| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 缩略语 | 第16-21页 |
| 第1章 引言 | 第21-27页 |
| 1.1 人参皂苷Rh | 第21-22页 |
| 1.2 AnnexinA | 第22-24页 |
| 1.3 NF-κB信号通路 | 第24-25页 |
| 1.4 论文设计思路 | 第25-27页 |
| 第2章 人参皂苷Rh2细胞内靶点的筛选及鉴定 | 第27-55页 |
| 2.1 材料和方法 | 第27-37页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.1.1.1 细胞株与质粒 | 第27页 |
| 2.1.1.2 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.1.3 试剂与溶液 | 第28-30页 |
| 2.1.2 研究方法 | 第30-37页 |
| 2.1.2.1 (20S/R)G-Rh2-PEGA树脂的合成 | 第30-31页 |
| 2.1.2.2 蛋白质质谱分析 | 第31页 |
| 2.1.2.3 生物信息学分析 | 第31页 |
| 2.1.2.4 细胞培养与转染 | 第31-32页 |
| 2.1.2.5 载体构建 | 第32-34页 |
| 2.1.2.6 分子对接 | 第34页 |
| 2.1.2.7 重组人源AnnexinA2的表达及纯化 | 第34-35页 |
| 2.1.2.8 等温滴定量热分析 | 第35页 |
| 2.1.2.9 免疫印记分析 | 第35-36页 |
| 2.1.2.10 竞争性G-Rh2pull-down分析 | 第36-37页 |
| 2.1.2.11 细胞内源蛋白质热漂移分析 | 第37页 |
| 2.1.2.12 统计学分析 | 第37页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第37-53页 |
| 2.2.1 实验结果 | 第37-51页 |
| 2.2.1.1 (20S/R)G-Rh2相互作用蛋白质组学分析 | 第37-39页 |
| 2.2.1.2 (20S/R)G-Rh2相互作用蛋白质组生物信息学分析.. | 第39-46页 |
| 2.2.1.3 AnnexinA2蛋白质与(20S)G-Rh2的相互作用验证.. | 第46-51页 |
| 2.2.2 讨论 | 第51-53页 |
| 2.3 小结 | 第53-55页 |
| 第3章 人参皂苷Rh2通过结合AnnexinA2蛋白质抑制NF-κB信号通路 | 第55-87页 |
| 3.1 材料和方法 | 第55-69页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第55-61页 |
| 3.1.1.1 细胞株与质粒 | 第55-57页 |
| 3.1.1.2 主要仪器 | 第57页 |
| 3.1.1.3 试剂与溶液 | 第57-61页 |
| 3.1.2 研究方法 | 第61-69页 |
| 3.1.2.1 细胞培养与转染 | 第61-62页 |
| 3.1.2.2 全细胞RNA提取 | 第62页 |
| 3.1.2.3 第一链cDNA合成 | 第62页 |
| 3.1.2.4 半定量PCR | 第62-63页 |
| 3.1.2.5 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第63页 |
| 3.1.2.6 载体构建 | 第63-65页 |
| 3.1.2.7 免疫印记分析 | 第65-66页 |
| 3.1.2.8 免疫共沉淀 | 第66页 |
| 3.1.2.9 免疫荧光分析 | 第66-67页 |
| 3.1.2.10 细胞核质分离 | 第67-68页 |
| 3.1.2.11 细胞生存率检测(MTTassay) | 第68页 |
| 3.1.2.12 Caspase活性检测 | 第68页 |
| 3.1.2.13 平板克隆形成实验 | 第68-69页 |
| 3.1.2.14 统计学分析 | 第69页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第69-86页 |
| 3.2.1 实验结果 | 第69-84页 |
| 3.2.1.1 (20S)G-Rh2抑制NF-κB的转录激活 | 第69-71页 |
| 3.2.1.2 (20S)G-Rh2抑制AnnexinA2蛋白质和NF-κBp50亚基蛋白质的相互作用以及二者的细胞核共定位 | 第71-75页 |
| 3.2.1.3 (20S)G-Rh2通过AnnexinA2蛋白质依赖的方式抑制NF-κB信号通路以及抗凋亡信号转导 | 第75-79页 |
| 3.2.1.4 AnnexinA2蛋白质Lys302位点突变抑制(20S)G-Rh2的抗肿瘤活性 | 第79-84页 |
| 3.2.2 讨论 | 第84-86页 |
| 3.3 小结 | 第86-87页 |
| 第4章 人参皂苷Rg5、Rk1和C-K通过结合AnnexinA2抑制NF-κB信号通路 | 第87-119页 |
| 4.1 材料和方法 | 第87-99页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第87-92页 |
| 4.1.1.1 细胞株与质粒 | 第87-88页 |
| 4.1.1.2 主要仪器 | 第88页 |
| 4.1.1.3 试剂与溶液 | 第88-92页 |
| 4.1.2 研究方法 | 第92-99页 |
| 4.1.2.1 细胞培养与转染 | 第92-93页 |
| 4.1.2.2 全细胞RNA提取 | 第93页 |
| 4.1.2.3 第一链cDNA合成 | 第93-94页 |
| 4.1.2.4 荧光实时定量PCR(qRT-PCR) | 第94页 |
| 4.1.2.5 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第94页 |
| 4.1.2.6 细胞内源蛋白质热漂移分析 | 第94-95页 |
| 4.1.2.7 重组人源AnnexinA2的表达及纯化 | 第95-96页 |
| 4.1.2.8 重组人源蛋白质热漂移分析 | 第96页 |
| 4.1.2.9 免疫印记分析 | 第96-97页 |
| 4.1.2.10 免疫共沉淀 | 第97页 |
| 4.1.2.11 免疫荧光分析 | 第97-98页 |
| 4.1.2.12 细胞生存率检测(MTTassay) | 第98页 |
| 4.1.2.13 Caspase活性检测 | 第98-99页 |
| 4.1.2.14 平板克隆形成实验 | 第99页 |
| 4.1.2.15 统计学分析 | 第99页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第99-116页 |
| 4.2.1 实验结果 | 第99-115页 |
| 4.2.1.1 人参皂苷Rg5、Rk1、C-K结合AnnexinA | 第99-102页 |
| 4.2.1.2 人参皂苷Rg5、Rk1、C-K通过结合AnnexinA2抑制NF-κB的转录活性和下游基因的表达。 | 第102-108页 |
| 4.2.1.3 人参皂苷Rg5、Rk1、C-K通过AnnexinA2蛋白质依赖的方式抑制NF-κB信号通路以及抗凋亡信号转导 | 第108-110页 |
| 4.2.1.4 AnnexinA2蛋白质Lys302位点突变抑制人参皂苷Rg5、Rk1、C-K的抗肿瘤活性 | 第110-115页 |
| 4.2.2 讨论 | 第115-116页 |
| 4.3 小结 | 第116-119页 |
| 结论 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-128页 |
| 附录 | 第128-156页 |
| 作者简介及博士研究生期间取得的学术成果 | 第156-158页 |
| 致谢 | 第158页 |
