| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| 第一节 课题背景和研究意义 | 第11-12页 |
| 1.1 表型药物筛选技术在药物研发领域中的应用及存在的困难 | 第11页 |
| 1.2 活性导向的蛋白谱分析(ABPP)的广泛应用 | 第11-12页 |
| 1.3 光亲和分子探针标记技术概述 | 第12页 |
| 第二节 国内外研究现状及发展动态 | 第12-19页 |
| 2.1 表型药物筛选与活性导向的蛋白谱分析(ABPP)相结合的研究思路 | 第12-13页 |
| 2.2 两步的活性导向的蛋白谱分析(ABPP)的发展 | 第13-14页 |
| 2.3 高效、专一的生物正交反应被应用到ABPP技术中 | 第14-15页 |
| 2.4 光亲和标记方法(PAL)是ABPP技术的重要发展方向 | 第15-17页 |
| 2.5 发展四氮唑基团作为新一代光亲和基团应用于光亲和标记(PAL) | 第17-19页 |
| 第三节 本章小结 | 第19-20页 |
| 第二章 四氮唑分子探针在活性导向的蛋白谱分析中的应用 | 第20-43页 |
| 第一节 四氮唑基团用于光亲和基团的研究 | 第20-30页 |
| 1.1 四氮唑基团作为光亲和基团的发现 | 第20-21页 |
| 1.2 2,5-双苯基取代的四氮唑基团具有更好的光亲和标记效率 | 第21-29页 |
| 1.3 小结 | 第29-30页 |
| 第二节 2,5-双取代四氮唑光亲和分子探针库的构建 | 第30-32页 |
| 2.1 2,5-双取代四氮唑光亲和分子探针的设计 | 第30-31页 |
| 2.2 2,5-双取代四氮唑光亲和分子探针库的合成思路 | 第31-32页 |
| 第三节 2,5-取代四氮唑光亲和分子探针库的生物活性测试 | 第32-35页 |
| 3.1 2,5-双取代四氮唑光亲和分子探针库在肿瘤细胞的筛选 | 第32-34页 |
| 3.2 2,5-双取代四氮唑光亲和分子探针对肿瘤细胞的IC_(50)测定 | 第34-35页 |
| 第四节 四氮唑亲和探针在体内作用靶点的研究 | 第35-42页 |
| 4.1 四氮唑光亲和探针的体内体外标记实验 | 第35-38页 |
| 4.2 四氮唑光亲和探针Tz6,Tz10的体内竞争标记和活细胞成像实验 | 第38-39页 |
| 4.3 生物质谱分析确定四氮唑光亲和探针Tz6,Tz10的体内作用靶点 | 第39-41页 |
| 4.4 亲和层析-蛋白免疫印迹验证探针Tz6,Tz10的体内作用靶点 | 第41-42页 |
| 第五节 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 四氮唑探针应用于检测一种肿瘤生物标志物的研究 | 第43-50页 |
| 第一节 膜联蛋白Ⅱ是一种肿瘤生物标志物 | 第43-44页 |
| 第二节 Tz6探针专一性标记膜联蛋白Ⅱ的实验 | 第44-45页 |
| 2.1 Tz6探针在不同作用条件下的体内专一性标记实验 | 第44-45页 |
| 2.2 Tz6探针标记重组人膜联蛋白Ⅱ的实验 | 第45页 |
| 第三节 Tz6探针免疫荧光共定位实验 | 第45-46页 |
| 第四节 Tz6探针与膜联蛋白Ⅱ结合位点的研究 | 第46-49页 |
| 第五节 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 实验部分 | 第50-73页 |
| 第一节 仪器及试剂 | 第50-51页 |
| 1.1 普通试剂 | 第50页 |
| 1.2 分析和测试 | 第50页 |
| 1.3 荧光染料和生物素基团结构 | 第50-51页 |
| 第二节 化学实验部分 | 第51-67页 |
| 2.1 Tz1的合成 | 第51-52页 |
| 2.2 Tz2-Tz5的合成 | 第52-55页 |
| 2.3 Tz6–Tz14合成 | 第55-60页 |
| 2.4 Tz15–Tz20合成 | 第60-64页 |
| 2.5 Tz21–Tz22合成 | 第64-67页 |
| 第三节 生物实验部分 | 第67-73页 |
| 3.1 细胞培养和蛋白质免疫印迹实验 | 第67页 |
| 3.2 细胞生长抑制实验 | 第67-68页 |
| 3.3 体内和体外的标记实验 | 第68-69页 |
| 3.4 亲和层析和蛋白质免疫印迹,生物质谱分析 | 第69-70页 |
| 3.5 重组蛋白标记和结合位点的LC-MS/MS分析 | 第70-71页 |
| 3.6 细胞成像实验 | 第71-73页 |
| 第五章 全文总结和展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录Ⅰ化合物图谱 | 第81-115页 |
| 附录Ⅱ生物质谱 | 第115-141页 |
| 已发表论文 | 第141-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
