| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 研究背景 | 第11-15页 |
| 1.1 PHK家族基因 | 第11-13页 |
| 1.2 PHKG1基因 | 第13-14页 |
| 1.3 PHKG2基因 | 第14-15页 |
| 2 糖原对猪肉品质影响的概述 | 第15-18页 |
| 2.1 糖原代谢过程 | 第15-16页 |
| 2.2 糖原代谢与猪肉质性状的关系 | 第16-18页 |
| 3 RNAi技术 | 第18-19页 |
| 4 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PHKG1、PHKG2基因在从江香猪不同组织中的表达规律 | 第20-31页 |
| 1 试验材料 | 第20-22页 |
| 1.1 试验材料与样品 | 第20页 |
| 1.2 试验主要试剂 | 第20页 |
| 1.3 试验仪器设备 | 第20页 |
| 1.4 常用试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2 试验方法 | 第22-25页 |
| 2.1 引物的设计 | 第22-23页 |
| 2.2 总RNA提取 | 第23页 |
| 2.3 cDNA合成 | 第23-24页 |
| 2.4 PCR检测 | 第24-25页 |
| 2.5 qRT-PCR检测 | 第25页 |
| 2.6 数据分析 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-29页 |
| 3.1 样品总RNA的质量检测 | 第25-26页 |
| 3.2 PCR检测 | 第26页 |
| 3.3 qRT-PCR 结果分析 | 第26-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 PHKG1、PHKG2基因克隆及生物信息学分析 | 第31-41页 |
| 1 试验材料 | 第31-32页 |
| 1.1 试验样品、菌种和载体 | 第31页 |
| 1.2 试验仪器设备 | 第31页 |
| 1.3 试验试剂 | 第31页 |
| 1.4 常用试剂的配制 | 第31-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-34页 |
| 2.1 PHKG1和PHKG2基因克隆 | 第32-33页 |
| 2.2 PHKG1和PHKG2基因TA克隆 | 第33-34页 |
| 2.3 PHKG1和PHKG2基因生物信息学分析 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.1 PHKG1和PHKG2基因克隆 | 第34-35页 |
| 3.2 PHKG1和PHKG2基因序列分析 | 第35-36页 |
| 3.3 PHKG1和PHKG2基因生物信息学分析 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 PHKG1、PHKG2基因超表达载体构建 | 第41-56页 |
| 1 试验材料 | 第41页 |
| 1.1 试验样品、菌种和载体 | 第41页 |
| 1.2 试验仪器设备 | 第41页 |
| 1.3 试验试剂 | 第41页 |
| 1.4 常用试剂的配制 | 第41页 |
| 2 试验方法 | 第41-48页 |
| 2.1 PHKG1和PHKG2基因克隆 | 第41-42页 |
| 2.2 pUCm-T-PHKG1、pUCm-T-PHKG2构建 | 第42-43页 |
| 2.3 pEGFP-N3-PHKG1、pEGFP-N3-PHKG2构建 | 第43-44页 |
| 2.4 PHKG1基因RNAi载体构建 | 第44-45页 |
| 2.5 PHKG2基因RNAi载体构建 | 第45-48页 |
| 2.6 菌液保存 | 第48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-54页 |
| 3.1 PHKG1和PHKG2基因克隆 | 第48-49页 |
| 3.2 PHKG1和PHKG2基因TA克隆鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3 pEGFP-N3-PHKG1、pEGFP-N3-PHKG2双酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 pLVX-ShRNA2-puro-sPHKG1质粒酶切鉴定 | 第51-52页 |
| 3.5 pLVX-ShRNA2-puro-sPHKG1质粒测序鉴定 | 第52-53页 |
| 3.6 ShRNA载体pGPU6/GFP/Neo-ShRNA质粒酶切鉴定 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 5 小结 | 第55-56页 |
| 第五章 从江香猪原代细胞培养及相关基因表达 | 第56-72页 |
| 1 试验材料 | 第56-57页 |
| 1.1 试验动物 | 第56页 |
| 1.2 试验仪器设备 | 第56页 |
| 1.3 试验主要试剂 | 第56-57页 |
| 2 试验方法 | 第57-61页 |
| 2.1 重组载体转染至C2C12细胞 | 第57-58页 |
| 2.2 原代细胞培养 | 第58页 |
| 2.3 传代培养 | 第58页 |
| 2.4 转染实验 | 第58-59页 |
| 2.5 糖原代谢相关基因的表达 | 第59-60页 |
| 2.6 糖原含量的测定 | 第60-61页 |
| 2.7 细胞冻存 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-69页 |
| 3.1 C2C12细胞转染情况 | 第61-62页 |
| 3.2 肾细胞形态观察 | 第62-63页 |
| 3.3 瞬时转染情况 | 第63-64页 |
| 3.4 各重组载体在C2C12细胞中qRT-PCR检测mRNA表达量 | 第64-66页 |
| 3.5 糖原相关基因的表达量 | 第66-68页 |
| 3.6 细胞中糖原含量测定 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 5 小结 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与展望 | 第72-73页 |
| 1 结论 | 第72页 |
| 2 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
