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CtBP1介导肝癌细胞HepG2低氧条件下的迁移

中文摘要第6-9页
ABSTRACT第9-12页
英汉缩略词对照表第13-14页
前言第14-17页
1 材料与方法第17-44页
    1.1 实验材料第17-26页
        1.1.1 细胞株第17页
        1.1.2 主要实验试剂及耗材第17-20页
            1.1.2.1 细胞培养试剂第17-18页
            1.1.2.2 细胞转染试剂第18页
            1.1.2.3 分子生物学实验试剂第18-20页
            1.1.2.4 其他普通试剂及耗材第20页
        1.1.3 所需主要实验试剂的配制第20-24页
        1.1.4 主要实验仪器第24-26页
    1.2 实验方法第26-44页
        1.2.1 细胞培养第26-30页
            1.2.1.1 人肝癌细胞的复苏第26-27页
            1.2.1.2 人肝癌细胞的换液第27页
            1.2.1.3 人肝癌细胞的传代第27-28页
            1.2.1.4 人肝癌细胞的计数和接种第28-29页
            1.2.1.5 人肝癌细胞的冻存第29-30页
        1.2.2 建立细胞低氧模型第30页
        1.2.3 人肝癌细胞株HepG2的CtBP1 siRNA(h)转染第30-36页
            1.2.3.1 最佳干扰浓度的筛选第31-33页
            1.2.3.2 人肝癌细胞株HepG2的CtBP1 siRNA(h)转染和低氧实验第33-36页
        1.2.4 Western blot法测低氧条件下转染后HepG2细胞CtBP1和E-cadherin的表达第36-41页
            1.2.4.1 HepG2细胞总蛋白的提取第36页
            1.2.4.2 BCA蛋白浓度的测定第36-37页
            1.2.4.3 样品蛋白上样体系的配制第37页
            1.2.4.4 SDS-PAGE凝胶的配制第37-38页
            1.2.4.5 SDS-PAGE凝胶电泳第38-39页
            1.2.4.6 蛋白质的湿转法转模第39-40页
            1.2.4.7 蛋白质的免疫反应第40页
            1.2.4.8 蛋白质的检测第40-41页
        1.2.5 细胞划痕实验检测低氧条件下转染后HepG2细胞的迁移运动能力第41-42页
        1.2.6 细胞免疫荧光染色检测低氧条件下转染后HepG2细胞的形态化第42-44页
        1.2.7 统计学方法第44页
2 结果第44-54页
    2.1 CtBP1在肝癌细胞中的表达第44-46页
    2.2 低氧条件下HepG2细胞的迁移运动能力逐渐增强且细胞形态从上皮样多边形转变为间质样梭形第46-48页
    2.3 低氧作用于HepG2细胞使CtBP1表达上调而其靶蛋白上皮黏附分子E-cadherin表达下调第48-49页
    2.4 当CtBP1 siRNAs(h)浓度为0.06pmol/μl时干扰效率最高第49-51页
    2.5 敲低CtBP1抑制了低氧对HepG2细胞迁移运动能力的促进作用且抑制了低氧条件下间质样细胞形态的改变第51-53页
    2.6 敲低CtBP1基因部分挽救了低氧对E-cadherin表达的抑制作用第53-54页
3 讨论第54-57页
4 结论第57-58页
参考文献第58-61页
综述第61-75页
    参考文献第67-75页
攻读学位期间发表的学术论文目录第75-76页
致谢第76-77页

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