缩略语表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-21页 |
1 自噬在心脏中的研究进展 | 第15-19页 |
1.1 自噬的概述 | 第15页 |
1.2 自噬在心脏调控中具有重要作用 | 第15-19页 |
1.3 小结 | 第19页 |
2 CREG概述及在心血管方面的最新研究进展 | 第19-21页 |
2.1 CREG的简介 | 第19-20页 |
2.2 CREG在心血管方面的研究进展 | 第20页 |
2.3 小结 | 第20-21页 |
实验一 MIR时CREG蛋白的表达变化及与凋亡、自噬的相关性研究 | 第21-30页 |
1 材料 | 第21-24页 |
1.1 实验动物 | 第21页 |
1.2 主要仪器和设备 | 第21-22页 |
1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
1.4 试剂配制 | 第23-24页 |
2 方法 | 第24-26页 |
2.1 建立小鼠MIR模型[93] | 第24页 |
2.2 IR后心肌的凋亡检测 | 第24-25页 |
2.3 免疫荧光染色 | 第25页 |
2.4 应用小动物超声检测心功能[94] | 第25页 |
2.5 TTC染色[95] | 第25页 |
2.6 统计学分析 | 第25-26页 |
3 结果 | 第26-29页 |
3.1 MIR后CREG蛋白表达下降 | 第26-27页 |
3.2 CREG蛋白表达调控MIR引起的心功能损伤 | 第27页 |
3.3 MIR后心肌凋亡情况 | 第27-28页 |
3.4 MIR后心肌自噬的表达情况 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
实验二 MIR时CREG对凋亡和自噬的调控作用研究 | 第30-36页 |
1 材料 | 第30-32页 |
1.1 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
1.2 主要试剂 | 第31页 |
1.3 试剂配制 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32页 |
2.1 同时给予外源重组CREG蛋白和CQ | 第32页 |
2.2 TUNEL染色、免疫荧光染色、western blot方法同试验一 | 第32页 |
2.3 统计学分析 | 第32页 |
3 结果 | 第32-34页 |
3.1 同时给予外源性重组CREG蛋白和CQ后,缺血再灌注心肌组织中自噬蛋白的表达 | 第32-33页 |
3.2 同时给予re CREG蛋白和CQ后,IR心肌组织中凋亡的检测 | 第33-34页 |
3.3 抑制自噬后,检测MIR28 d的心功能 | 第34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
实验三 CREG调控自噬对抗凋亡的细胞学机制研究 | 第36-47页 |
1 材料 | 第36-37页 |
1.1 主要仪器和设备 | 第36页 |
1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
1.3 试剂配制 | 第37页 |
2 方法 | 第37-39页 |
2.1 在H9C2心肌细胞系上建立CREG过表达模型[98] | 第37-38页 |
2.2 在H9C2心肌细胞系上建立CREG低表达的模型[98] | 第38页 |
2.3 处理不同的细胞模型[98] | 第38页 |
2.4 TUNEL染色 | 第38页 |
2.5 Western blot检测方法 | 第38页 |
2.6 免疫荧光染色 | 第38-39页 |
2.7 免疫共沉淀(Immunoprecipitation, IP) | 第39页 |
2.8 统计学分析 | 第39页 |
3 结果 | 第39-44页 |
3.1 在H9C2心肌细胞上成功建立CREG低表达和过表达模型 | 第39-40页 |
3.2 CREG低表达时凋亡和自噬的表达情况 | 第40-41页 |
3.3 CREG高表达时凋亡和自噬的表达情况 | 第41-42页 |
3.4 观察心肌细胞中自噬体和溶酶体的表达 | 第42-43页 |
3.5 CREG与IGF2R的相互作用 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-58页 |
个人简历和研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |