| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一部分 人乳头瘤病毒与食管癌相关性研究 | 第18-95页 |
| 综述 | 第18-34页 |
| 第1章 食管癌切除组织标本中HPV 的检测 | 第34-61页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·溶液的配制 | 第35-36页 |
| ·标本来源 | 第36-37页 |
| ·HPV 检测的实验流程 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·食管癌标本中DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·食管癌标本DNA 质量控制 | 第39-40页 |
| ·HPV L1 区通用引物nested PCR 扩增系统 | 第40-41页 |
| ·HPV 型特异性引物nested PCR 扩增系统 | 第41-43页 |
| ·HPV 分型特异性产物的鉴定 | 第43-44页 |
| ·统计学处理 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-58页 |
| ·食管癌标本DNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·提取DNA 的质量控制 | 第45-46页 |
| ·PGMY09/11 和GP5+/6+ 及PGMY/GP PCR 扩增系统 | 第46-50页 |
| ·HPV 型特异性引物nested PCR 扩增系统 | 第50-53页 |
| ·HPV16 和18 型特异性证实 | 第53-56页 |
| ·不同地区和不同方法处理样本中HPV 阳性率的比较 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| 第2章 HPV 整合状态的检测 | 第61-74页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·溶液的配制 | 第61-62页 |
| ·标本来源 | 第62页 |
| ·HPV 整合状态的实验流程 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-66页 |
| ·模板的制备 | 第63页 |
| ·引物设计 | 第63页 |
| ·HPV16 E2 阳性标准品的制备 | 第63-65页 |
| ·引物特异性证实 | 第65页 |
| ·荧光PCR 标准及反应程序 | 第65-66页 |
| ·病毒和人基因的定量 | 第66页 |
| ·HPV16 整合状态 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-71页 |
| ·HPV16E2 阳性标准品的制备 | 第66页 |
| ·E2 和E6 引物特异性 | 第66-68页 |
| ·实时荧光PCR 标准曲线及病毒载量确定 | 第68-69页 |
| ·HPV16 整合状态 | 第69-71页 |
| ·讨论 | 第71-74页 |
| 第3章 HPV 在染色体的定位 | 第74-81页 |
| ·实验材料 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·溶液的配制 | 第74页 |
| ·标本来源 | 第74页 |
| ·实验流程 | 第74-75页 |
| ·实验方法 | 第75-77页 |
| ·RNA 的提取 | 第75页 |
| ·提取RNA 质量的评价 | 第75-76页 |
| ·HPV 癌基因转录扩增 | 第76-77页 |
| ·第二轮产物克隆至pMD-18T 载体 | 第77页 |
| ·质粒的提取 | 第77页 |
| ·HPV 在人染色体的定位 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-79页 |
| ·RNA 提取及其质量 | 第77页 |
| ·HPV E7 特异性引物第二轮PCR 扩增的结果 | 第77-78页 |
| ·测序结果 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 第4章 人乳头瘤病毒与食管癌病原学关系的Meta 分析 | 第81-88页 |
| ·材料 | 第81页 |
| ·方法 | 第81-82页 |
| ·文献的选择标准 | 第81页 |
| ·文献剔除标准 | 第81页 |
| ·统计学分析 | 第81-82页 |
| ·结果 | 第82-85页 |
| ·入选文献情况 | 第82-83页 |
| ·HPV 在食管癌病例及正常对照组中的总感染状况的Meta 分析 | 第83页 |
| ·HPV16 在食管癌病例及正常对照组中的分析状况 | 第83-85页 |
| ·HPV 感染的地域分布状况 | 第85页 |
| ·讨论 | 第85-88页 |
| 第5章 结论 | 第88-89页 |
| 第6章 今后将进一步研究的问题 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-95页 |
| 第二部分 EB 病毒与胃癌的相关性 | 第95-134页 |
| 综述 | 第95-105页 |
| 第7章 EB 病毒感染与胃癌临床病理特征相关的Meta 分析 | 第105-113页 |
| ·材料 | 第105页 |
| ·方法 | 第105页 |
| ·资料的选择标准 | 第105页 |
| ·剔除标准 | 第105页 |
| ·统计分析 | 第105页 |
| ·结果 | 第105-110页 |
| ·EBV 相关胃癌地域分布状况 | 第106-107页 |
| ·EBV 相关胃癌与标本类型的关系 | 第107页 |
| ·EBV 相关胃癌与性别的关系 | 第107-108页 |
| ·EBV 阳性胃癌与淋巴结转移的关系 | 第108页 |
| ·EBV 阳性胃癌与癌组织发生部位的关系 | 第108-109页 |
| ·EBV 阳性胃癌与组织学类型的关系 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-113页 |
| 第8章 带有EB 病毒BARF1 基因真核表达载体的构建 | 第113-128页 |
| ·实验材料 | 第113-114页 |
| ·细胞、菌种及载体 | 第113页 |
| ·主要试剂 | 第113-114页 |
| ·主要仪器 | 第114页 |
| ·溶液的配制 | 第114页 |
| ·实验流程 | 第114页 |
| ·实验方法 | 第114-121页 |
| ·细胞复苏 | 第114-115页 |
| ·细胞传代 | 第115页 |
| ·细胞冻存 | 第115页 |
| ·细胞培养 | 第115页 |
| ·细胞RNA 的提取 | 第115-116页 |
| ·引物设计与合成 | 第116页 |
| ·目的基因BARF1 的扩增 | 第116-117页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第117页 |
| ·目的基因克隆至pUM-T 载体 | 第117-118页 |
| ·质粒的提取 | 第118页 |
| ·质粒pUM-T/BARF1 的鉴定 | 第118-119页 |
| ·携带目的基因BARF1 的真核表达载体的构建 | 第119-120页 |
| ·质粒pcDNA3.1(+)/BARF1-his 的鉴定 | 第120-121页 |
| ·结果 | 第121-125页 |
| ·895-8 细胞RNA 提取 | 第121页 |
| ·目的基因的扩增 | 第121-122页 |
| ·BARF1 基因T-A 克隆的鉴定 | 第122-124页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1(+)/BARF1-his 的鉴定 | 第124-125页 |
| ·讨论 | 第125-128页 |
| 第9章 结论 | 第128-129页 |
| 第10章 今后将进一步研究的问题 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第135页 |
