摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 薄荷呋喃 | 第12-14页 |
1.1.1 薄荷呋喃基本性质与应用 | 第12页 |
1.1.2 薄荷呋喃的化学合成工艺 | 第12-13页 |
1.1.3 薄荷呋喃的生物合成 | 第13-14页 |
1.2 脱氢酶与氧化酶 | 第14-16页 |
1.2.1 乙醇脱氢酶 | 第14页 |
1.2.2 乳酸脱氢酶 | 第14-15页 |
1.2.3 苹果酸脱氢酶 | 第15页 |
1.2.4 异柠檬酸脱氢酶 | 第15页 |
1.2.5 多酚氧化酶 | 第15-16页 |
1.3 细胞色素P450 | 第16-20页 |
1.3.1 细胞色素P450酶系简介 | 第16-17页 |
1.3.2 细胞色素P450结构 | 第17-18页 |
1.3.3 细胞色素P450酶系的循环催化机制 | 第18-20页 |
1.4 本论文开展思路和研究内容 | 第20-22页 |
第二章 商品酶对环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇的转化作用 | 第22-48页 |
2.1 实验材料和仪器试剂 | 第22页 |
2.1.1 脱氢酶与氧化酶 | 第22页 |
2.1.2 底物与产物 | 第22页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第22页 |
2.2 实验目的与原理 | 第22-23页 |
2.2.1 实验目的 | 第22-23页 |
2.2.2 实验原理 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-34页 |
2.3.1 试剂及其配制方法 | 第23-25页 |
2.3.2 商品酶转化标准底物反应体系的建立与优化 | 第25-27页 |
2.3.3 环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇生物转化酶的筛选 | 第27-32页 |
2.3.3.1 环氧异胡薄荷醇生物转化酶的筛选 | 第27-30页 |
2.3.3.2 异胡薄荷醇生物转化酶的筛选 | 第30-32页 |
2.3.4 乙醇脱氢酶分别转化环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇的条件优化 | 第32-33页 |
2.3.4.1 乙醇脱氢酶转化环氧异胡薄荷醇的条件优化 | 第32页 |
2.3.4.2 乙醇脱氢酶转化异胡薄荷醇的条件优化 | 第32-33页 |
2.3.5 乙醇脱氢酶分别转化环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇的产物鉴定 | 第33-34页 |
2.3.5.1 乙醇脱氢酶转化环氧异胡薄荷醇的产物鉴定 | 第33页 |
2.3.5.2 乙醇脱氢酶转化异胡薄荷醇的产物鉴定 | 第33-34页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第34-47页 |
2.4.1 商品酶转化标准底物的基本反应体系 | 第34-35页 |
2.4.2 环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇生物转化酶的筛选结果 | 第35-37页 |
2.4.2.1 环氧异胡薄荷醇生物转化酶的筛选结果 | 第35-36页 |
2.4.2.2 异胡薄荷醇生物转化酶的筛选结果 | 第36-37页 |
2.4.3 乙醇脱氢酶转化环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇的条件优化结果 | 第37-39页 |
2.4.3.1 乙醇脱氢酶转化环氧异胡薄荷醇的条件优化结果 | 第37-38页 |
2.4.3.2 乙醇脱氢酶转化异胡薄荷醇的条件优化 | 第38-39页 |
2.4.4 乙醇脱氢酶转化环氧异胡薄荷醇、异胡薄荷醇的产物鉴定结果 | 第39-47页 |
2.4.4.1 乙醇脱氢酶转化环氧异胡薄荷醇的产物鉴定结果 | 第39-43页 |
2.4.4.2 乙醇脱氢酶转化异胡薄荷醇的产物鉴定结果 | 第43-47页 |
本章小结 | 第47-48页 |
第三章 薄荷呋喃合酶与P450环氧酶对异胡薄荷醇的生物转化 | 第48-58页 |
3.1 实验材料和仪器试剂 | 第48页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第48页 |
3.1.2 主要培养基 | 第48页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第48页 |
3.2 实验方法 | 第48-55页 |
3.2.1 重组薄荷呋喃合酶的载体构建与诱导表达 | 第48-51页 |
3.2.2 重组P450环氧酶的载体构建与诱导表达 | 第51-53页 |
3.2.3 重组薄荷呋喃合酶、P450环氧酶分别转化异胡薄荷醇 | 第53-55页 |
3.3 实验结果与分析 | 第55-56页 |
3.3.1 薄荷呋喃合酶的重组载体构建与诱导表达结果 | 第55页 |
3.3.2 P450环氧酶的重组载体构建与诱导表达结果 | 第55-56页 |
3.3.3 重组薄荷呋喃合酶、重组P450环氧酶转化异胡薄荷醇的产物检测 | 第56页 |
本章小结 | 第56-58页 |
第四章 微生物对异胡薄荷醇的生物转化 | 第58-68页 |
4.1 实验材料和仪器试剂 | 第58页 |
4.1.1 实验菌株 | 第58页 |
4.1.2 主要培养基 | 第58页 |
4.1.3 主要实验仪器 | 第58页 |
4.2 实验方法 | 第58-61页 |
4.2.1 菌株的筛选 | 第58-59页 |
4.2.2 异胡薄荷醇耐受菌对异胡薄荷醇的转化作用分析 | 第59-60页 |
4.2.3 混合菌株XJTA-F2发酵异胡薄荷醇 | 第60-61页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第61-66页 |
4.3.1 菌株的筛选结果 | 第61-63页 |
4.3.2 耐受性菌株对异胡薄荷醇的转化结果 | 第63-64页 |
4.3.3 合菌株XJTA-F2发酵异胡薄荷醇结果 | 第64-66页 |
本章小结 | 第66-68页 |
全文总结与展望 | 第68-70页 |
附录 | 第70-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
攻读硕士期间主要研究成果 | 第80-81页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第81页 |