| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 葡萄球菌肠毒素简介 | 第10-15页 |
| 1.1.1 葡萄球菌肠毒素的血清型及分类 | 第10-11页 |
| 1.1.2 葡萄球菌肠毒素的分子结构 | 第11页 |
| 1.1.3 葡萄球菌肠毒素的理化性质 | 第11-12页 |
| 1.1.4 葡萄球菌肠毒素的催吐活性 | 第12-13页 |
| 1.1.5 葡萄球菌肠毒素的超抗原性 | 第13-15页 |
| 1.1.6 葡萄球菌肠毒素的应用研究 | 第15页 |
| 1.2 葡萄球菌肠毒素SEA、SEO 的结构与功能 | 第15-17页 |
| 1.2.1 SEA 基因与分子结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 SEA 分子的主要功能域 | 第16-17页 |
| 1.2.3 SEO 研究进展 | 第17页 |
| 1.3 展望 | 第17页 |
| 1.4 制备葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 重组葡萄球菌肠毒素 SEA、SEO 的表达及纯化 | 第19-35页 |
| 2.1 材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 质粒及宿主菌 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 细菌质粒小抽提-碱裂解法 | 第23-24页 |
| 2.2.2 sea 原核表达载体pET28α的构建 | 第24页 |
| 2.2.3 目的基因的酶切与表达载体的连接 | 第24-25页 |
| 2.2.4 连接产物的转化及重组质粒鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.5 重组表达质粒的转化 | 第27页 |
| 2.2.6 重组SEA-His、SEO-His 蛋白的镍螯合纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.7 重组蛋白SEA-GST、SEO-GST 亲和层析纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.2.9 重组蛋白的透析及定量 | 第29-30页 |
| 2.3 结果 | 第30-32页 |
| 2.3.1 pET28α载体重组质粒鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.2 重组肠毒素蛋白的表达与纯化 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 2.4.1 关于重组肠毒素表达载体的选择 | 第32-33页 |
| 2.4.2 重组葡萄球菌肠毒素的纯化 | 第33-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 重组肠毒素 SEA、SEO 单克隆抗体的制备及鉴定 | 第35-61页 |
| 3.1 材料 | 第35-38页 |
| 3.1.1 重组蛋白、细胞及实验动物 | 第35页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 细胞培养用溶液 | 第35-36页 |
| 3.1.4 单克隆抗体制备相关试剂及配制 | 第36页 |
| 3.1.5 酶联免疫吸附试验（ELISA）相关溶液 | 第36-37页 |
| 3.1.6 免疫印迹试验用试剂 | 第37-38页 |
| 3.2 方法 | 第38-45页 |
| 3.2.1 免疫及筛选用重组肠毒素抗原 | 第38页 |
| 3.2.2 小鼠免疫 | 第38页 |
| 3.2.3 单克隆抗体制备筛选用间接ELISA 方法的建立 | 第38-39页 |
| 3.2.4 杂交瘤细胞株的建立 | 第39-41页 |
| 3.2.5 单克隆抗体的大量制备 | 第41-42页 |
| 3.2.6 单克隆抗体的鉴定及特性分析 | 第42-44页 |
| 3.2.7 肠毒素表位的预测及分析 | 第44-45页 |
| 3.3 结果 | 第45-55页 |
| 3.3.1 间接ELISA 的建立 | 第45-47页 |
| 3.3.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第47-48页 |
| 3.3.3 单抗识别表位分析 | 第48页 |
| 3.3.4 杂交瘤细胞上清及腹水中单克隆抗体效价 | 第48-49页 |
| 3.3.5 免疫印迹（Western blotting）试验 | 第49页 |
| 3.3.6 阻断ELISA 试验 | 第49-50页 |
| 3.3.7 单克隆抗体亲和常数测定 | 第50-51页 |
| 3.3.8 单克隆抗体类型鉴定 | 第51页 |
| 3.3.9 肠毒素单抗特性的预测及分析 | 第51-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-60页 |
| 3.4.1 应用重组葡萄球菌肠毒素制备特异性单克隆抗体 | 第55-56页 |
| 3.4.2 作为超抗原葡萄球菌肠毒素单抗制备的特殊性 | 第56页 |
| 3.4.3 关于葡萄球菌肠毒素单克隆抗体制备的特异性及复杂性 | 第56-57页 |
| 3.4.4 关于单克隆抗体的鉴定 | 第57-58页 |
| 3.4.5 关于单克隆抗体制备过程 | 第58-60页 |
| 3.5 小结 | 第60-61页 |
| 第四章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录1：主要仪器设备 | 第69-70页 |
| 附录2：主要化学试剂 | 第70-71页 |
| 附录3：缩略词表 | 第71-72页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
