摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第9-16页 |
1.1 黑线仓鼠的研究概况 | 第9-11页 |
1.2 黑线仓鼠的季节性繁殖 | 第11-12页 |
1.3 TSH-Dio2/Dio3-TH系统的研究进展 | 第12-14页 |
1.4 DNA甲基化研究进展 | 第14-16页 |
2 研究目的与意义 | 第16-17页 |
3 实验用品 | 第17-20页 |
3.1 实验仪器 | 第17-18页 |
3.2 实验药品与试剂 | 第18-19页 |
3.3 实验试剂配置 | 第19-20页 |
4 黑线仓鼠TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因序列克隆分析 | 第20-32页 |
4.1 研究材料 | 第20页 |
4.2 研究方法 | 第20-24页 |
4.2.1 基因组DNA的获取 | 第20-21页 |
4.2.2 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子区序列克隆引物设计 | 第21-22页 |
4.2.3 PCR扩增 | 第22页 |
4.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测及PCR产物回收 | 第22页 |
4.2.5 连接 | 第22-23页 |
4.2.6 制备感受态细胞 | 第23页 |
4.2.7 转化 | 第23页 |
4.2.8 筛选阳性克隆及保种测序 | 第23页 |
4.2.9 生物信息学分析 | 第23-24页 |
4.3 结果与分析 | 第24-32页 |
4.3.1 基因组DNA提取结果 | 第24页 |
4.3.2 PCR扩增电泳图及测序峰图 | 第24-27页 |
4.3.3 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子序列分析 | 第27-32页 |
5 黑线仓鼠TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子区甲基化差异分析 | 第32-53页 |
5.1 研究材料 | 第32页 |
5.2 研究方法 | 第32-35页 |
5.2.1 基因组DNA重亚硫酸盐修饰 | 第32-33页 |
5.2.2 CpG岛甲基化引物设计 | 第33-34页 |
5.2.3 修饰后DNAPCR扩增 | 第34页 |
5.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测及PCR产物回收 | 第34页 |
5.2.5 连接转化筛选阳性克隆及保种测序 | 第34页 |
5.2.6 生物信息学分析 | 第34-35页 |
5.3 结果与分析 | 第35-53页 |
5.3.1 基因组DNA提取结果 | 第35页 |
5.3.2 PCR扩增电泳图及测序峰图 | 第35-37页 |
5.3.3 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化测序结果 | 第37-50页 |
5.3.4 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化与相对应基因表达相关性分析 | 第50-51页 |
5.3.5 不同季节TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化比较分析 | 第51-52页 |
5.3.6 不同性别TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化比较分析 | 第52-53页 |
6 讨论 | 第53-58页 |
6.1 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子序列分析 | 第53-55页 |
6.1.1 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子结构与功能分析 | 第53-54页 |
6.1.2 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子亚硫酸盐转化序列分析 | 第54-55页 |
6.2 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因参与季节性繁殖 | 第55-58页 |
6.2.1 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化与相对应基因表达的关系 | 第55-56页 |
6.2.2 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化与季节、光照的关系 | 第56页 |
6.2.3 TSH-Dio2/Dio3-TH系统基因启动子甲基化与性别的关系 | 第56-58页 |
7 结论与展望 | 第58-59页 |
7.1 结论 | 第58页 |
7.2 展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66页 |