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siRNA沉默KDR基因对人乳癌细胞甲基化和凋亡作用的研究

摘要第1-3页
Abstract第3-6页
引言第6-8页
第一章 实验材料第8-10页
   ·细胞株及培养体系第8页
   ·药品与试剂第8页
   ·材料与仪器第8-10页
第二章 实验方法第10-20页
   ·转染条件优化实验第10-11页
   ·Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡第11-12页
   ·比色法检测caspase-3活性第12-13页
     ·蛋白的提取第12页
     ·caspase-3酶活性的检测第12-13页
   ·RNA提取与RT-PCR第13-15页
     ·RNA提取第13-14页
     ·RT-PCR检测survivin、caspase-3、RUNX3和NES1 mRNA表达水平第14-15页
   ·细胞DNA的提取第15-16页
   ·甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)第16-18页
     ·DNA的亚硫酸氢盐修饰第16-18页
     ·PCR扩增第18页
   ·免疫组化检测survivin的表达第18-19页
   ·统计学处理第19-20页
第三章 实验结果第20-27页
   ·Hoechst荧光染色结果第20页
   ·KDR siRNA转染后乳癌细胞caspase-3活性的变化第20-21页
   ·半定量RT-PCR分析mRNA表达结果第21-23页
   ·NES1和RUNX3的甲基化状态第23-24页
   ·免疫组化检测survivin蛋白的表达水平第24-27页
第四章 讨论第27-29页
结论第29-30页
参考文献第30-32页
综述及参考文献第32-39页
攻读学位期间的研究成果第39-40页
致谢第40-41页

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