| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第10-17页 |
| 第一章 猪瘟、口蹄疫慢病毒制备转基因动物的研究概况 | 第10-17页 |
| 1.1 猪瘟研究概况 | 第10-12页 |
| 1.1.1 国外CSFV的发展现状 | 第10页 |
| 1.1.2 国内CSFV的发展现状 | 第10-11页 |
| 1.1.3 猪瘟的控制面临的难题 | 第11页 |
| 1.1.4 猪瘟疫苗的研究 | 第11-12页 |
| 1.1.5 总结与展望 | 第12页 |
| 1.2 口蹄疫研究概况 | 第12-15页 |
| 1.2.1 国外FMD的发展现状 | 第13页 |
| 1.2.2 口蹄疫在我国的发展情况 | 第13-14页 |
| 1.2.3 口蹄疫防疫的应对措施 | 第14页 |
| 1.2.4 口蹄疫疫苗的研究 | 第14-15页 |
| 1.2.5 总结与展望 | 第15页 |
| 1.3 慢病毒制备转基因动物的研究概况 | 第15-17页 |
| 1.3.1 慢病毒载体的特点 | 第15-16页 |
| 1.3.2 慢病毒载体在动物转基因上的应用 | 第16页 |
| 1.3.3 总结与展望 | 第16-17页 |
| 实验研究 | 第17-42页 |
| 第二章 慢病毒载体构建与鉴定 | 第17-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 主要耗材、试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 载体和菌株 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 引物的设计 | 第19-23页 |
| 2.2.2 慢病毒载体构建与双酶切鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.3 重组慢病毒载体的包装 | 第24-25页 |
| 2.2.4 慢病毒的浓缩 | 第25页 |
| 2.2.5 奶山羊乳腺细胞原代的制作 | 第25-26页 |
| 2.2.6 RT-PCR检测GMECs中目的基因的表达 | 第26-27页 |
| 2.2.7 Westernblotting检测乳腺上皮细胞分泌蛋白的表达 | 第27-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-32页 |
| 2.3.1 慢病毒载体目的基因双酶切鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 山羊乳腺上皮细胞分离培养 | 第29-30页 |
| 2.3.3 包装慢病毒的293T细胞 | 第30页 |
| 2.3.4 慢病毒感染山羊乳腺上皮的EGFP对照 | 第30-31页 |
| 2.3.5 目的基因在乳腺上皮细胞中的表达分析 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.5 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 利用慢病毒载体制备转基因羊 | 第34-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 同期发情和超数排卵方法 | 第35页 |
| 3.2.2 胚胎收集 | 第35-36页 |
| 3.2.3 慢病毒胚胎注射 | 第36页 |
| 3.2.4 胚胎移植 | 第36页 |
| 3.2.5 转基因山羊的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.3 结果 | 第37-40页 |
| 3.3.1 胚胎收集 | 第37页 |
| 3.3.2 慢病毒注射胚胎图片 | 第37-38页 |
| 3.3.3 慢病毒感染胚胎后的对照荧光图片 | 第38-39页 |
| 3.3.4 PCR检测得到的转基因山羊数量统计表格与结果 | 第39页 |
| 3.3.5 转基因山羊的PCR结果图片 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 小结 | 第41-42页 |
| 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
