| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 禽流感及禽流感疫苗 | 第12-15页 |
| 1.1.1 禽流感 | 第12页 |
| 1.1.2 禽流感病毒 | 第12-14页 |
| 1.1.3 禽流感疫苗 | 第14-15页 |
| 1.2 禽流感疫苗动物细胞培养工艺 | 第15-18页 |
| 1.2.1 动物细胞培养技术的发展 | 第15页 |
| 1.2.2 MDCK细胞及其生产流感疫苗的方式 | 第15-17页 |
| 1.2.3 MDCK细胞无血清培养基的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 流感病毒维持培养基的开发 | 第18-21页 |
| 1.3.1 细胞生长培养基与维持培养基 | 第18页 |
| 1.3.2 影响流感病毒生产的重要添加物 | 第18-19页 |
| 1.3.3 无血清培养基的开发方法 | 第19-21页 |
| 1.4 本文的研究内容、目的及意义 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第22页 |
| 2.1.2 流感病毒株 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22页 |
| 2.1.4 实验材料及仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 贴壁MDCK细胞复苏与传代培养 | 第23页 |
| 2.2.2 悬浮MDCK细胞复苏与传代培养 | 第23-24页 |
| 2.2.3 病毒感染 | 第24页 |
| 2.3 分析方法 | 第24页 |
| 2.3.1 细胞计数 | 第24页 |
| 2.3.2 流感病毒HA滴度的测定 | 第24页 |
| 2.3.3 流感病毒TCID_(50)的测定 | 第24页 |
| 2.3.4 细胞代谢物浓度的测定 | 第24页 |
| 2.4 数据处理 | 第24-26页 |
| 2.4.1 细胞比生长速率的计算 | 第24-25页 |
| 2.4.2 MOI的计算 | 第25页 |
| 2.4.3 单细胞产毒率的计算 | 第25页 |
| 2.4.4 代谢物比消耗或比生成速率的计算 | 第25页 |
| 2.4.5 统计学分析 | 第25-26页 |
| 第3章 维持培养基的开发与优化 | 第26-44页 |
| 3.1 前言 | 第26页 |
| 3.2 实验方案 | 第26-28页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第28-43页 |
| 3.3.1 Simplex Lattice实验设计筛选维持培养基基本组成 | 第28-31页 |
| 3.3.2 Placektt-Burman实验设计筛选促进流感病毒生产的显著添加物 | 第31-37页 |
| 3.3.3 中心组合设计优化促进病毒生产的显著添加物浓度 | 第37-43页 |
| 3.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第4章 维持培养基在生物反应器中的验证及细胞代谢研究 | 第44-55页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 实验方案 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第45-53页 |
| 4.3.1 接毒稀释流加工艺优化 | 第45-46页 |
| 4.3.2 2L生物反应器验证 | 第46-48页 |
| 4.3.3 细胞代谢特性研究 | 第48-53页 |
| 4.4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第5章 维持培养基的应用初探 | 第55-62页 |
| 5.1 前言 | 第55页 |
| 5.2 实验方案 | 第55-56页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第56-61页 |
| 5.3.1 维持培养基在不同种类胰酶条件下的应用 | 第56-58页 |
| 5.3.2 维持培养基在不同种类毒株条件下的应用 | 第58-59页 |
| 5.3.3 维持培养基在MDCK细胞传代方面的应用 | 第59-61页 |
| 5.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第62-64页 |
| 6.1 全文总结 | 第62-63页 |
| 6.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读硕士期间撰写的论文 | 第72页 |
