致谢 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略词(Abbreviation) | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 藻蓝蛋白 | 第11-12页 |
1.2 藻蓝蛋白的光谱特征 | 第12-13页 |
1.3 藻蓝蛋白的抗氧化活性 | 第13页 |
1.4 天然藻蓝蛋白的提取 | 第13-15页 |
1.5 藻蓝蛋白的重组生产 | 第15-17页 |
1.5.1 藻蓝蛋白的生物合成机理 | 第15-16页 |
1.5.2 在大肠杆菌中生产藻蓝蛋白 | 第16-17页 |
1.6 重组藻蓝蛋白的抗氧化活性 | 第17页 |
1.7 本课题的研究意义和内容 | 第17-19页 |
1.7.1 研究意义 | 第17-18页 |
1.7.2 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 盐泽螺旋藻藻蓝蛋白β亚基生物合成相关基因的分子克隆 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 菌种与质粒 | 第19页 |
2.1.2 酶及试剂 | 第19页 |
2.1.3 培养基和储液的配制 | 第19-21页 |
2.1.4 仪器与设备 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-25页 |
2.2.1 盐泽螺旋藻的培养和基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.2 藻蓝蛋白合成的相关基因的克隆 | 第22-23页 |
2.2.3 重组表达质粒的构建 | 第23-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
2.3.1 盐泽螺旋藻基因组DNA的提取 | 第25页 |
2.3.2 目的基因的获得 | 第25-26页 |
2.3.3 表达质粒的构建 | 第26-27页 |
2.3.4 藻蓝蛋白生物合成相关基因的编码序列和氨基酸序列 | 第27-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第三章 盐泽螺旋藻藻蓝蛋白β亚基体内重组和胞外分泌 | 第31-40页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第31-32页 |
3.1.1 菌种与质粒 | 第31-32页 |
3.1.2 酶与试剂 | 第32页 |
3.1.3 培养基 | 第32页 |
3.1.4 仪器与设备 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-35页 |
3.2.1 表达载体的构建 | 第32页 |
3.2.2 体内重组 | 第32页 |
3.2.3 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第32-33页 |
3.2.4 光谱分析 | 第33页 |
3.2.5 SDS-PAGE电泳及锌电泳 | 第33-34页 |
3.2.6 胞外分泌表达载体的构建与体内重组及蛋白的表达和光谱分析 | 第34-35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-38页 |
3.3.1 质粒的构建 | 第35页 |
3.3.2 体内重组和诱导表达分析 | 第35-37页 |
3.3.3 胞外分泌表达载体的构建和表达产物的鉴定 | 第37-38页 |
3.4 小结 | 第38-40页 |
第四章 盐泽藻蓝蛋白β亚基脱辅基蛋白的抗氧化性活性 | 第40-46页 |
4.1 实验材料 | 第40页 |
4.1.1 质粒与菌株 | 第40页 |
4.1.2 试剂 | 第40页 |
4.1.3 培养基 | 第40页 |
4.1.4 仪器与设备 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-41页 |
4.2.1 蛋白表达与纯化 | 第40页 |
4.2.2 羟基自由基的清除 | 第40-41页 |
4.2.3 DPPH自由基的清除 | 第41页 |
4.2.4 数据分析 | 第41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-44页 |
4.3.1 序列分析 | 第41-43页 |
4.3.2 目的蛋白的表达与纯化 | 第43页 |
4.3.3 羟基自由基的清除 | 第43-44页 |
4.3.4 DPPH自由基的去除 | 第44页 |
4.5 小结 | 第44-46页 |
第五章 盐泽螺旋藻荧光藻蓝蛋白β亚基抗氧化性活性 | 第46-50页 |
5.1 实验材料 | 第46页 |
5.1.1 质粒与菌株 | 第46页 |
5.1.2 试剂 | 第46页 |
5.1.3 培养基 | 第46页 |
5.1.4 仪器与设备 | 第46页 |
5.2 实验方法 | 第46-47页 |
5.2.1 蛋白表达 | 第46-47页 |
5.2.2 羟基自由基的清除 | 第47页 |
5.2.3 DPPH自由基的清除 | 第47页 |
5.2.4 细胞氧化损伤抑制能力的测定 | 第47页 |
5.2.5 数据分析 | 第47页 |
5.3 结果与分析 | 第47-49页 |
5.3.1 羟基自由基的测定 | 第47-48页 |
5.3.2 DPPH自由基的测定 | 第48-49页 |
5.3.3 细胞氧化损伤抑制能力的测定 | 第49页 |
5.4 小结 | 第49-50页 |
第六章 总结与展望 | 第50-52页 |
6.1 总结 | 第50页 |
6.2 展望 | 第50-52页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |