摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-17页 |
1.1 植物miRNA研究进展 | 第12-16页 |
1.1.1 植物miRNA特点和种类 | 第12页 |
1.1.2 植物miRNA生物合成过程和作用机制 | 第12-13页 |
1.1.3 植物miRNA研究方法 | 第13-14页 |
1.1.4 植物miRNA的生物学功能 | 第14-16页 |
1.2 草莓miRNA研究进展 | 第16页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
第二章 灰霉病菌诱导的草莓果实miRNA的鉴定及靶基因预测 | 第17-42页 |
2.1 试验材料 | 第17页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌株材料 | 第17页 |
2.1.3 试验试剂 | 第17页 |
2.1.4 引物设计 | 第17页 |
2.2 试验方法 | 第17-22页 |
2.2.1 灰霉病菌对‘艳丽’草莓的处理 | 第17-19页 |
2.2.2 小RNA组文库构建与测序 | 第19页 |
2.2.3 生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.4 miRNA差异表达分析 | 第20-21页 |
2.2.5 靶基因的预测及注释 | 第21-22页 |
2.3 结果与分析 | 第22-38页 |
2.3.1 sRNA种类分析 | 第22页 |
2.3.2 灰霉病菌诱导后检测到的草莓果实中保守miRNA | 第22-29页 |
2.3.3 灰霉病菌诱导后检测到的草莓果实中新的miRNA | 第29页 |
2.3.4 灰霉病菌诱导的草莓果实miRNA的差异表达分析 | 第29-36页 |
2.3.5 靶基因的预测 | 第36-38页 |
2.3.6 靶基因的GO注释 | 第38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
2.4.1 草莓中的小分子RNA | 第38-40页 |
2.4.2 草莓果实中的miRNA | 第40页 |
2.4.3 草莓果实miRNA的靶基因 | 第40页 |
2.5 小结 | 第40-42页 |
第三章 差异表达miR5290a靶基因PIRL的鉴定及载体构建研究 | 第42-60页 |
3.1 试验材料 | 第42-43页 |
3.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.1.2 试验试剂 | 第42页 |
3.1.3 培养基配方 | 第42-43页 |
3.1.4 引物设计 | 第43页 |
3.2 试验方法 | 第43-49页 |
3.2.1 草莓总RNA提取与cDNA的获得 | 第43页 |
3.2.2 PIRL基因编码区全长克隆鉴定与序列分析 | 第43-44页 |
3.2.3 PIRL干扰载体构建 | 第44-46页 |
3.2.4 mPIRL过表达载体构建 | 第46-47页 |
3.2.5 ‘Ruegen’草莓的遗传转化 | 第47-48页 |
3.2.6 PIRL实时荧光定量验证 | 第48页 |
3.2.7 ‘艳丽’草莓PIRL基因瞬时表达方法 | 第48-49页 |
3.3 结果与分析 | 第49-58页 |
3.3.1 灰霉病诱导的‘艳丽’草莓果实中PIRL基因的差异表达分析 | 第49页 |
3.3.2 PIRL编码区全长克隆鉴定与序列分析 | 第49-51页 |
3.3.3 草莓PIRL基因干扰载体的构建 | 第51-53页 |
3.3.4 ‘艳丽’草莓果实mPIRL基因过表达载体的构建及遗传转化分析 | 第53-56页 |
3.3.5 ‘艳丽’草莓PIRL基因的抗病性分析 | 第56-58页 |
3.4 讨论 | 第58-59页 |
3.5 小结 | 第59-60页 |
第四章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第91-92页 |