中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第9-14页 |
1.1 研究背景及意义 | 第9-10页 |
1.2 Cell-SELEX技术 | 第10-11页 |
1.3 适配子 | 第11-14页 |
第二章 实验材料和方法 | 第14-34页 |
2.1 实验材料 | 第14-22页 |
2.1.1 实验细胞 | 第14页 |
2.1.2 实验仪器和设备 | 第14-15页 |
2.1.3 实验试剂 | 第15-17页 |
2.1.4 主要试剂盒 | 第17-18页 |
2.1.5 主要试剂配制方法 | 第18-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-34页 |
2.2.1 适配子文库及引物的设计与合成 | 第22页 |
2.2.2 PCR扩增反应条件优化 | 第22-23页 |
2.2.3 SELEX筛选特异性适配子 | 第23-28页 |
2.2.4 特异性适配子文库克隆测序及结构分析预测 | 第28页 |
2.2.5 适配子特异性和亲和力检测 | 第28-31页 |
2.2.6 适配子高特异性细胞免疫荧光验证 | 第31页 |
2.2.7 高特异性适配子膜靶蛋白的制备及SDS-PAGE鉴定 | 第31-34页 |
第三章 实验结果 | 第34-54页 |
3.1 PCR扩增反应条件优化 | 第34-36页 |
3.1.1 对称PCR扩增反应条件优化 | 第34-35页 |
3.1.2 间接不对称PCR扩增反应条件优化 | 第35-36页 |
3.2 SELEX筛选特异性适配子 | 第36-38页 |
3.2.1 筛选条件 | 第36页 |
3.2.2 各轮适配子文库筛选 | 第36-37页 |
3.2.3 筛选轮次的确定 | 第37-38页 |
3.3 适配子库克隆测序、一级结构同源性分析及二级结构预测 | 第38-48页 |
3.3.1 克隆测序 | 第38-47页 |
3.3.2 一级结构同源性分析 | 第47页 |
3.3.3 二级结构预测 | 第47-48页 |
3.4 适配子特异性和亲和力分析 | 第48-52页 |
3.4.1 适配子荧光素标记 | 第48-49页 |
3.4.2 特异性分析 | 第49-51页 |
3.4.3 亲和力分析 | 第51-52页 |
3.5 CIN-Ap4高特异性细胞免疫荧光验证 | 第52页 |
3.6 CIN-Ap4膜靶蛋白的制备及SDS-PAGE鉴定 | 第52-54页 |
讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
在校期间研究成果 | 第62-63页 |
缩略词表 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |