| 第一部分 摘要 | 第6-7页 |
| PART Ⅰ ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第二部分 摘要 | 第9-11页 |
| PART Ⅱ ABSTRACT | 第11-17页 |
| 缩略词 | 第17-19页 |
| 第一部分 升麻化合物KY17的抗肿瘤作用机制研究 | 第19-71页 |
| 第一章 绪论 | 第19-29页 |
| 1.1 结直肠癌的研究现状 | 第19页 |
| 1.2 升麻中提取产物的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3 p53基因与肿瘤治疗 | 第21页 |
| 1.4 细胞凋亡与肿瘤治疗 | 第21-23页 |
| 1.5 细胞自噬 | 第23-25页 |
| 1.6 细胞自噬与肿瘤生长 | 第25-26页 |
| 1.7 细胞自噬与细胞凋亡的联系 | 第26页 |
| 1.8 细胞周期抑制与肿瘤治疗 | 第26-27页 |
| 1.9 研究的主要目的、内容与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第29-34页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.2 试剂配制 | 第29-33页 |
| 2.1.3 细胞培养条件 | 第33-34页 |
| 2.1.4 抗体 | 第34页 |
| 2.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-48页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第35-37页 |
| 2.2.2 MTT法检测细胞增殖 | 第37-38页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹技术(Westem blotting) | 第38-41页 |
| 2.2.4 Annexin V/PI双染检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
| 2.2.5 吖啶橙染色检测自噬 | 第42-43页 |
| 2.2.6 GFP-LC3示踪法检测细胞自噬 | 第43-44页 |
| 2.2.7 流式细胞仪测定细胞周期 | 第44-45页 |
| 2.2.8 细胞活性氧检测 | 第45页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR | 第45-48页 |
| 第三章 实验结果 | 第48-67页 |
| 3.1 升麻中提取的化合物单体KY17对肿瘤细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 升麻类化合物KY17对结肠癌细胞周期的影响 | 第49-52页 |
| 3.3 升麻类化合物诱导KY17对结肠癌细胞的凋亡 | 第52-57页 |
| 3.4 升麻类化合物KY17诱导结肠癌细胞自噬 | 第57-61页 |
| 3.5 升麻类化合物KY17诱导HT-29细胞自噬与凋亡的关系 | 第61-64页 |
| 3.6 升麻类化合物KY17对结肠癌细胞活性氧的影响 | 第64-65页 |
| 3.7 升麻类化合物KY17对衰老相关因子的调节情况 | 第65-67页 |
| 第四章 实验结论 | 第67-68页 |
| 第五章 讨论 | 第68-70页 |
| 第六章 总结与展望 | 第70-71页 |
| 第二部分 替莫唑胺衍生物与DNA加合的研究 | 第71-126页 |
| 第一章 绪论 | 第71-82页 |
| 1.1 胶质瘤的研究现状 | 第71页 |
| 1.2 烷化剂与肿瘤治疗 | 第71-72页 |
| 1.3 替莫唑胺特点及作用机理 | 第72-74页 |
| 1.4 DNA修复系统与替莫唑胺的耐药机制 | 第74-77页 |
| 1.4.1 MGMT与替莫唑胺耐药的关系 | 第74-76页 |
| 1.4.2 其他DNA修复系统与替莫唑胺耐药的关系 | 第76-77页 |
| 1.4.3 替莫唑胺耐药解决策略 | 第77页 |
| 1.5 烷化剂与DNA加合物的检测方法 | 第77-80页 |
| 1.5.1 ~(32)p-后标记法 | 第78页 |
| 1.5.2 免疫检测法 | 第78页 |
| 1.5.3 荧光测定法 | 第78-79页 |
| 1.5.4 高效液相与质谱联用(HPLC-MS) | 第79页 |
| 1.5.5 超高效液相-四级杆/时间飞行质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS) | 第79-80页 |
| 1.6 研究的目的、内容与意义 | 第80-82页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第82-92页 |
| 2.1 实验材料 | 第82-84页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第82页 |
| 2.1.2 试剂配制 | 第82-84页 |
| 2.2 仪器设备 | 第84-85页 |
| 2.3 实验方法 | 第85-92页 |
| 2.3.1 TMZ和377稳定性检测 | 第85-86页 |
| 2.3.2 TMZ和377加合物检测 | 第86-88页 |
| 2.3.3 TMZ和377加合反应条件优化 | 第88-89页 |
| 2.3.4 TMZ和377加合反应样品处理条件优化 | 第89-92页 |
| 第三章 实验结果 | 第92-122页 |
| 3.1 TMZ、377、ctDNA的最大吸收波长检测 | 第92-94页 |
| 3.2 TMZ的水解产物鉴别 | 第94-99页 |
| 3.2.1 HPLC检测TMZ的水解产物 | 第94页 |
| 3.2.2 UPLC-Q-TOF/MS鉴别TMZ的水解产物 | 第94-98页 |
| 3.2.3 TMZ的水解机制的验证 | 第98-99页 |
| 3.3 小牛胸腺DNA (ctDNA)碱基的鉴别 | 第99-105页 |
| 3.4 TMZ与ctDNA的烷化产物 | 第105-106页 |
| 3.5 化合物377的水解产物鉴别 | 第106-110页 |
| 3.5.1 HPLC检测化合物377的水解产物 | 第106页 |
| 3.5.2 UPLC-Q-TOF/MS鉴别化合物377的水解产物 | 第106-110页 |
| 3.5.3 377水解作用机制推测 | 第110页 |
| 3.6 化合物377与ctDNA的烷化产物 | 第110-119页 |
| 3.6.1 HPLC检测377与ctDNA的烷化产物 | 第110-111页 |
| 3.6.2 UPLC-MS/Q-TOF检测377与ctDNA的烷化产物 | 第111-119页 |
| 3.7 HPLC检测TMZ和377的稳定性 | 第119-122页 |
| 3.7.1 TMZ的稳定性 | 第119-120页 |
| 3.7.2 化合物377的稳定性 | 第120-122页 |
| 第四章 结论 | 第122-123页 |
| 第五章 讨论 | 第123-125页 |
| 第六章 总结与展望 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-129页 |
| 参考文献 | 第129-141页 |
| 附录一 | 第141页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第141页 |
