摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
常用符号及缩略语说明 | 第10-12页 |
第一章 绪论 | 第12-22页 |
1.1 氧化应激 | 第12页 |
1.2 衰老与神经退行性疾病 | 第12-13页 |
1.3 抗氧化系统 | 第13-14页 |
1.3.1 抗氧化酶系 | 第13页 |
1.3.2 非酶抗氧化剂 | 第13-14页 |
1.4 细胞凋亡 | 第14页 |
1.5 细胞凋亡方式 | 第14-16页 |
1.5.1. 线粒体介导的细胞凋亡 | 第14-15页 |
1.5.2 ROS介导的细胞凋亡 | 第15页 |
1.5.3 内质网介导的细胞凋亡 | 第15-16页 |
1.5.4 钙离子超载介导的细胞凋亡 | 第16页 |
1.6 细胞凋亡与NRF2-ARE通路 | 第16-18页 |
1.6.1 Nrf2的结构 | 第16页 |
1.6.2 Keap1的结构 | 第16-17页 |
1.6.3 ARE的结构 | 第17页 |
1.6.4 Keap1-Nrf2/ARE信号通路调控的下游靶蛋白 | 第17-18页 |
1.6.5 Nrf2-ARE的激活 | 第18页 |
1.7 留体化合物分类与抗氧化活性研究 | 第18-20页 |
1.7.1 植物甾醇 | 第18-19页 |
1.7.2 C_(21)甾体 | 第19页 |
1.7.3 甾体皂苷 | 第19-20页 |
1.7.4 强心苷 | 第20页 |
1.8 姜黄属植物研究概况 | 第20-21页 |
1.9 本课题的立题依据和研究路线 | 第21-22页 |
第二章 实验仪器、材料与实验方法的建立 | 第22-31页 |
2.1 实验仪器 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22页 |
2.3. 实验试剂 | 第22-23页 |
2.4. 实验试剂的配制 | 第23-25页 |
2.5 实验方法 | 第25-29页 |
2.5.1 MTT法检测H_2O_2对PC12细胞损伤作用 | 第25-26页 |
2.5.2 实验分组 | 第26-27页 |
2.5.3. 细胞培养 | 第27-28页 |
2.5.4 具体实验步骤: | 第28-29页 |
2.6 统计学分析 | 第29页 |
2.7 实验结果 | 第29-30页 |
2.7.1 H_2O_2对PC12细胞存活率的影响 | 第29-30页 |
2.8 结论与讨论 | 第30-31页 |
第三章 西藏牛皮消提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制探究 | 第31-64页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 主要仪器 | 第31-32页 |
3.3 实验材料 | 第32-38页 |
3.4 实验试剂 | 第38页 |
3.5 样本化合物及溶液配制 | 第38-39页 |
3.6 实验分组 | 第39页 |
3.6.1 受试样品对正常PC12细胞存活率影响实验分组 | 第39页 |
3.6.2 受试样品对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制研究实验分组 | 第39页 |
3.7 实验方法 | 第39-45页 |
3.7.1 MTT法检测细胞存活率 | 第39页 |
3.7.2 荧光酶标仪检测细胞内ROS含量 | 第39-40页 |
3.7.3 细胞培养液中LDH活性检测 | 第40页 |
3.7.4 SOD活性的检测 | 第40-41页 |
3.7.5 过氧化氢酶( CAT)活性的检测 | 第41页 |
3.7.6 谷胱甘肽过氧化物酶活性测定(GSH-Px) | 第41-42页 |
3.7.7 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第42页 |
3.7.8 荧光酶标仪检测细胞内钙离子浓度(Ca~(2+)) | 第42-43页 |
3.7.9 Western blot检测Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达 | 第43-45页 |
3.8 统计学分析 | 第45页 |
3.9 实验结果 | 第45-55页 |
3.9.1 西藏牛皮消提取化合物对正常PC12细胞存活率的影响 | 第45-46页 |
3.9.2 西藏牛皮消提取化合物对H_2O_2诱导PC12细胞存活率的影响 | 第46-48页 |
3.9.3 细胞培养基中LDH变化 | 第48-49页 |
3.9.4 细胞胞浆SOD抗氧化酶活性测定 | 第49-50页 |
3.9.5 CAT的变化 | 第50-52页 |
3.9.6 GSH-Px的变化 | 第52-53页 |
3.9.7 细胞胞浆活性氧ROS测定 | 第53-54页 |
3.9.8 药物处理后PC12细胞细胞内钙离子检测结果 | 第54-55页 |
3.10 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的PC12存活率及其他指标的检测 | 第55-62页 |
3.10.1 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的PC12存活率变化 | 第55-57页 |
3.10.2 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的ROS水平检测 | 第57页 |
3.10.3 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的4种抗氧化酶的检测 | 第57-58页 |
3.10.4 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的Ca~(2+)浓度变化 | 第58-59页 |
3.10.5 化合物Q8、Q17处理后PC12细胞凋亡率的变化 | 第59-61页 |
3.10.6 化合物Q8、Q17对PC12细胞Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
3.11 结论 | 第62-64页 |
第四章 郁金提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制探究 | 第64-86页 |
4.1 引言 | 第64页 |
4.2 实验材料及试剂 | 第64-70页 |
4.3 郁金不同提取物的制备 | 第70页 |
4.4 实验分组 | 第70页 |
4.5 实验方法 | 第70-71页 |
4.5.1 MTT法检测细胞存活率 | 第70-71页 |
4.5.2 荧光酶标仪检测细胞内ROS含量 | 第71页 |
4.5.3 细胞培养基中LDH,SOD,CAT活性及GSH含量测定 | 第71页 |
4.5.4 荧光酶标仪检测细胞内钙离子浓度(Ca~(2+)) | 第71页 |
4.5.5 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第71页 |
4.6 统计学分析 | 第71页 |
4.7 实验结果 | 第71-84页 |
4.7.1 郁金提取物对正常PC12细胞存活率的影响 | 第71-72页 |
4.7.2 郁金提取物对H_2O_2诱导PC12细胞存活率的影响 | 第72-74页 |
4.7.3 药物处理后H_2O_2诱导PC12细胞相应生化指标的变化 | 第74-84页 |
4.8 结论 | 第84页 |
4.9 讨论 | 第84-86页 |
第五章 结论与展望 | 第86-88页 |
5.1 结语 | 第86页 |
5.2 展望 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第99-101页 |