中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
中英文缩略词对照表 | 第14-15页 |
第1章 文献综述:激素性股骨头坏死发病机制研究进展 | 第15-29页 |
1.1 简介 | 第15-17页 |
1.2 激素性股骨头坏死发病机制理论学说 | 第17-28页 |
1.2.1 脂质代谢紊乱学说 | 第17页 |
1.2.2 骨髓间充质干细胞成骨能力减弱学说 | 第17-18页 |
1.2.3 血液供应不足学说 | 第18-19页 |
1.2.4 炎症与细胞凋亡学说 | 第19-21页 |
1.2.5 基因多态性与非编码RNA学说 | 第21-28页 |
1.3 结论 | 第28-29页 |
第2章 人骨髓间充质干细胞分离、培养及鉴定 | 第29-41页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 实验材料、试剂及仪器 | 第29-31页 |
2.2.1 样本选取 | 第29-30页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第30页 |
2.2.3 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
2.3 实验方法 | 第31-34页 |
2.3.1 组织标本的获取及保存 | 第31页 |
2.3.2 BMSC的分离、培养、传代与冻存 | 第31-32页 |
2.3.3 细胞表面标志物鉴定 | 第32页 |
2.3.4 BMSC成骨分化能力鉴定 | 第32-33页 |
2.3.5 BMSC成脂分化能力鉴定 | 第33-34页 |
2.4 实验结果 | 第34-37页 |
2.4.1 纳入样本临床信息 | 第34-35页 |
2.4.2 BMSC形态学观察与细胞表面标志物鉴定 | 第35-36页 |
2.4.3 BMSC成骨、成脂分化能力鉴定 | 第36-37页 |
2.5 讨论 | 第37-39页 |
2.6 小结 | 第39-41页 |
第3章 人激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞microRNA表达差异研究 | 第41-57页 |
3.1 引言 | 第41页 |
3.2 实验材料、试剂及仪器 | 第41-43页 |
3.2.1 miRNA基因芯片检测样本临床信息 | 第41-42页 |
3.2.2 主要实验试剂 | 第42页 |
3.2.3 主要仪器和设备 | 第42-43页 |
3.3 实验方法 | 第43-48页 |
3.3.1 BMSC总RNA抽提 | 第43页 |
3.3.2 变性琼脂糖凝胶电泳质检RNA | 第43-44页 |
3.3.3 ExiqonmiRNA表达谱 | 第44-46页 |
3.3.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证 | 第46-48页 |
3.4 实验结果 | 第48-55页 |
3.4.1 RNA样本质检结果 | 第48-49页 |
3.4.2 miRNA基因芯片检测结果 | 第49-54页 |
3.4.3 qRT-PCR验证miRNA基因芯片结果 | 第54-55页 |
3.5 讨论 | 第55-56页 |
3.6 小结 | 第56-57页 |
第4章 差异表达microRNA与人骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化相关性研究 | 第57-75页 |
4.1 引言 | 第57页 |
4.2 实验材料、试剂及仪器 | 第57-58页 |
4.2.1 主要试剂 | 第57-58页 |
4.2.2 主要仪器 | 第58页 |
4.3 实验方法 | 第58-63页 |
4.3.1 miRNA靶基因预测 | 第58页 |
4.3.2 GO分析和KEGG分析 | 第58-59页 |
4.3.3 BMSC成骨诱导分化 | 第59页 |
4.3.4 BMSC成脂诱导分化 | 第59页 |
4.3.5 BMSC总RNA的抽提 | 第59-60页 |
4.3.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第60-63页 |
4.4 实验结果 | 第63-71页 |
4.4.1 差异表达miRNA靶基因预测结果 | 第63-65页 |
4.4.2 GO分析和KEGG分析 | 第65-67页 |
4.4.3 qRT-PCR检测mRNA差异表达 | 第67-68页 |
4.4.4 qRT-PCR检测miRNA在成骨/成脂分化过程中表达情况 | 第68-71页 |
4.5 讨论 | 第71-73页 |
4.6 小结 | 第73-75页 |
第5章 全文结论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-91页 |
作者简介及在读期间科研成果 | 第91-93页 |
致谢 | 第93页 |