| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 环境中的重金属等非生物胁迫以及对植物的影响 | 第10-11页 |
| 1.2 植物应对非生物胁迫的机制 | 第11-13页 |
| 1.2.1 清除活性氧的非酶促系统 | 第11-12页 |
| 1.2.2 清除活性氧的酶促系统 | 第12页 |
| 1.2.3 谷胱甘肽代谢途径 | 第12-13页 |
| 1.3 谷胱甘肽还原酶 | 第13-15页 |
| 1.3.1 谷胱甘肽还原酶的功能 | 第13-14页 |
| 1.3.2 谷胱甘肽还原酶在细胞中的分布 | 第14页 |
| 1.3.3 谷胱甘肽还原酶在环境胁迫中的作用 | 第14-15页 |
| 1.4 百合的研究进展 | 第15页 |
| 1.5 百合再生体系的建立 | 第15-17页 |
| 1.5.1 外植体的选择 | 第15-16页 |
| 1.5.2 不定芽的诱导 | 第16页 |
| 1.5.3 愈伤组织的诱导分化 | 第16页 |
| 1.5.4 培养基的选择 | 第16-17页 |
| 1.6 百合的基因工程研究 | 第17-18页 |
| 1.6.1 百合遗传转化的研究现状 | 第17页 |
| 1.6.2 百合遗传转化中的影响因素 | 第17-18页 |
| 1.7 本研究的目的和内容 | 第18-20页 |
| 1.7.1 研究目的 | 第18-19页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第2章 重金属胁迫下转LcGR基因烟草的功能分析 | 第20-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 引物设计 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要试剂及实验消耗品 | 第21-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 转基因烟草的培养 | 第23页 |
| 2.2.2 不同株系转基因烟草在重金属胁迫下的分子检测 | 第23-26页 |
| 2.2.2.1 烟草基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2.2 烟草RNA提取 | 第24页 |
| 2.2.2.3 检测DNA和RNA的浓度 | 第24-25页 |
| 2.2.2.4 反转录RNA | 第25页 |
| 2.2.2.5 基因组PCR验证 | 第25页 |
| 2.2.2.6 半定量PCR验证 | 第25-26页 |
| 2.2.3 烟草的选取和重金属处理 | 第26-29页 |
| 2.2.3.1 转基因烟草的选取 | 第26页 |
| 2.2.3.2 重金属胁迫时烟草幼苗生长状态和生长量的分析 | 第26页 |
| 2.2.3.3 重金属胁迫对转基因烟草的影响 | 第26-27页 |
| 2.2.3.4 谷胱甘肽还原酶的活性检测 | 第27页 |
| 2.2.3.5 检测MDA含量 | 第27-28页 |
| 2.2.3.6 过氧化氢酶的活性检测 | 第28页 |
| 2.2.3.7 叶绿素含量检测 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-43页 |
| 2.3.1 转基因烟草的培养 | 第29页 |
| 2.3.2 转基因的烟草的PCR检测鉴定结果 | 第29-30页 |
| 2.3.3 半定量PCR检测结果 | 第30-31页 |
| 2.3.4 烟草叶片中RNA的提取 | 第31页 |
| 2.3.5 铜离子胁迫下转基因烟草的性状分析 | 第31-36页 |
| 2.3.5.1 烟草幼苗的生长形态和生长量分析 | 第32-33页 |
| 2.3.5.2 不同转基因株系中的叶绿素含量 | 第33-34页 |
| 2.3.5.3 不同转基因株系在金属铜胁迫中的生理生化指标分析 | 第34-36页 |
| 2.3.6 镉离子胁迫下转基因烟草的性状分析 | 第36-40页 |
| 2.3.6.1 烟草幼苗的生长形态分析 | 第36-37页 |
| 2.3.6.2 不同转基因株系中的叶绿素含量比较 | 第37-38页 |
| 2.3.6.3 不同转基因株系在金属镉胁迫中的生理生化指标分析 | 第38-40页 |
| 2.3.7 铜离子和镉离子协同胁迫下转基因烟草的性状分析 | 第40-43页 |
| 2.3.7.1 烟草幼苗的生长形态分析 | 第40-41页 |
| 2.3.7.2 不同转基因烟草株系中叶绿素含量的比较分析 | 第41页 |
| 2.3.7.3 转基因烟草在铜离子和镉离子共胁迫下的生理指标分析 | 第41-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43页 |
| 2.5 讨论 | 第43-46页 |
| 第3章 LcGR基因在百合抗重金属中的应用 | 第46-64页 |
| 3.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 3.1.1 培养基 | 第46页 |
| 3.1.2 试剂和材料 | 第46-47页 |
| 3.1.3 引物设计 | 第47页 |
| 3.1.4 菌株和载体 | 第47-48页 |
| 3.1.5 试剂和仪器 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 试管苗诱导鳞片膨大 | 第48-49页 |
| 3.2.2 鳞片直接诱导小芽 | 第49页 |
| 3.2.3 鳞片诱导愈伤及分化 | 第49页 |
| 3.2.4 鳞片抗生素筛选 | 第49页 |
| 3.2.5 农杆菌侵染外植体 | 第49-50页 |
| 3.2.5.1 农杆菌菌液的准备 | 第49-50页 |
| 3.2.5.2 农杆菌侵染百合鳞片 | 第50页 |
| 3.2.6 优化农杆菌侵染的条件 | 第50页 |
| 3.2.7 转基因百合的PCR检测鉴定 | 第50-51页 |
| 3.2.8 百合的移栽、培养与胁迫处理 | 第51页 |
| 3.2.8.1 百合的移栽与培养 | 第51页 |
| 3.2.8.2 百合重金属胁迫处理 | 第51页 |
| 3.2.9 不同胁迫下百合的生长情况的观察和生理生化指标的检测 | 第51页 |
| 3.3 结果与分析 | 第51-61页 |
| 3.3.1 诱导鳞片膨大并增殖 | 第51-52页 |
| 3.3.2 鳞片直接诱导不定芽 | 第52-53页 |
| 3.3.3 鳞片诱导愈伤及分化 | 第53-54页 |
| 3.3.4 不定芽和愈伤组织的最适筛选压力 | 第54页 |
| 3.3.5 农杆菌侵染 | 第54-55页 |
| 3.3.6 百合遗传转化体系的优化 | 第55-56页 |
| 3.3.7 转基因百合的获得 | 第56-57页 |
| 3.3.8 转基因百合的鉴定 | 第57-58页 |
| 3.3.9 转基因百合在重金属胁迫下的生长状态分析 | 第58-59页 |
| 3.3.10 转基因百合在铜离子和镉离子胁迫下的抗逆性分析 | 第59-61页 |
| 3.3.10.1 百合叶片MDA的含量分析 | 第59-60页 |
| 3.3.10.2 谷胱甘肽还原酶的活性分析 | 第60页 |
| 3.3.10.3 过氧化氢酶的活性分析 | 第60-61页 |
| 3.4 本章小节 | 第61-62页 |
| 3.5 讨论 | 第62-64页 |
| 第4章 结论和展望 | 第64-66页 |
| 4.1 结论 | 第64页 |
| 4.1.1 枸杞LcGR基因的功能验证 | 第64页 |
| 4.1.2 枸杞LcGR基因在百合中的应用 | 第64页 |
| 4.2 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
