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一种人4/7型双价腺病毒候选疫苗株的构建及评价

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
引言第10-16页
1 人4型腺病毒ITR突变株的构建第16-37页
    1.1 材料与方法第16-23页
        1.1.1 实验仪器设备与主要试剂第16-17页
        1.1.2 菌株、质粒、细胞株与病毒株第17页
        1.1.3 培养基及相关试剂配制第17-18页
        1.1.4 菌株、细胞株及病毒株的培养第18-19页
        1.1.5 感染性克隆pBR-Ad4-ITRmut的构建第19-22页
        1.1.6 脂质体介导的DNA转染第22-23页
        1.1.7 Western bolt分析其六邻体蛋白的表达第23页
        1.1.8 透射电子显微镜观察腺病毒粒子第23页
        1.1.9 生长曲线绘制第23页
    1.2 结果与分析第23-35页
        1.2.1 穿梭质粒pBR-ITRmut的构建第23-26页
        1.2.2 骨架质粒pBR-Ad4-ITRmut鉴定第26-29页
        1.2.3 腺病毒基因组的释放第29页
        1.2.4 脂质体介导的DNA转染293T细胞第29-33页
        1.2.5 Western bolt分析其六邻体蛋白的表达第33页
        1.2.6 透射电子显微镜观察腺病毒粒子第33-34页
        1.2.7 复制速率的比较第34-35页
    1.3 讨论第35-36页
    1.4 总结第36-37页
2 人4/7型腺病毒中和表位嵌合重组腺病毒候选疫苗株的构建第37-53页
    2.1 材料与方法第37-42页
        2.1.1 实验仪器设备与主要试剂第37页
        2.1.2 质粒、菌株、细胞株及病毒株第37-38页
        2.1.3 培养基及相关试剂配制第38页
        2.1.4 菌株、细胞株及病毒株的培养第38页
        2.1.5 人4型/7型腺病毒中和表位嵌合的双价重组腺病毒载体的构建第38-41页
        2.1.6 脂质体介导的重组腺病毒DNA转染293T细胞第41页
        2.1.7 Western bolt分析第41页
        2.1.8 细胞免疫荧光实验第41-42页
        2.1.9 透射电子显微镜观察腺病毒粒子第42页
        2.1.10 复制速率检测第42页
        2.1.11 CCK-8试验检测毒力作用第42页
    2.2 结果与分析第42-51页
        2.2.1 重组腺病毒载体pBR-Ad4ITRmut-Ad7E3的构建第42-44页
        2.2.2 脂质体介导的重组腺病毒DNA转染293T细胞第44-48页
        2.2.3 Western bolt分析Hexon的表达第48-49页
        2.2.4 透射电子显微镜观察腺病毒粒子第49页
        2.2.5 细胞免疫荧光实验检测中和表位E3的表达第49-50页
        2.2.6 Ad4ITRmut-Ad7E3生长曲线绘制第50-51页
        2.2.7 CCK-8试验检测结果分析第51页
    2.3 讨论第51-52页
    2.4 总结第52-53页
3 双价腺病毒候选疫苗株Ad4ITRmut-Ad7E3免疫效果评价第53-65页
    3.1 材料与方法第53-56页
        3.1.1 实验仪器设备与主要试剂第53页
        3.1.2 细胞株与病毒株第53页
        3.1.3 培养基及相关试剂配制第53-54页
        3.1.4 细胞株及病毒株的培养第54页
        3.1.5 实验动物第54页
        3.1.6 动物免疫及分组第54页
        3.1.7 腺病毒大量扩增第54-55页
        3.1.8 腺病毒的纯化第55-56页
        3.1.9 腺病毒滴度测定第56页
        3.1.10 抗体中和试验第56页
    3.2 结果与分析第56-63页
        3.2.1 腺病毒纯化及滴度测定第56-58页
        3.2.2 免疫剂量的选择第58页
        3.2.3 血清抗体中和能力分析第58-61页
        3.2.4 小鼠攻毒试验第61-63页
    3.3 讨论第63页
    3.4 总结第63页
    3.5 结论第63-65页
参考文献第65-68页
附录1 缩略语表(Abbreviations)第68-69页
附录2 个人情况简介第69-70页
致谢第70页

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