中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 大鼠缺血再灌注脑组织PPARγ1表达变化 | 第16-30页 |
1. 材料和方法 | 第16-23页 |
·实验动物及来源 | 第16页 |
·药品与试剂 | 第16-17页 |
·仪器 | 第17页 |
·实验动物分组 | 第17页 |
·动物模型制作及实验阳性大鼠选择 | 第17-19页 |
·脑组织标本采集 | 第19页 |
·RT-PCR方法测定mRNA表达 | 第19-21页 |
·Trizol法抽提总RNA | 第19页 |
·检测RNA的完整性 | 第19页 |
·RNA变性 | 第19-20页 |
·逆转录 | 第20页 |
·PCR扩增 | 第20-21页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
·Western blot测定蛋白表达 | 第21-23页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第21页 |
·蛋白浓度 | 第21页 |
·蛋白样品的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第21-22页 |
·转膜 | 第22页 |
·封闭 | 第22页 |
·加样 | 第22页 |
·ECL发光及显影和结果分析 | 第22-23页 |
2 统计处理 | 第23页 |
3 结果 | 第23-26页 |
·总RNA提取 | 第23页 |
·脑缺血再灌注后PPAR-γ1mRNA和蛋白表达变化 | 第23-26页 |
4 讨论 | 第26-29页 |
·大鼠脑缺血再灌注模型的制作 | 第27-28页 |
·脑缺血再灌注与PPAR-γ1的关系 | 第28-29页 |
5 结论 | 第29-30页 |
第二部分 腺病毒介导PPAR-γ1基因脑室内转染对大鼠缺血再灌注脑的保护作用及机制 | 第30-48页 |
1 材料和方法 | 第30-32页 |
·实验动物及来源同第一部分 | 第30页 |
·主要试剂见第一部分 | 第30页 |
·主要仪器见第一部分 | 第30页 |
·方法 | 第30-32页 |
·目的基因过表达载体构建见附录 | 第30页 |
·实验动物分组 | 第30页 |
·重组腺病毒侧脑室内转染 | 第30-31页 |
·脑缺血再灌注模型的建立及行为学评定 | 第31页 |
·标本的收集 | 第31页 |
·标本的检测 | 第31-32页 |
2 统计处理 | 第32页 |
3 结果 | 第32-38页 |
·Adv-PPAR-γ1的转染结果 | 第32-33页 |
·脑梗死体积的比较 | 第33页 |
·血脑屏障通透性的比较 | 第33-34页 |
·脑组织含水量的比较 | 第34-35页 |
·病理形态学观察 | 第35页 |
·脑组织MPO活性测定 | 第35-36页 |
·IL-1β、ICAM-1、Bcl-2、Bax、AQP-4和MMP-9蛋白的表达 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-47页 |
·PPAR-γ1与炎症反应 | 第38-42页 |
·PPAR-γ1对IL-1β的影响 | 第39页 |
·PPAR-γ1对ICAM-1的影响 | 第39-40页 |
·PPAR-γ1对中性粒细胞聚集的影响 | 第40-42页 |
·PPAR-γ1与凋亡 | 第42-43页 |
·PPAR-γ1与脑水肿 | 第43-47页 |
·PPAR-γ1对MMP-9影响 | 第43-44页 |
·PPAR-γ1对AQP-4影响 | 第44-46页 |
·血脑屏障破坏及脑水肿发生的炎症机制 | 第46-47页 |
5. 结论 | 第47-48页 |
全文小结 | 第48-49页 |
创新与不足 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录 目的基因过表达载体构建 | 第56-72页 |
附图 | 第72-76页 |
综述一 | 第76-87页 |
综述二 | 第87-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
攻读学位期间的主要成果 | 第97页 |