| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-28页 |
| 1.1 肿瘤代谢研究现状 | 第10-19页 |
| 1.1.1 肿瘤代谢的特征 | 第11-12页 |
| 1.1.2 肿瘤代谢研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.3 靶向肿瘤代谢的治疗 | 第15-17页 |
| 1.1.4 磷酸戊糖途径的作用 | 第17-18页 |
| 1.1.5 磷酸戊糖途径与肿瘤研究 | 第18-19页 |
| 1.2 细胞周期与肿瘤发生发展 | 第19-24页 |
| 1.2.1 细胞周期的调控 | 第19-21页 |
| 1.2.2 Plk1在细胞周期中的作用 | 第21-23页 |
| 1.2.3 细胞周期异常与肿瘤的发生发展 | 第23页 |
| 1.2.4 Plk1与肿瘤的发生发展 | 第23-24页 |
| 1.3 肿瘤不同特征和肿瘤代谢间的相互关联研究 | 第24-27页 |
| 1.3.1 肿瘤代谢与细胞周期的关联研究 | 第26-27页 |
| 1.4 研究的内容与意义 | 第27-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-32页 |
| 2.1.1 实验所用细胞及小鼠来源 | 第28页 |
| 2.1.2 材料与试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.3 qRT-PCR引物 | 第30页 |
| 2.1.4 抗体 | 第30页 |
| 2.1.5 所用实验仪器 | 第30-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-58页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第32页 |
| 2.2.2 分子克隆 | 第32-37页 |
| 2.2.3 蛋白质印迹 | 第37-40页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第40-42页 |
| 2.2.5 质粒转染与病毒感染 | 第42-43页 |
| 2.2.6 流式细胞术 | 第43-44页 |
| 2.2.7 免疫沉淀 | 第44-45页 |
| 2.2.8 EdU掺入实验 | 第45-47页 |
| 2.2.9 免疫荧光实验 | 第47-48页 |
| 2.2.10 细胞周期同步化 | 第48页 |
| 2.2.11 活细胞成像 | 第48页 |
| 2.2.12 蛋白质交联实验 | 第48-49页 |
| 2.2.13 6PGD酶活检测 | 第49-50页 |
| 2.2.14 G6PD酶活,Lactate及NADPH检测 | 第50-53页 |
| 2.2.15 LC-MS检测细胞代谢物 | 第53-54页 |
| 2.2.16 NMR检测细胞代谢物 | 第54页 |
| 2.2.17 蛋白纯化与激酶反应实验 | 第54-56页 |
| 2.2.18 蛋白质磷酸化位点鉴定 | 第56-57页 |
| 2.2.19 动物实验 | 第57页 |
| 2.2.20 数据处理 | 第57-58页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第58-88页 |
| 3.1 PLK1增强肿瘤细胞磷酸戊糖途径及生物合成 | 第58-66页 |
| 3.1.1 细胞周期进程中Plk1促进G6PD酶活性及NADPH产生 | 第58-61页 |
| 3.1.2 改变Plk1显著影响G6PD酶活性及NADPH产生 | 第61-62页 |
| 3.1.3 改变Plk1显著影响PPP通路及核苷酸合成 | 第62-66页 |
| 3.2 PLK1通过结合并磷酸化G6PD调节其活性 | 第66-75页 |
| 3.2.1 Plk1通过直接调控G6PD促进NADPH生成 | 第66-68页 |
| 3.2.2 Plk1与G6PD相互结合 | 第68-71页 |
| 3.2.3 Plk1磷酸化G6PD及位点的鉴定 | 第71-75页 |
| 3.3 PLK1介导的G6PD磷酸化促进其二聚体的形成 | 第75-79页 |
| 3.3.1 Plk1影响G6PD二聚体状态 | 第75-77页 |
| 3.3.2 Plk1介导的G6PD磷酸化促进其二聚体的形成 | 第77-79页 |
| 3.4 G6PD介导的磷酸戊糖途径对于PLK1调节的细胞周期进程至关重要 | 第79-83页 |
| 3.4.1 G6PD的不同突变体影响细胞有丝分裂时长 | 第79-80页 |
| 3.4.2 Nuc和NAC回补G6PD功能的缺失 | 第80-83页 |
| 3.5 G6PD对于PLK1介导的肿瘤增殖至关重要 | 第83-88页 |
| 3.5.1 G6PD不同突变体影响细胞增殖 | 第83-84页 |
| 3.5.2 G6PD不同突变体影响肿瘤增殖 | 第84-88页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第88-92页 |
| 4.1 总结 | 第88-89页 |
| 4.2 讨论 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-100页 |
| 附录一 | 第100-101页 |
| 附录二 | 第101-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 在读期间发表的论文与取得的其他成果 | 第108-109页 |
