中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-11页 |
前言 | 第11-14页 |
研究现状、成果 | 第11-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
一、miR-92a在肝癌细胞中的表达情况以及功能探究 | 第14-32页 |
1.1 材料与方法 | 第14-24页 |
1.1.1 实验材料 | 第14-16页 |
1.1.2 实验方法 | 第16-24页 |
1.2 实验结果 | 第24-32页 |
1.2.1 Real-timePCR检测肝癌细胞中miR-92a的表达情况 | 第24页 |
1.2.2 pcDNA3/miR-92a质粒的构建 | 第24-25页 |
1.2.3 肝癌细胞转染效率的检测 | 第25页 |
1.2.4 实时定量 PCR方法检测QGY-7703和 HepG2细胞在转染pcDNA3/miR-92a或ASO-miR-92a后miR-92a的表达情况 | 第25-26页 |
1.2.5 MTT比色法检测miR-92a对肝癌细胞生长活性的影响 | 第26-27页 |
1.2.6 平板克隆实验检测miR-92a对肝癌细胞集落形成能力的影响 | 第27-28页 |
1.2.7 体外划痕实验分析miR-92a对肝癌细胞的迁移能力的影响 | 第28页 |
1.2.8 Transwell迁移实验研究miR-92a在肝癌细胞中的迁移能力 | 第28-29页 |
1.2.9 Transwell侵袭实验检测过表达或敲降miR-92a对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第29-30页 |
1.2.10 过表达或封闭miR-92a对EMT进程的影响 | 第30-32页 |
二、miR-92a在肝癌细胞中靶基因的预测及验证 | 第32-38页 |
2.1 材料与方法 | 第32-35页 |
2.1.1 实验材料 | 第32页 |
2.1.2 实验方法 | 第32-35页 |
2.2 实验结果 | 第35-38页 |
2.2.1 RAB3B为miR-92a的预测靶基因 | 第35页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证RAB3B为miR-92a的直接靶基因 | 第35-36页 |
2.2.3 实时定量PCR检测miR-92a对RAB3B的mRNA水平的影响 | 第36-37页 |
2.2.4 miR-92a在肝癌细胞中对RAB3B蛋白水平的影响 | 第37-38页 |
三、RAB3B在肝癌细胞中的功能研究 | 第38-50页 |
3.1 材料与方法 | 第38-42页 |
3.2 实验结果 | 第42-50页 |
3.2.1 在RNA水平检测过表达和敲降RAB3B质粒是有效的 | 第42-43页 |
3.2.2 过表达和敲降RAB3B后对RAB3B蛋白水平的影响 | 第43-44页 |
3.2.3 RAB3B在肝癌细胞中的表达情况 | 第44-45页 |
3.2.4 RAB3B促进肝癌细胞的生长活性 | 第45页 |
3.2.5 RAB3B对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第45-46页 |
3.2.6 过表达和敲降RAB3B对肝癌细胞相对迁移速率的影响 | 第46-47页 |
3.2.7 RAB3B能促进肝癌细胞迁移和侵袭能力 | 第47-48页 |
3.2.8 RAB3B对EMT进程的影响 | 第48-50页 |
四、RAB3B通过促进ATP的产生影响肿瘤细胞能量代谢 | 第50-57页 |
4.1 实验材料与方法 | 第50-54页 |
4.1.1 实验对象 | 第50页 |
4.1.2 实验方法 | 第50-54页 |
4.2 实验结果 | 第54-57页 |
4.2.1 CO-IP方法筛选候选与RAB3B相互作用的蛋白 | 第54-55页 |
4.2.2 过表达RAB3B后检测ATP水平变化 | 第55-57页 |
讨论 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第63-64页 |
综述 RAB3B与肿瘤的关系 | 第64-74页 |
综述参考文献 | 第70-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简历 | 第75页 |