烟草转化及PCR 检测 | 第45页 |
| ·GUS 活性检测 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·pDMDCesAP-GUS 的PCR 和酶切检测 | 第46页 |
| ·转基因烟草植株的获得及PCR 检测 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草植株叶片GUS 活性检测 | 第47-48页 |
| 7 讨论 | 第48-49页 |
| 8 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |