| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 中英文名称术语及缩写对照 | 第14-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-26页 |
| 1.1 肝癌简介 | 第16-17页 |
| 1.1.1 肝癌流行病学 | 第16页 |
| 1.1.2 肝癌的分类 | 第16-17页 |
| 1.1.3 肝癌早期诊断的重要性 | 第17页 |
| 1.2 肝癌生物标志物研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2.1 肿瘤生物标志物 | 第17-18页 |
| 1.2.2 目前的肝癌诊断生物标志物及其局限性 | 第18页 |
| 1.3 蛋白质组学在肝癌生物标志物研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 外泌体简介 | 第19-23页 |
| 1.4.1 外泌体 | 第19-21页 |
| 1.4.2 外泌体与肿瘤的关系 | 第21页 |
| 1.4.3 外泌体与生物标志物 | 第21-23页 |
| 1.5 候选生物标志物简介 | 第23-25页 |
| 1.5.1 CAMSAP2 | 第23-24页 |
| 1.5.2 PPP1CA | 第24-25页 |
| 1.6 本课题的意义及拟开展的工作 | 第25-26页 |
| 第二章 外泌体的纯化及其蛋白质组学的研究 | 第26-42页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第26-30页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第26页 |
| 2.1.2 抗体 | 第26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.5 实验耗材 | 第28页 |
| 2.1.6 常用溶液组分 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.2.2 原代肝细胞的分离纯化 | 第31页 |
| 2.2.3 PAS糖原染色法鉴定原代肝细胞 | 第31-32页 |
| 2.2.4 外泌体的提取 | 第32页 |
| 2.2.5 BCA法测定蛋白浓度 | 第32-33页 |
| 2.2.6 蛋白质免疫印迹法(Western blotting) | 第33-34页 |
| 2.2.7 透射电子显微镜 | 第34-35页 |
| 2.2.8 粒径分布 | 第35页 |
| 2.2.9 FASP质谱前处理 | 第35页 |
| 2.2.10 ZipTip C18柱除盐 | 第35-36页 |
| 2.2.11 SEIVE非标定量分析 | 第36页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第36-40页 |
| 2.3.1 原代肝细胞的分离纯化 | 第36-37页 |
| 2.3.2 外泌体的分离纯化与鉴定 | 第37页 |
| 2.3.3 外泌体蛋白组学的分析 | 第37-40页 |
| 2.4 小结 | 第40-42页 |
| 第三章 目标蛋白在肝癌细胞系和肝癌病理样本中的表达 | 第42-52页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第42-43页 |
| 3.1.1 肝癌样本 | 第42页 |
| 3.1.2 抗体 | 第42页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第43页 |
| 3.1.5 常用溶液组分 | 第43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-48页 |
| 3.2.1 实时荧光定量PCR | 第43-46页 |
| 3.2.2 免疫印迹法测组织蛋白样品表达水平 | 第46页 |
| 3.2.3 免疫组化 | 第46-48页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第48-51页 |
| 3.3.1 病理样本中候选标志物的mRNA表达水平 | 第48-49页 |
| 3.3.2 病理样本中候选标志物的蛋白表达水平 | 第49-51页 |
| 3.4 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 目标蛋白在肝癌血清样本中的检测 | 第52-57页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第52页 |
| 4.1.1 肝癌样本 | 第52页 |
| 4.1.2 试剂和材料 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.2.1 血清的制备 | 第52页 |
| 4.2.2 酶联免疫吸附测定 | 第52-53页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第53-56页 |
| 4.3.1 血清样本中候选标志物的含量检测 | 第53-55页 |
| 4.3.2 候选标志物的临床分析 | 第55-56页 |
| 4.4 小结 | 第56-57页 |
| 全文小结与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
