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异甘草酸镁对CCl4诱导的肝损伤保护作用机制研究

中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
英文缩略词第14-16页
前言第16-19页
第一部分 :异甘草酸镁对大鼠肝损伤的肝保护作用机制研究第19-38页
    1 实验材料与仪器第19-21页
        1.1 实验材料第19-20页
            1.1.1 供试药物第19页
            1.1.2 主要试剂与耗材第19页
            1.1.3 实验对象第19-20页
            1.1.4 溶液的配制第20页
        1.2 实验仪器第20-21页
    2 实验方法第21-30页
        2.1 实验动物的处理第21-22页
            2.1.1 动物分组第21页
            2.1.2 肝损伤动物模型的建立第21页
            2.1.3 样本的收集第21-22页
        2.2 血清中生化指标的检测第22页
        2.3 肝组织病理组织形态学观察第22-23页
        2.4 肝组织中氧化应激指标的检测第23-24页
            2.4.1 肝组织前处理第23页
            2.4.2 肝组织中GSH含量检测第23页
            2.4.3 肝组织中MDA含量检测第23页
            2.4.4 肝组织中SOD活性检测第23-24页
        2.5 RT-PCR法检测异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织Nrf2、HO-1、UGT1A1mRNA表达的影响第24-26页
            2.5.1 肝组织总RNA的提取第24页
            2.5.2 cDNA的合成第24-25页
            2.5.3 RT-PCR第25-26页
        2.6 Westernbolt法检测异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1的蛋白表达水平的影响第26-30页
            2.6.1 肝组织蛋白的提取第26-28页
            2.6.2 蛋白浓度的测定第28页
            2.6.3 Westernbolt法检测蛋白表达水平第28-30页
        2.7 统计分析第30页
    3 实验结果第30-35页
        3.1 血清中生化指标的测定第30-31页
        3.2 肝组织病理形态学观察第31-32页
        3.3 对肝组织中抗氧化能力的影响第32-33页
        3.4 异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织中Nrf2、HO-1、UGT1A1mRNA表达水平的影响第33-34页
        3.5 异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织中Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1蛋白表达的影响第34-35页
    4 讨论第35-38页
第二部分 :异甘草酸镁对L02细胞损伤的保护作用机制研究第38-58页
    1 实验材料与仪器第38-40页
        1.1 实验材料第38-39页
            1.1.1 供试药物第38页
            1.1.2 主要试剂与耗材第38页
            1.1.3 实验对象第38页
            1.1.4 溶液的配制第38-39页
        1.2 实验仪器第39-40页
    2 实验方法第40-46页
        2.1 L02细胞的培养和传代第40页
        2.2 细胞的冻存与复苏第40-41页
        2.3 细胞计数第41页
        2.4 损伤细胞模型的建立第41页
        2.5 MTT法检测细胞生存率第41-42页
        2.6 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的形态学观察第42页
        2.7 异甘草酸镁对CCl4诱导的LDH漏出的影响第42页
        2.8 细胞内中氧化应激指标的检测第42-43页
            2.8.1 细胞内活性氧(ROS)含量的测定第42页
            2.8.2 细胞的前处理第42-43页
            2.8.3 细胞内GSH含量的测定第43页
            2.8.4 细胞内SOD活性的测定第43页
            2.8.5 细胞内MDA含量的测定第43页
        2.9 免疫荧光检测细胞内Nrf2核转位第43-44页
        2.10 荧光定量RT-PCR法检测异甘草酸镁对L02细胞损伤Nrf2、HO-1、UGT1A1mRNA表达水平的影响第44-45页
            2.10.1 细胞总RNA提取第44页
            2.10.2 cDNA的合成第44-45页
            2.10.3 RT-PCR第45页
        2.11 Westernbolt法检测异甘草酸镁对L02细胞损伤Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1蛋白表达水平的影响第45-46页
            2.11.1 细胞蛋白的提取第45-46页
            2.11.2 其他的详细步骤参照第一部分2.3。第46页
        2.12 统计分析第46页
    3 结果第46-56页
        3.1 损伤细胞模型的建立第46-47页
        3.2 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的存活率的影响第47-48页
        3.3 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的形态学观察第48-49页
        3.4 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的LDH漏出的影响第49-50页
        3.5 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的活性氧(ROS)含量的影响第50-51页
        3.6 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的抗氧化能力的影响第51-53页
        3.7 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞内核转位的影响第53-54页
        3.8 RT-PCR法检测异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞损伤Nrf2、HO-1、UGT1A1基因表达的影响第54-55页
        3.9 Westernbolt法检测异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞损伤Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1蛋白表达水平的影响第55-56页
    4 讨论第56-58页
全文总结第58-59页
参考文献第59-65页
综述第65-73页
    参考文献第70-73页
个人简介第73-74页
攻读学位期间发表的学术论文第74-75页
致谢第75页

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