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灰霉病菌诱导的草莓果实miRNA的鉴定及差异表达分析

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 文献综述第12-17页
    1.1 植物miRNA研究进展第12-16页
        1.1.1 植物miRNA特点和种类第12页
        1.1.2 植物miRNA生物合成过程和作用机制第12-13页
        1.1.3 植物miRNA研究方法第13-14页
        1.1.4 植物miRNA的生物学功能第14-16页
    1.2 草莓miRNA研究进展第16页
    1.3 本研究的目的和意义第16-17页
第二章 灰霉病菌诱导的草莓果实miRNA的鉴定及靶基因预测第17-42页
    2.1 试验材料第17页
        2.1.1 植物材料第17页
        2.1.2 菌株材料第17页
        2.1.3 试验试剂第17页
        2.1.4 引物设计第17页
    2.2 试验方法第17-22页
        2.2.1 灰霉病菌对‘艳丽’草莓的处理第17-19页
        2.2.2 小RNA组文库构建与测序第19页
        2.2.3 生物信息学分析第19-20页
        2.2.4 miRNA差异表达分析第20-21页
        2.2.5 靶基因的预测及注释第21-22页
    2.3 结果与分析第22-38页
        2.3.1 sRNA种类分析第22页
        2.3.2 灰霉病菌诱导后检测到的草莓果实中保守miRNA第22-29页
        2.3.3 灰霉病菌诱导后检测到的草莓果实中新的miRNA第29页
        2.3.4 灰霉病菌诱导的草莓果实miRNA的差异表达分析第29-36页
        2.3.5 靶基因的预测第36-38页
        2.3.6 靶基因的GO注释第38页
    2.4 讨论第38-40页
        2.4.1 草莓中的小分子RNA第38-40页
        2.4.2 草莓果实中的miRNA第40页
        2.4.3 草莓果实miRNA的靶基因第40页
    2.5 小结第40-42页
第三章 差异表达miR5290a靶基因PIRL的鉴定及载体构建研究第42-60页
    3.1 试验材料第42-43页
        3.1.1 植物材料第42页
        3.1.2 试验试剂第42页
        3.1.3 培养基配方第42-43页
        3.1.4 引物设计第43页
    3.2 试验方法第43-49页
        3.2.1 草莓总RNA提取与cDNA的获得第43页
        3.2.2 PIRL基因编码区全长克隆鉴定与序列分析第43-44页
        3.2.3 PIRL干扰载体构建第44-46页
        3.2.4 mPIRL过表达载体构建第46-47页
        3.2.5 ‘Ruegen’草莓的遗传转化第47-48页
        3.2.6 PIRL实时荧光定量验证第48页
        3.2.7 ‘艳丽’草莓PIRL基因瞬时表达方法第48-49页
    3.3 结果与分析第49-58页
        3.3.1 灰霉病诱导的‘艳丽’草莓果实中PIRL基因的差异表达分析第49页
        3.3.2 PIRL编码区全长克隆鉴定与序列分析第49-51页
        3.3.3 草莓PIRL基因干扰载体的构建第51-53页
        3.3.4 ‘艳丽’草莓果实mPIRL基因过表达载体的构建及遗传转化分析第53-56页
        3.3.5 ‘艳丽’草莓PIRL基因的抗病性分析第56-58页
    3.4 讨论第58-59页
    3.5 小结第59-60页
第四章 结论第60-61页
参考文献第61-67页
附录第67-90页
致谢第90-91页
攻读硕士学位期间发表文章第91-92页

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