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基于PC12细胞损伤模型筛选抗氧化天然药物

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
常用符号及缩略语说明第10-12页
第一章 绪论第12-22页
    1.1 氧化应激第12页
    1.2 衰老与神经退行性疾病第12-13页
    1.3 抗氧化系统第13-14页
        1.3.1 抗氧化酶系第13页
        1.3.2 非酶抗氧化剂第13-14页
    1.4 细胞凋亡第14页
    1.5 细胞凋亡方式第14-16页
        1.5.1. 线粒体介导的细胞凋亡第14-15页
        1.5.2 ROS介导的细胞凋亡第15页
        1.5.3 内质网介导的细胞凋亡第15-16页
        1.5.4 钙离子超载介导的细胞凋亡第16页
    1.6 细胞凋亡与NRF2-ARE通路第16-18页
        1.6.1 Nrf2的结构第16页
        1.6.2 Keap1的结构第16-17页
        1.6.3 ARE的结构第17页
        1.6.4 Keap1-Nrf2/ARE信号通路调控的下游靶蛋白第17-18页
        1.6.5 Nrf2-ARE的激活第18页
    1.7 留体化合物分类与抗氧化活性研究第18-20页
        1.7.1 植物甾醇第18-19页
        1.7.2 C_(21)甾体第19页
        1.7.3 甾体皂苷第19-20页
        1.7.4 强心苷第20页
    1.8 姜黄属植物研究概况第20-21页
    1.9 本课题的立题依据和研究路线第21-22页
第二章 实验仪器、材料与实验方法的建立第22-31页
    2.1 实验仪器第22页
    2.2 实验材料第22页
    2.3. 实验试剂第22-23页
    2.4. 实验试剂的配制第23-25页
    2.5 实验方法第25-29页
        2.5.1 MTT法检测H_2O_2对PC12细胞损伤作用第25-26页
        2.5.2 实验分组第26-27页
        2.5.3. 细胞培养第27-28页
        2.5.4 具体实验步骤:第28-29页
    2.6 统计学分析第29页
    2.7 实验结果第29-30页
        2.7.1 H_2O_2对PC12细胞存活率的影响第29-30页
    2.8 结论与讨论第30-31页
第三章 西藏牛皮消提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制探究第31-64页
    3.1 引言第31页
    3.2 主要仪器第31-32页
    3.3 实验材料第32-38页
    3.4 实验试剂第38页
    3.5 样本化合物及溶液配制第38-39页
    3.6 实验分组第39页
        3.6.1 受试样品对正常PC12细胞存活率影响实验分组第39页
        3.6.2 受试样品对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制研究实验分组第39页
    3.7 实验方法第39-45页
        3.7.1 MTT法检测细胞存活率第39页
        3.7.2 荧光酶标仪检测细胞内ROS含量第39-40页
        3.7.3 细胞培养液中LDH活性检测第40页
        3.7.4 SOD活性的检测第40-41页
        3.7.5 过氧化氢酶( CAT)活性的检测第41页
        3.7.6 谷胱甘肽过氧化物酶活性测定(GSH-Px)第41-42页
        3.7.7 流式细胞仪检测细胞凋亡率第42页
        3.7.8 荧光酶标仪检测细胞内钙离子浓度(Ca~(2+))第42-43页
        3.7.9 Western blot检测Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达第43-45页
    3.8 统计学分析第45页
    3.9 实验结果第45-55页
        3.9.1 西藏牛皮消提取化合物对正常PC12细胞存活率的影响第45-46页
        3.9.2 西藏牛皮消提取化合物对H_2O_2诱导PC12细胞存活率的影响第46-48页
        3.9.3 细胞培养基中LDH变化第48-49页
        3.9.4 细胞胞浆SOD抗氧化酶活性测定第49-50页
        3.9.5 CAT的变化第50-52页
        3.9.6 GSH-Px的变化第52-53页
        3.9.7 细胞胞浆活性氧ROS测定第53-54页
        3.9.8 药物处理后PC12细胞细胞内钙离子检测结果第54-55页
    3.10 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的PC12存活率及其他指标的检测第55-62页
        3.10.1 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的PC12存活率变化第55-57页
        3.10.2 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的ROS水平检测第57页
        3.10.3 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的4种抗氧化酶的检测第57-58页
        3.10.4 化合物Q8、Q17对H_2O_2损伤后的Ca~(2+)浓度变化第58-59页
        3.10.5 化合物Q8、Q17处理后PC12细胞凋亡率的变化第59-61页
        3.10.6 化合物Q8、Q17对PC12细胞Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达的影响第61-62页
    3.11 结论第62-64页
第四章 郁金提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制探究第64-86页
    4.1 引言第64页
    4.2 实验材料及试剂第64-70页
    4.3 郁金不同提取物的制备第70页
    4.4 实验分组第70页
    4.5 实验方法第70-71页
        4.5.1 MTT法检测细胞存活率第70-71页
        4.5.2 荧光酶标仪检测细胞内ROS含量第71页
        4.5.3 细胞培养基中LDH,SOD,CAT活性及GSH含量测定第71页
        4.5.4 荧光酶标仪检测细胞内钙离子浓度(Ca~(2+))第71页
        4.5.5 流式细胞仪检测细胞凋亡率第71页
    4.6 统计学分析第71页
    4.7 实验结果第71-84页
        4.7.1 郁金提取物对正常PC12细胞存活率的影响第71-72页
        4.7.2 郁金提取物对H_2O_2诱导PC12细胞存活率的影响第72-74页
        4.7.3 药物处理后H_2O_2诱导PC12细胞相应生化指标的变化第74-84页
    4.8 结论第84页
    4.9 讨论第84-86页
第五章 结论与展望第86-88页
    5.1 结语第86页
    5.2 展望第86-88页
致谢第88-89页
参考文献第89-99页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第99-101页

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