中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
英文缩略词 | 第14-16页 |
前言 | 第16-19页 |
第一部分 :异甘草酸镁对大鼠肝损伤的肝保护作用机制研究 | 第19-38页 |
1 实验材料与仪器 | 第19-21页 |
1.1 实验材料 | 第19-20页 |
1.1.1 供试药物 | 第19页 |
1.1.2 主要试剂与耗材 | 第19页 |
1.1.3 实验对象 | 第19-20页 |
1.1.4 溶液的配制 | 第20页 |
1.2 实验仪器 | 第20-21页 |
2 实验方法 | 第21-30页 |
2.1 实验动物的处理 | 第21-22页 |
2.1.1 动物分组 | 第21页 |
2.1.2 肝损伤动物模型的建立 | 第21页 |
2.1.3 样本的收集 | 第21-22页 |
2.2 血清中生化指标的检测 | 第22页 |
2.3 肝组织病理组织形态学观察 | 第22-23页 |
2.4 肝组织中氧化应激指标的检测 | 第23-24页 |
2.4.1 肝组织前处理 | 第23页 |
2.4.2 肝组织中GSH含量检测 | 第23页 |
2.4.3 肝组织中MDA含量检测 | 第23页 |
2.4.4 肝组织中SOD活性检测 | 第23-24页 |
2.5 RT-PCR法检测异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织Nrf2、HO-1、UGT1A1mRNA表达的影响 | 第24-26页 |
2.5.1 肝组织总RNA的提取 | 第24页 |
2.5.2 cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.5.3 RT-PCR | 第25-26页 |
2.6 Westernbolt法检测异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1的蛋白表达水平的影响 | 第26-30页 |
2.6.1 肝组织蛋白的提取 | 第26-28页 |
2.6.2 蛋白浓度的测定 | 第28页 |
2.6.3 Westernbolt法检测蛋白表达水平 | 第28-30页 |
2.7 统计分析 | 第30页 |
3 实验结果 | 第30-35页 |
3.1 血清中生化指标的测定 | 第30-31页 |
3.2 肝组织病理形态学观察 | 第31-32页 |
3.3 对肝组织中抗氧化能力的影响 | 第32-33页 |
3.4 异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织中Nrf2、HO-1、UGT1A1mRNA表达水平的影响 | 第33-34页 |
3.5 异甘草酸镁对肝损伤大鼠肝组织中Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
第二部分 :异甘草酸镁对L02细胞损伤的保护作用机制研究 | 第38-58页 |
1 实验材料与仪器 | 第38-40页 |
1.1 实验材料 | 第38-39页 |
1.1.1 供试药物 | 第38页 |
1.1.2 主要试剂与耗材 | 第38页 |
1.1.3 实验对象 | 第38页 |
1.1.4 溶液的配制 | 第38-39页 |
1.2 实验仪器 | 第39-40页 |
2 实验方法 | 第40-46页 |
2.1 L02细胞的培养和传代 | 第40页 |
2.2 细胞的冻存与复苏 | 第40-41页 |
2.3 细胞计数 | 第41页 |
2.4 损伤细胞模型的建立 | 第41页 |
2.5 MTT法检测细胞生存率 | 第41-42页 |
2.6 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的形态学观察 | 第42页 |
2.7 异甘草酸镁对CCl4诱导的LDH漏出的影响 | 第42页 |
2.8 细胞内中氧化应激指标的检测 | 第42-43页 |
2.8.1 细胞内活性氧(ROS)含量的测定 | 第42页 |
2.8.2 细胞的前处理 | 第42-43页 |
2.8.3 细胞内GSH含量的测定 | 第43页 |
2.8.4 细胞内SOD活性的测定 | 第43页 |
2.8.5 细胞内MDA含量的测定 | 第43页 |
2.9 免疫荧光检测细胞内Nrf2核转位 | 第43-44页 |
2.10 荧光定量RT-PCR法检测异甘草酸镁对L02细胞损伤Nrf2、HO-1、UGT1A1mRNA表达水平的影响 | 第44-45页 |
2.10.1 细胞总RNA提取 | 第44页 |
2.10.2 cDNA的合成 | 第44-45页 |
2.10.3 RT-PCR | 第45页 |
2.11 Westernbolt法检测异甘草酸镁对L02细胞损伤Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1蛋白表达水平的影响 | 第45-46页 |
2.11.1 细胞蛋白的提取 | 第45-46页 |
2.11.2 其他的详细步骤参照第一部分2.3。 | 第46页 |
2.12 统计分析 | 第46页 |
3 结果 | 第46-56页 |
3.1 损伤细胞模型的建立 | 第46-47页 |
3.2 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的存活率的影响 | 第47-48页 |
3.3 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的形态学观察 | 第48-49页 |
3.4 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的LDH漏出的影响 | 第49-50页 |
3.5 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的活性氧(ROS)含量的影响 | 第50-51页 |
3.6 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞的抗氧化能力的影响 | 第51-53页 |
3.7 异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞内核转位的影响 | 第53-54页 |
3.8 RT-PCR法检测异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞损伤Nrf2、HO-1、UGT1A1基因表达的影响 | 第54-55页 |
3.9 Westernbolt法检测异甘草酸镁对CCl4诱导的L02细胞损伤Nrf2核蛋白、HO-1、UGT1A1蛋白表达水平的影响 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
全文总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-73页 |
参考文献 | 第70-73页 |
个人简介 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |