| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 材料与方法 | 第14-28页 |
| 1. 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2. 主要设备 | 第15-16页 |
| 3. 研究对象 | 第16-17页 |
| 3.1 野生型斑马鱼和 MYCN 转基因斑马鱼 | 第16页 |
| 3.2 HL-60 细胞与正常 CD34（+）细胞 | 第16页 |
| 3.3 AML/MDS 患者及其正常对照样本 | 第16-17页 |
| 4. 细胞培养、计数、冻存和复苏方法 | 第17-19页 |
| 4.1 细胞培养 | 第17页 |
| 4.2 细胞计数 | 第17-18页 |
| 4.2.1 原理 | 第17页 |
| 4.2.2 细胞计数方法 | 第17-18页 |
| 4.3 细胞冻存和复苏 | 第18-19页 |
| 4.3.1 原理 | 第18页 |
| 4.3.2 细胞冻存操作步骤 | 第18页 |
| 4.3.3 细胞复苏操作步骤 | 第18-19页 |
| 5. 临床样本的收集 | 第19页 |
| 6. 分离外周血单个核细胞 | 第19-20页 |
| 6.1 原理 | 第19页 |
| 6.2 操作步骤 | 第19-20页 |
| 7. 总 RNA 的提取、鉴定 | 第20-22页 |
| 7.1 实验原理 | 第20页 |
| 7.2 样本预处理 | 第20-21页 |
| 7.3 操作步骤 | 第21页 |
| 7.4 总 RNA 的鉴定 | 第21-22页 |
| 8. cDNA 的制备 | 第22-23页 |
| 8.1 去除基因组 DNA | 第22页 |
| 8.2 反转录反应 | 第22-23页 |
| 9. 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ RT-PCR） | 第23-27页 |
| 9.1 原理 | 第23-25页 |
| 9.2 引物设计与合成 | 第25页 |
| 9.3 反应体系和反应条件 | 第25-26页 |
| 9.4 标准曲线的制备及线性范围的确定 | 第26页 |
| 9.5 PCR 产物的确定和溶解曲线的分析 | 第26-27页 |
| 10. 数据处理与统计学分析 | 第27-28页 |
| 结果 | 第28-37页 |
| 1. 总 RNA 浓度和纯度的鉴定 | 第28页 |
| 2. RT-PCR 产物的鉴定 | 第28-32页 |
| 2.1 熔解曲线和扩增曲线分析 | 第28-32页 |
| 2.2 电泳结果分析 | 第32页 |
| 3. 各基因标准曲线 | 第32-33页 |
| 4. 岩藻糖基转移酶基因的表达 | 第33-37页 |
| 4.1 斑马鱼岩藻糖基转移酶各基因的表达 | 第33-34页 |
| 4.2 HL-60 细胞部分岩藻糖基转移酶基因的表达 | 第34-35页 |
| 4.3 AML/MDS 患者部分岩藻糖基转移酶基因的表达 | 第35-37页 |
| 讨论 | 第37-48页 |
| 1. 岩藻糖基转移酶生物学特性 | 第37页 |
| 2. 岩藻糖基转移酶基因实时荧光定量检测方法的优势和优化 | 第37-40页 |
| 2.1 FQ RT-PCR 检测方法的优势 | 第37-39页 |
| 2.2 FQ RT-PCR 检测方法的优化 | 第39-40页 |
| 3. 血液系统恶性肿瘤模式生物斑马鱼与岩藻糖基转移酶 | 第40-43页 |
| 4. HL-60 人原髓细胞白血病细胞与岩藻糖基转移酶 | 第43-44页 |
| 5. 人类恶性肿瘤与岩藻糖基转移酶 | 第44-46页 |
| 6. 总结 | 第46-48页 |
| 本实验的创新点与不足 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 学术论文和科研成果目录 | 第60页 |
