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腺病毒介导PPAR-γ1基因脑室内转染对大鼠缺血再灌注脑的保护作用及机制

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-14页
前言第14-16页
第一部分 大鼠缺血再灌注脑组织PPARγ1表达变化第16-30页
 1. 材料和方法第16-23页
   ·实验动物及来源第16页
   ·药品与试剂第16-17页
   ·仪器第17页
   ·实验动物分组第17页
   ·动物模型制作及实验阳性大鼠选择第17-19页
   ·脑组织标本采集第19页
   ·RT-PCR方法测定mRNA表达第19-21页
     ·Trizol法抽提总RNA第19页
     ·检测RNA的完整性第19页
     ·RNA变性第19-20页
     ·逆转录第20页
     ·PCR扩增第20-21页
     ·琼脂糖凝胶电泳第21页
   ·Western blot测定蛋白表达第21-23页
     ·细胞总蛋白的提取第21页
     ·蛋白浓度第21页
     ·蛋白样品的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第21-22页
     ·转膜第22页
     ·封闭第22页
     ·加样第22页
     ·ECL发光及显影和结果分析第22-23页
 2 统计处理第23页
 3 结果第23-26页
   ·总RNA提取第23页
   ·脑缺血再灌注后PPAR-γ1mRNA和蛋白表达变化第23-26页
 4 讨论第26-29页
   ·大鼠脑缺血再灌注模型的制作第27-28页
   ·脑缺血再灌注与PPAR-γ1的关系第28-29页
 5 结论第29-30页
第二部分 腺病毒介导PPAR-γ1基因脑室内转染对大鼠缺血再灌注脑的保护作用及机制第30-48页
 1 材料和方法第30-32页
   ·实验动物及来源同第一部分第30页
   ·主要试剂见第一部分第30页
   ·主要仪器见第一部分第30页
   ·方法第30-32页
     ·目的基因过表达载体构建见附录第30页
     ·实验动物分组第30页
     ·重组腺病毒侧脑室内转染第30-31页
     ·脑缺血再灌注模型的建立及行为学评定第31页
     ·标本的收集第31页
     ·标本的检测第31-32页
 2 统计处理第32页
 3 结果第32-38页
   ·Adv-PPAR-γ1的转染结果第32-33页
   ·脑梗死体积的比较第33页
   ·血脑屏障通透性的比较第33-34页
   ·脑组织含水量的比较第34-35页
   ·病理形态学观察第35页
   ·脑组织MPO活性测定第35-36页
   ·IL-1β、ICAM-1、Bcl-2、Bax、AQP-4和MMP-9蛋白的表达第36-38页
 4 讨论第38-47页
   ·PPAR-γ1与炎症反应第38-42页
     ·PPAR-γ1对IL-1β的影响第39页
     ·PPAR-γ1对ICAM-1的影响第39-40页
     ·PPAR-γ1对中性粒细胞聚集的影响第40-42页
   ·PPAR-γ1与凋亡第42-43页
   ·PPAR-γ1与脑水肿第43-47页
     ·PPAR-γ1对MMP-9影响第43-44页
     ·PPAR-γ1对AQP-4影响第44-46页
     ·血脑屏障破坏及脑水肿发生的炎症机制第46-47页
 5. 结论第47-48页
全文小结第48-49页
创新与不足第49-50页
参考文献第50-56页
附录 目的基因过表达载体构建第56-72页
附图第72-76页
综述一第76-87页
综述二第87-96页
致谢第96-97页
攻读学位期间的主要成果第97页

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