| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 七鳃鳗——脊椎动物进化和免疫的模式动物 | 第12页 |
| 1.2 七鳃鳗重要免疫分子LIP简介 | 第12-15页 |
| 1.2.1 LIP分子的发现 | 第12-13页 |
| 1.2.2 LIP分子的基本结构 | 第13页 |
| 1.2.3 LIP分子对肿瘤的选择性杀伤 | 第13-15页 |
| 1.3 脂筏 | 第15-17页 |
| 1.3.1 脂筏的基本结构与功能 | 第15-16页 |
| 1.3.2 脂筏与癌症的相关研究 | 第16-17页 |
| 1.4 GPI锚定蛋白 | 第17-21页 |
| 1.4.1 GPI锚定蛋白的基本结构 | 第17-18页 |
| 1.4.2 GPI锚结构的解析 | 第18-20页 |
| 1.4.3 GPI锚定蛋白与气单胞溶菌素的结合 | 第20-21页 |
| 1.5 糖生物学和质谱的联用技术 | 第21-24页 |
| 1.5.1 糖芯片 | 第21页 |
| 1.5.2 糖组学 | 第21-22页 |
| 1.5.3 质谱法在糖研究中的应用 | 第22-24页 |
| 1.6 鞘磷脂和脂质组学 | 第24-28页 |
| 1.6.1 鞘磷脂 | 第24-26页 |
| 1.6.2 脂质组学 | 第26-28页 |
| 1.7 表面等离子共振技术 | 第28-30页 |
| 第2章 LIP与脂筏结合的相关研究 | 第30-42页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 2.2 实验方法与技术 | 第31-34页 |
| 2.2.1 LIP与细胞膜上脂筏的结合情况 | 第31页 |
| 2.2.2 LIP与脂筏重要组成成分GPI-APs的相关探究 | 第31-32页 |
| 2.2.3 溶液内酶切方法 | 第32页 |
| 2.2.4 质谱和色谱条件 | 第32-33页 |
| 2.2.5 Biacore参数设置 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-38页 |
| 2.3.1 LIP蛋白与癌细胞膜上脂筏相互结合 | 第34页 |
| 2.3.2 LIP与脂筏重要组成成分GPI-APs的相关探究 | 第34-37页 |
| 2.3.3 LIP与PI-PLC处理的MCF细胞分泌液的BIACORE垂钓实验 | 第37-38页 |
| 2.3.4 Biacore垂钓产物的质谱鉴定结果 | 第38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-42页 |
| 第3章 LIP蛋白与脂筏上糖分子的识别 | 第42-60页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第42-43页 |
| 3.1.1 实验相关材料 | 第42页 |
| 3.1.2 实验相关试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 3.2 实验方法与技术 | 第43-47页 |
| 3.2.1 糖芯片筛选与LIP蛋白结合的N糖链 | 第43页 |
| 3.2.2 Biacore检测LIP与糖链的相互作用 | 第43-44页 |
| 3.2.3 GPI锚的提取和解析 | 第44-46页 |
| 3.2.4 糖链分析的质谱方法学 | 第46-47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-56页 |
| 3.3.1 GPI锚结构的解析 | 第47-48页 |
| 3.3.2 糖芯片筛选与LIP蛋白结合的N糖链 | 第48-51页 |
| 3.3.3 Biacore检验LIP蛋白与N003G和N025G的结合能力 | 第51-52页 |
| 3.3.4 在肿瘤细胞脂筏上与LIP蛋白结合的Neu5Gc唾液酸分析 | 第52-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-60页 |
| 第4章 LIP蛋白与脂筏上脂分子的识别 | 第60-78页 |
| 4.1 实验材料和仪器 | 第60-61页 |
| 4.1.1 实验相关材料 | 第60页 |
| 4.1.2 实验相关试剂 | 第60-61页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第61页 |
| 4.2 实验方法与技术 | 第61-62页 |
| 4.2.1 LIP对清除MCF-7细胞表面胆固醇后的作用探究 | 第61页 |
| 4.2.2 鞘脂神经酰胺N-脱酰酶(SCDase)对LIP杀伤肿瘤细胞的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.3 色谱和质谱条件 | 第62页 |
| 4.3 实验结果 | 第62-75页 |
| 4.3.1 LIP与脂筏上成分垂钓的结果 | 第62-63页 |
| 4.3.2 LIP与脂筏组成成分胆固醇的相关研究 | 第63-65页 |
| 4.3.3 鞘脂神经酰胺N-脱酰酶对LIP杀伤肿瘤细胞的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.4 通过质谱法分析鞘磷脂和磷脂酰胆碱对LIP的结合能力 | 第66-74页 |
| 4.3.5 Biacore检测LIP与鞘磷脂的相互作用 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-78页 |
| 第5章 LIP蛋白与细胞表面鞘磷脂的选择性研究 | 第78-94页 |
| 5.1 实验材料和仪器 | 第78-79页 |
| 5.1.1 实验相关材料 | 第78页 |
| 5.1.2 实验相关试剂 | 第78-79页 |
| 5.1.3 实验相关仪器 | 第79页 |
| 5.2 实验方法与技术 | 第79-83页 |
| 5.2.1 不同种类的肿瘤细胞表面鞘磷脂含量的差异 | 第79-80页 |
| 5.2.2 不同种类肿瘤细胞中的鞘磷脂相关合成酶的表达量差异 | 第80页 |
| 5.2.3 Biacore检测LIP与鞘磷脂的相互作用 | 第80-81页 |
| 5.2.4 MCF-7细胞和白细胞脂筏上鞘磷脂组成的差异脂质组学分析 | 第81-83页 |
| 5.3 结果 | 第83-90页 |
| 5.3.1 鞘磷脂和LIP杀伤活力之间的关系 | 第83-84页 |
| 5.3.2 MCF-7细胞和白细胞脂筏上鞘磷脂组成的差异分析 | 第84-90页 |
| 5.4 讨论 | 第90-94页 |
| 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 附录 | 第104-127页 |
| 附录1 K562细胞非人数据库中含有Neu5GC的糖型 | 第104-115页 |
| 附录2 白细胞脂筏鞘磷脂的脂质组学结果 | 第115-127页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文 | 第127-128页 |
| 攻读博士学位期间参与项目 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
